国家高技术研究发展计划(2012AA021903)
- 作品数:12 被引量:31H指数:3
- 相关作者:侯继锋杨成民周文涛王威王劲峰更多>>
- 相关机构:中国食品药品检定研究院中国医学科学院北京协和医学院天津协和生物科技发展有限公司更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划四川省科技支撑计划更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学更多>>
- 储存的血小板中血小板微粒的获取及其止凝血功能研究被引量:3
- 2015年
- 目的从储存的手工浓缩血小板中获得具有止血功能的血小板微粒(PMP)。方法流式细胞仪检测常规储存1、3、5、7、9、11 d浓缩血小板中PMP的含量;2 500 g离心30 min处理浓缩血小板,下层血小板沉淀用于检测离心剪切力对血小板CD62p及磷脂酰丝氨酸(PS)表达的影响,上层液离心获得PMP,流式细胞术及荧光底物法等分析评价所获取PMP颗粒的理化性质和生理功能,包括颗粒大小、表面蛋白受体和PS、凝血酶生成能力。结果常规储存9 d的浓缩血小板中PMP含量(2.51±0.47)%较储存1 d的(1.79±0.29)%明显增加(P<0.05);离心剪切力对储存>8 d的血小板CD62p及PS的表达无明显影响;离心获得储存9 d浓缩血小板中的PMP直径为(619.81±196.15)nm,表面含有GPⅠb(CD42b)、GPⅡb-Ⅲa(CD41/CD61)、P-选择素(CD62p)及PS;凝血酶生成试验证实PMP促进凝血酶生成的能力:总蛋白含量分别为0.1、0.4、0.8 mg/m L的PMP溶液对应的TTP值(min)分别为68.4±4.6、45.8±2.7、38.8±3.4,均明显低于对照组80.0±2.8(P<0.05)。结论储存9 d的浓缩血小板释放的PMP明显增加;通过离心方法可直接获这一储存时间段的PMP;所获得的PMP表面保留了与止凝血功能相关的糖蛋白和PS,初步表现出止血功能。
- 郑仙娇王宗奎刘凤娟曹海军林方昭李长清
- 关键词:血小板微粒浓缩血小板止凝血凝血酶生成离心法
- 供血浆者人巨细胞病毒中和抗体的流行病学调查被引量:2
- 2015年
- 目的了解我国山东、安徽及黑龙江省部分地区供血浆者人巨细胞病毒中和抗体效价的流行病学状况,为人巨细胞病毒特异性免疫球蛋白的研制提供科学依据。方法采用微量细胞病变中和试验方法,检测794份供血浆者血浆人巨细胞病毒中和抗体效价水平。结果 794份健康人血浆巨细胞病毒中和抗体效价主要分布在1∶8~1∶64,约71.7%供血浆者HCMV中和抗体效价高于1∶8;其中效价≥1∶181占0.38%,效价≥1∶45约占15%。结论通过筛选高中和效价血浆制备人巨细胞病毒特异性免疫球蛋白切实可行。
- 侯继锋管利东李曼王威宋修庆孙思才
- 关键词:巨细胞病毒中和抗体血清阳性率流行病学调查
- 肌注手足口病(EV71型)人免疫球蛋白的研制
- 2013年
- [目的]研制肌注手足口病(EV71型)人免疫球蛋白,用以治疗重症手足口病。[方法]以特异性血浆为原料,采用低温乙醇法结合离子交换层析制备手足口病(EV71型)人免疫球蛋白,对其层析条件进行优化,制定了手足口病(EV71型)人免疫球蛋白检测的质量标准,并对手足口病(EV71型)人免疫球蛋白相关指标进行检测。[结果]血浆内EV71型中和抗体效价大于1∶60的血浆份数占30%以上,制品各项检测指标符合制定的质量标准。[结论]可直接从自然感染的手足口病的供血浆员中筛选出抗EV71型高效价血浆,制备手足口病(EV71型)人免疫球蛋白。
- 梁小明周星何淑琴黄璠刘敏亮
- 关键词:手足口病免疫球蛋白肠道病毒71型
- HBOCs修饰的研究进展被引量:6
- 2015年
- Hb为基础的载氧药物(HBOCs)在输血治疗中表现出的优势在于能够缓解血液来源短缺,长期保存,降低传播病毒的风险。血红蛋白(Hb)为四亚基蛋白,在体外会迅速分解为二聚体或者单体,迅速经肾脏排出体外,这不仅影响疗效还具有潜在的生理毒性。因此,HBOCs需要解决的关键难点之一就是修饰Hb亚基去除Hb解离所带来的毒性,并有效延长Hb在血管内的半衰期。其有效的反应位点为Hb表面的赖氨酸残基,氨基末端,2,3-DPG的结合位点等,目前国内外常用的修饰剂为羧酸醛类,磷酸吡哆醛类,双阿司匹林,聚乙二醇类等。反应活性受到外界微环境、反应剂的活性等众多因素的影响。
- 周文涛刘嘉馨王红杨成民
- 关键词:HB修饰
- 人胎盘血红蛋白聚合工艺的优化研究被引量:6
- 2013年
- 从影响血红蛋白与戊二醛聚合的相关因素戊二醛加样方式、血红蛋白浓度、戊二醛与血红蛋白摩尔比、反应时间和温度出发,以固定变量的方法逐个研究各因素对聚合产物分子量分布的影响,以达到降低制品平均分子量、提高有效转化率的目的。结果表明:原工艺平均分子量为(350.20±35.45)kD,有效转化率(分子量90~600kD)为53.27%±4.95%;而改进后工艺平均分子量为(158.60±8.70)kD,有效转化率为69.50%±3.70%。此外,改进后工艺应用于中试(扩大30倍)规模的验证性试验,有效转化率和平均分子量均可达到上述小试结果。
- 周文涛李燊李凤娟王劲峰陈刚杨成民
- 关键词:红细胞代用品戊二醛影响因素
- 血红蛋白最佳聚合工艺匹配条件的研究被引量:1
- 2014年
- 目的 探讨以戊二醛为交联剂的血红蛋白类氧载体(HBOCs)的聚合工艺匹配条件的优化研究,进一步降低终产品的平均分子质量和超大分子含量,提高聚合血红蛋白的有效转化率.方法 在前期对人胎盘血红蛋白与戊二醛交联的单因素影响水平的研究基础上,选取戊二醛的加样速度、血红蛋白的质量浓度和戊二醛与血红蛋白的摩尔比3个因素做正交试验以优化血红蛋白聚合工艺的匹配条件.结果 戊二醛与血红蛋白的摩尔比对聚合血红蛋白分子质量分布的影响最大,其次是血红蛋白的质量浓度,最后为戊二醛的加样速度.对平均分子质量的影响分析,不同的戊二醛与血红蛋白摩尔比条件下的平均分子质量间的差异均具有统计学意义(P<0.05),而不同的血红蛋白质量浓度和戊二醛的加样速度条件下的平均分子质量间的差异均无统计学意义(P>0.05);对有效转化率的影响分析,不同的戊二醛与血红蛋白摩尔比和不同的血红蛋白质量浓度条件下的有效转化率间的差异均具有统计学意义(P<0.05),不同的戊二醛加样速度条件下的有效转化率间的差异均无统计学意义(P>0.05);对超大分子含量的影响分析,不同的戊二醛与血红蛋白摩尔比条件下的超大分子含量间的差异均具有统计学意义(P<0.05),不同血红蛋白的质量浓度和戊二醛的加样速度条件下超大分子含量间的差异均无统计学意义(P>0.05).结论 通过以上实验分析,优化确定了血红蛋白聚合工艺的最佳匹配条件.
- 周文涛李燊郝莎莎刘嘉馨王红杨成民
- 关键词:正交试验
- 血液制品“十二五”期间倍增计划可行性分析与策略探讨
- 目的探究'十二五'期间血液制品倍增计划实施策略。方法通过对'十二五'期间血液制品倍增计划重要性、可行性和已有政策分析,参考欧美等发达国家的血浆管理模式,结合中国国情,探讨性提出扩大血浆采集和血液制品供给的实施方案和策略。...
- 侯继锋
- 关键词:血液制品
- 文献传递
- 细胞核染色法检测人免疫球蛋白类制品巨细胞病毒中和抗体效价
- 2017年
- 目的检测静注免疫球蛋白(intravenous immunoglobulin,IVIG)(p H 4)及巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)免疫球蛋白(IG)中的CMV中和抗体效价。方法采用基于微量细胞病变的细胞核染色法检测39批国产IVIG、8批注册检验巨细胞病毒免疫球蛋白(CMV-IG)以及2批国外CMV-IG制品的CMV中和抗体效价。结果 39批IVIG的CMV中和抗体效价几何平均值为361 U/ml,最低效价为234 U/ml,最高效价为502 U/ml;8批注册检验CMV-IG的CMV中和抗体效价几何平均值为1 113 U/ml,最低效价为923 U/ml,最高效价为1 553 U/ml;2批国外CMVIG的CMV抗体效价分别为579 U/ml和163 U/m。8批注册检验CMV-IG的CMV中和抗体效价显著高于39批IVIG的CMV中和抗体效价(P<0.001)。结论国产39批IVIG的CMV中和抗体效价在234~502 U/ml之间,经血浆筛查后投浆制备的CMV-IG显著高于普通IVIG的CMV中和抗体效价。
- 王敏力秦婷婷刘波杨春刘兰军侯继锋
- 关键词:免疫球蛋白巨细胞病毒中和抗体
- 血液制品“十二五”期间倍增计划可行性分析与策略探讨被引量:8
- 2014年
- 目的探究"十二五"期间血液制品倍增计划实施策略。方法通过对"十二五"期间血液制品倍增计划重要性、可行性和现有政策分析,参考欧美等发达国家的血浆管理模式,结合中国国情,探讨性提出扩大血浆采集和血液制品供给的实施方案和策略。结果与结论从相关法律法规和技术指导原则的修订、现代信息技术利用、血浆综合利用率提高、重组技术应用于血液制品生产等多方面,提出了血液制品倍增计划实施策略。
- 陈玉琴叶苗侯继锋
- 关键词:血液制品
- 肌注手足口病(EV71型)人免疫球蛋白层析工艺研究被引量:2
- 2013年
- [目的]优化手足口病(EV71型)人免疫球蛋白的层析工艺条件,为制备治疗手足口病(EV71型)的人免疫球蛋白提供依据。[方法]采用单因素试验和响应面分析法,研究样品pH值、蛋白质浓度和电导率对层析后流穿液中免疫球蛋白纯度的影响。[结果]影响层析流穿液中免疫球蛋白纯度的主要因素为电导率,其次是蛋白质浓度,pH值对层析流穿液中免疫球蛋白蛋白纯度影响最小。手足口病(EV71型)人免疫球蛋白的最佳层析工艺参数为:pH 5.28、蛋白质浓度41.62 g/L、电导率为0.24 m/s。[结论]层析优化后的流穿液中手足口病(EV71型)人免疫球蛋白纯度可达到99.60%,可用于制备高纯度的手足口病(EV71型)人免疫球蛋白。
- 梁小明周星何淑琴黄璠刘敏亮
- 关键词:手足口病免疫球蛋白层析响应面法