浙江省自然科学基金(Y2090891)
- 作品数：4 被引量：8H指数：1
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- 固醇调控核因子bHLH-Zip的原核表达及其抗血清的制备
- 2012年
- [目的]制备固醇调控核因子bHLH-Zip片段及其多克隆抗血清,为细胞固醇代谢及调脂药物研究提供材料。[方法]将人源固醇调节元件结合蛋白SREBP的N端第323-553位氨基酸残基的基因序列即bHLH-Zip片段克隆到表达载体pcDNA4/hismaxA,得到重组质粒pHis-bHLH-Zip,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,IPTG诱导表达;裂解细菌并纯化目的蛋白;用纯化后的蛋白免疫小鼠制备多克隆抗血清,采用间接ELISA法测定效价。[结果]获得纯化bHLH-Zip片段,并制备其多克隆抗血清。抗bHLH-Zip抗血清的效价为1:16000。[结论]bHLH-Zip核因子是一段可溶性蛋白,并可制备产生具有较高效价的多克隆抗血清,这为研究细胞固醇代谢及调脂药物对SREBP通路的影响奠定了基础。
- 马晓菁田男范春雷
- 关键词：固醇调节元件结合蛋白原核表达
- 姜黄素对HepG2细胞固醇调控元件结合蛋白-2表达的影响被引量：1
- 2010年
- 目的研究姜黄素对人肝癌细胞株(Human hepatocellular liver carcinoma cell line,HepG2)固醇调控元件结合蛋白-2(sterol regulatory element-binding protein-2,SREBP-2)基因表达的影响,从信号调控通路水平进一步探讨姜黄素的降胆固醇作用机理。方法分别利用蛋白免疫印迹和实时荧光定量聚合酶链反应(Polymerase Chain Reactionm,PCR)技术研究姜黄素对HepG2细胞SREBP-2核片段碱性螺旋-环-螺旋蛋白(basic helix-loop-helix protein,bHLH)表达及SREBP-2 mRNA的影响。结果20 mol/L姜黄素可以促进HepG2细胞SREBP-2核片段bHLH增多,而对SREBP-2mRNA表达无影响。结论姜黄素可以通过促进HepG2细胞SREBP-2核片段bHLH的增多,上调低密度脂蛋白受体(low density lipoprotein receptor,LDL-R)的表达,起到降低血清胆固醇的作用。
- 窦晓兵陈庆王宇浩豆敏华范春雷
- 关键词：姜黄素人肝癌细胞株
- 姜黄素对人正常肝细胞角蛋白1和内质网蛋白19表达的影响被引量：1
- 2013年
- 目的应用双向凝胶电泳、质谱技术和蛋白免疫印迹研究姜黄素(Curcumin,CUR)对人正常肝细胞蛋白质组的影响。方法随机将人正常肝细胞L-02分成两组,对照组不作任何处理,姜黄素组以25μmol.L-1姜黄素处理L-02细胞24 h。用双向凝胶电泳建立姜黄素组和对照组的双向凝胶电泳图谱,并用Image Master 2D Platinum 6.0软件进行差异蛋白质组分析,所获得的明显差异蛋白质用MALDI-TOF-MS进行鉴定分析,最后用蛋白免疫印迹法进行验证。结果姜黄素作用于人正常肝细胞后,有2个蛋白质的表达发生明显变化,角蛋白1与内质网蛋白19表达均上调。结论上调角蛋白1和内质网蛋白19可能是姜黄素抗肿瘤、抗氧化作用的机制之一。
- 周中运范春雷窦晓兵胡林峰钱颖
- 关键词：姜黄素L-02细胞蛋白质组双向凝胶电泳
- 表没食子儿茶素没食子酸酯抑制LDL的氧化修饰和小鼠巨噬细胞摄取ox-LDL被引量：6
- 2011年
- 茶多酚有抗氧化、降血脂和抗动脉粥样硬化（atheroscle-rosis,AS）作用[1-2]。本实验通过对茶多酚的主要成分表没食子儿茶素没食子酸酯（epigallocatechin gallate,EGCG）进行研究,阐明其抗AS机制。
- 李浩榕王亚楠范春雷
- 关键词：氧化型低密度脂蛋白
