国家自然科学基金(81202755)
- 作品数：7 被引量：34H指数：4
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- 相关机构：浙江中医药大学浙江中医药大学附属第三医院更多>>
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- BAM22多肽对慢性炎性痛大鼠痛阈和电针镇痛作用的影响被引量：8
- 2014年
- 目的采用大鼠右足底注射完全弗氏佐剂(complete freund's adjuvant,CFA)建立大鼠慢性炎性痛模型,观察牛肾上腺髓质22肽(bovine adrenal medulla 22,BAM22)对CFA致大鼠慢性炎性痛和电针(electroacupuncture,EA)镇痛作用的影响。方法将42只脊髓鞘内插管成功的健康雄性SD大鼠右足底注射CFA建立大鼠慢性炎性痛模型,造模后将大鼠随机分为生理盐水组、BAM22组、BAM22+纳洛酮组、生理盐水+EA组、BAM22抗体组和BAM22抗体+EA组,每组7只。生理盐水+EA组和BAM22抗体+EA组均在造模24 h后开始介入电针治疗,电针刺激大鼠双侧足三里、昆仑穴,刺激参数为疏密波,频率2/100 Hz,刺激强度1 mA,时间30 min,每日1次,连续7 d;余组仅以相应固定,不予电针处理。造模后第7天,各组大鼠鞘内注射相应试剂。分别检测造模前和造模后24 h、6 d、7 d时大鼠右足的热缩腿潜伏期(thermal paw withdrawal latency,T-PWL)作为痛阈指标。结果 BAM22多肽、电针组均可明显延长大鼠患侧T-PWL,鞘内注射纳洛酮能部分阻断BAM22多肽对大鼠痛阈的影响;BAM22抗体也可明显反转电针的T-PWL延长效应。结论 BAM22多肽和电针均能显著抑制CFA大鼠慢性炎性痛,电针镇痛作用可能存在与BAM22多肽相关的非阿片机制。
- 池细绿方芳方剑乔张静若刘盈君
- 关键词：电针针刺镇痛完全弗氏佐剂
- Mas相关G蛋白偶联受体C参与电针干预慢性炎性痛及其外周δ-阿片受体机制被引量：7
- 2017年
- 目的:观察电针(EA)干预完全弗氏佐剂(CFA)所致慢性炎性痛的镇痛效应并探讨Mas相关G蛋白偶联受体C(MrgprC)参与EA调制背根神经节(DRG)δ-阿片受体(DOR)的机制。方法:选取健康雄性SD大鼠80只。鞘内置管成功的40只大鼠按照随机区组法分为电针+MrgprC小干扰RNA组、电针+对照小干扰RNA组、模型组、正常组、牛肾上腺髓质8-22肽组,每组8只。大鼠右后足底注射CFA 0.1mL以建立慢性炎性痛模型,分别测量CFA造模后1、2、3、4、5、6d大鼠热辐射撤足潜伏期(TWL)。采用免疫印迹法检测大鼠患侧DRG中DOR总蛋白表达和膜/浆比值,采用免疫荧光法检测大鼠患侧DRG中DOR阳性细胞表达率。结果:与正常组比较,CFA模后1d各组大鼠患侧痛阈显著降低(P<0.01)。与模型组比较,电针+对照小干扰RNA组、电针+MrgC小干扰RNA组、牛肾上腺髓质8-22肽组自CFA造模后3d起痛阈均显著上升(P<0.01)。CFA造模后5d、6d时,电针+对照小干扰RNA组痛阈明显高于同时点的电针+MrgprC小干扰RNA组(P<0.01,P<0.05)。与电针+对照小干扰RNA组比较,牛肾上腺髓质8-22肽组在CFA造模后2d鞘内给予BAM8-22后出现痛阈明显升高(P<0.01)。与模型组比较,电针+对照小干扰RNA组患侧DRG中DOR总蛋白表达、DOR膜/浆比值和DOR阳性细胞表达率均上升(P<0.05,P<0.01)。与电针+对照小干扰RNA组比较,电针+MrgC小干扰RNA组患侧DRG中DOR总蛋白表达、DOR膜/浆比值和DOR阳性细胞表达率显著下降(P<0.05,P<0.01)。结论:MrgprC参与EA对CFA诱导的慢性炎性痛的外周镇痛作用,其机制可能与MrgprC调节患侧DRG中DOR表达及膜转移相关。
- 刘盈君林小溪方芳方剑乔
- 关键词：电针背根神经节Δ-阿片受体
- 电针对慢性炎性痛大鼠镇痛作用及机制研究被引量：10
- 2016年
- 目的观察电针对慢性炎性痛大鼠镇痛作用及患侧背根神经节及脊髓背角Mas相关G蛋白偶联受体C(Mas-related G protein-coupled receptor C,Mrgpr C)的调节机制。方法健康雄性SD大鼠40只,按随机数字表法分为正常组、模型组、针刺组、电针组,每组10只。右后足底注射完全弗氏佐剂(complete Freund's adjuvant,CFA)0.1 m L建立慢性炎性痛模型,分别测量大鼠造模前及干预第1、3、5、7日及干预后患侧足缩腿阈(paw withdrawal thresholds,PWTs)。采用免疫印迹法检测大鼠干预后患侧背根神经节和脊髓背角Mrgpr C表达,采用免疫组化法检测患侧脊髓背角牛肾上腺髓质22肽(bovine adrenal medulla 22,BAM22)含量。结果与正常组同期比较,模型组各时点PWTs降低(P<0.01)。与模型组同期比较,电针组干预第5日及干预后PWTs升高(P<0.05,P<0.01)。与针刺组同期比较,电针组干预后PWTs升高(P<0.05)。与正常组比较,模型组患侧背根神经节Mrgpr C表达及患侧脊髓背角浅层BAM22阳性细胞率升高(P<0.01)。与模型组比较,电针组患侧背根神经节Mrgpr C表达及患侧脊髓背角浅层BAM22阳性细胞率升高(P<0.05)。结论电针对CFA诱导的慢性炎性痛有良好的镇痛效应,其作用机制可能与其上调患侧背根神经节Mrgpr C表达和患侧脊髓背角BAM22含量相关。
- 刘盈君方芳方剑乔张静若池细绿陈华德
- 关键词：背根神经节脊髓背角
- SiRNA干扰慢性炎性痛大鼠患侧背根神经节MrgC表达及PKCε磷酸化的研究被引量：2
- 2015年
- 目的观察鞘内注射小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)对完全弗氏佐剂(complete freund’s adjuvant,CFA)诱导的慢性炎性痛大鼠患侧背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)中Mrg C(Mas-related G protein-coupled receptor C,Mrg C)mRNA与蛋白表达的干扰作用,并观察该作用对大鼠患足痛阈及患侧DRG PKCε丝氨酸729点位磷酸化(phosphorylation of PKCεSer729,p-PKCεSer729)水平的影响。方法健康雄性SD(Sprague-Dawley,SD)大鼠16只,随机分为对照siRNA组,Mrg C siRNA组,每组8只。大鼠脊髓鞘内插管成功后,两组大鼠给予相应药物鞘内注射4 d,1次/d,5μg/d/只。给药第4 d,大鼠右后足底注射CFA 0.1 m L建立慢性炎性痛模型,此后隔日注射药物,直至给药第11 d处死。分别于鞘内置管前、给药前、给药4 d(CFA造模0 h)、给药5 d(CFA造模24 h)、给药11 d(CFA造模7 d)5个时点检测大鼠患足机械缩腿阈(Paw withdrawal thresholds,PWTs)的变化。荧光定量PCR法检测患侧DRG Mrg C的mRNA的表达,免疫荧光法检测患侧DRG Mrg C表达量及p-PKCεSer729的含量。结果与给药4 d比较,给药5 d两组大鼠的PWTs均有显著的下降(P<0.01);给药前后各时点,两组大鼠之间PWTs没有明显差异。观察给药11d时大鼠患侧L4-L6 DRG Mrg C mRNA的表达,与对照siRNA组比较,Mrg C siRNA组各神经节Mrg C mRNA的表达均明显下降(P<0.01);观察大鼠给药11d时大鼠患侧L4-L6 DRG Mrg C与p-PKCεSer729的表达,与对照siRNA组比较,Mrg C siRNA组患侧DRG的Mrg C阳性细胞率明显减少(P<0.01),而p-PKCεSer729的阳性细胞率显著上升(P<0.05)。结论 Mrg C siRNA片段可有效干扰CFA慢性炎性痛大鼠患侧L4-L6 DRG Mrg C mRNA与Mrg C的表达,对Mrg C的干扰作用能显著上调PKCεSer729磷酸化的水平,但不影响大鼠患足机械缩腿阈。
- 林小溪方芳方剑乔刘盈君
- 关键词：背根神经节
- 电针对神经病理性疼痛伴发焦虑大鼠行为学及缰核HCN1表达的影响被引量：2
- 2020年
- [目的]观察电针(electro-acupuncture,EA)对神经病理性疼痛伴发焦虑大鼠行为学的干预作用,以及对缰核中超极化激活环核苷酸门控通道蛋白1(hyperpolarization-activated cyclicnucleotide-gated channels 1,HCN1)和c-fos表达的影响,部分阐明神经病理性疼痛伴发精神障碍的发病机制及EA的干预机制。[方法]32只雄性SD大鼠按完全随机法分为空白对照组、假手术组、坐骨神经分支选择性损伤(sciatic nerve branch selective injury,SNI)组和EA组,每组8只。SNI组和EA组以SNI法制备神经病理性疼痛模型,模型制备第8天起,EA组选取"足三里""昆仑"两穴,以EA治疗,每次30min,1次/d,共3次,其余组别不予治疗。造模前,造模后l、3、5、7、8、9和10d检测机械性缩足反射,造模后第10天采用旷场实验观察大鼠的焦虑情绪,免疫荧光检测缰核HCN1与c-fos的表达。[结果]造模第1天起,与空白对照组比较,假手术组大鼠患侧机械性痛阈各时点差异无统计学意义(P>0.05),SNI组大鼠较假手术组下降(P<0.01);与SNI组比较,EA组大鼠各时点机械性痛阈均上升(P<0.01);4组大鼠健侧机械性痛阈无明显变化(P>0.05)。旷场实验中,SNI组大鼠运动总距离、进入中央区次数、中央区运动距离均低于假手术组(P<0.01,P<0.01,P<0.05),而中央区停留时间仅低于空白对照组(P<0.05),EA组大鼠运动总距离、进入中央区次数和中央区停留时间均少于SNI组(P<0.05,P<0.01,P<0.01),中央区运动距离差异无统计学意义(P>0.05)。各组大鼠健侧内侧缰核(medial habenular nucleus,MHb)、外侧缰核外侧部分(lateral habenular nucleus lateral part,LHb L)和外侧缰核内侧部分(lateral habenular nucleus medial part,LHbM)的HCN1表达差异无统计学意义(P>0.05);与假手术组比较,SNI组患侧各部分HCN1表达水平均增高(P<0.01,P<0.01,P<0.01);与SNI组比较,EA组患侧HCN1表达水平均降低(P<0.01,P<0.01,P<0.01)。各组大鼠健侧MHb与LHb L的c-fos表达差异无统计学�
- 彭志强姚新苗闫坤方菲童思媛方芳
- 关键词：电针神经病理性疼痛焦虑缰核
- 鞘内注射MrgC抗体对电针干预CFA大鼠慢性炎性痛及脊髓背角NR1表达的影响被引量：3
- 2014年
- [目的]观察鞘内注射Mas-related G Protein-coupled C(MrgC)抗体对电针(Electroacupuncture,EA)干预完全福氏佐剂(Complete?Freund's?Adjuvant,CFA)所致大鼠慢性炎性痛及脊髓背角(Spinal dorsal horn,SDH)N-甲基-D-天门冬氨酸受体亚基1(N-methyl-d-aspartate receptors1,NR1)表达的影响。[方法]SD雄性大鼠28只,脊髓鞘内插管成功后建立CFA模型,造模后随机分为生理盐水(Saline)组、MrgC抗体(MrgC Ab)组、MrgC Ab+EA组和Saline+EA组,每组7只。两EA干预组从造模24h后在患侧"足三里"和"昆仑"穴开始电针刺激,参数为2/100Hz、30min,1次/d,连续7d,其余各组均做相应固定处理。造模后7d,各组大鼠鞘内注射相应试剂。在造模前和造模后24h、6d、7d检测大鼠患足热缩退潜伏期(Thermal Paw Withdrawal Latency,T-PWL)。免疫组织化学法检测各组大鼠患侧SDH NR1的表达。[结果](1)各组大鼠在CFA造模前和造模后24h时,T-PWL均无明显差异。第6d时,与Saline组相比,MrgC Ab+EA组和Saline+EA组大鼠患足T-PWL显著延长(P<0.01),MrgC Ab组大鼠患足T-PWL无统计学差异。第7d时,与Saline组相比,MrgC Ab组大鼠T-PWL明显缩短(P<0.05),而Saline+EA组显著延长(P<0.01);与Saline+EA组比较,MrgC Ab+EA组大鼠T-PWL显著缩短(P<0.05)。(2)与Saline组比较,MrgC Ab组SDH NR1表达量显著提高(P<0.01);EA干预后大鼠SDH NR1表达量显著降低(P<0.01),MrgC Ab+EA组大鼠SDHNR1表达量也显著高于Saline+EA组大鼠(P<0.05)。[结论]鞘内注射MrgC抗体能显著拮抗电针对CFA诱导性慢性炎性痛的镇痛作用,电针镇痛效应可能与下调大鼠患侧脊髓背角NR1受体表达有关。
- 张静若方芳方剑乔池细绿吴丽娜
- 关键词：电针
- 电针对慢性炎症疼痛大鼠背根神经节牛肾上腺髓质22肽及其受体基因表达的影响被引量：8
- 2013年
- [目的]观察电针对完全福氏佐剂(complete freund’s adjuvant,CFA)致慢性疼痛大鼠患侧腰背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)牛肾上腺髓质22肽(BAM22)与其感觉神经元特异性受体(SNSR)、MOR与DOR基因表达的影响。[方法]200±20g雄性SD大鼠30只,随机分成正常对照组、模型对照组、电针组,每组10只,模型对照组、电针组右足CFA造模。电针组从造模24h开始治疗,患侧"足三里"穴,2/100Hz,30min,1次/d,治疗10d,其余2组不予治疗。采用辐射热法检测大鼠缩爪潜伏期观察大鼠患侧热痛敏变化,免疫组化法检测患侧背根神经节BAM22多肽的含量,定量PCR(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)法检测患侧背根神经节SNSR、MOR与DOR mRNA的表达。[结果]经过10d的治疗,电针组的痛阈与模型对照组相比,有显著提高(P<0.05)。免疫组化结果显示,电针干预后,患侧背根神经节的BAM22阳性细胞率比模型对照组有显著的提高(P<0.01)。定量PCR结果显示,电针极大地促进了SNSR(P<0.01)、MOR(P<0.01)与DOR mRNA(P<0.01)在患侧DRG中的表达。[结论]电针对CFA大鼠慢性疼痛有良好的干预作用,推测该作用与电针增强患侧腰背根神经节BAM22多肽表达,增强其非阿片受体SNSR与其阿片受体MOR与DOR mRNA表达相关。
- 方芳方剑乔刘喆张静若池细绿
- 关键词：电针受体背根神经节
