江苏省自然科学基金(BK20131063)
- 作品数：17 被引量：15H指数：2
- 相关作者：孙建方温斯健张韡王小坡宋昊更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院中国医学科学院邢台市人民医院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 皮肤恶性黑素瘤肿瘤相关巨噬细胞与上皮间质化指标相关性的研究
- 2015年
- 目的 探讨皮肤恶性黑素瘤标本肿瘤相关巨噬细胞（TAM）浸润情况与肿瘤临床病理特征及上皮间质化指标之间的关系.方法 收集54例皮肤黑素瘤及15例良性色素痣石蜡标本,用免疫组化法对TAM标记CD163及上皮间质化指标上皮型钙黏蛋白、神经型钙黏蛋白及波形蛋白在组织中的表达进行检测.采用SPSS 17.0统计软件进行数据分析,计量资料（x）±s表示,采用t检验、单因素方差分析、多因素线性回归进行数据分析.结果 恶性黑素瘤标本中检测到CD163阳性的TAM,在色素痣标本中未发现明显的CD163阳性细胞.在原位黑素瘤中,TAM计数为16.97±8.74,在侵袭性黑素瘤中,TAM计数为35.08±13.78,差异有统计学意义（P＜0.05）.在有淋巴结转移的TAM计数为56.00±3.07,在无淋巴结转移的TAM计数为28.70±18.52,差异有统计学意义（P＜0.05）.TAM计数在Clark分级中差异有统计学意义（P＜0.05）,且在Ⅰ～Ⅳ级TAM计数随Clark级别增高而增加,Ⅳ级与Ⅴ级之间的TAM计数,差异无统计学意义（P＞0.05）.TAM计数在不同性别、不同年龄、肢端/非肢端、是否溃疡之间比较,差异无统计学意义（P≥0.05）.多因素线性回归结果显示,皮肤恶性黑素瘤组织中,TAM计数与Clark分级、溃疡、肿瘤进展、神经型钙黏蛋白及波形蛋白5个因素相关.结论 皮肤恶性黑素瘤中TAM可能通过促进上皮间质化使肿瘤发展,从而增加肿瘤的恶性程度.
- 吴琼李阿梅邵雪宝臧洁宋昊温斯健姜祎群孙建方
- 关键词：黑色素瘤巨噬细胞上皮-间质转化
- Tim-3对B16F10细胞共培养的小鼠脾淋巴细胞增殖的影响
- 2015年
- 目的:明确T细胞免疫球蛋白黏蛋白-3(Tim-3)对B16F10细胞共培养的小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。方法:构建Tim-3真核表达载体后,CCK-8法检测Tim-3融合蛋白对B16F10共培养的小鼠脾淋巴细胞的增殖。结果:Tim-3融合蛋白转染组淋巴细胞增殖活力低于未转染组和转染空载体组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Tim-3融合蛋白抑制B16F10共培养的小鼠脾淋巴细胞的增殖。
- 吕雅琳周晓伟胡彬曾学思刘毅孙建方
- 关键词：小鼠
- 泛素连接酶Cbl-b在黑素瘤组织和细胞系A375、M14、MV3中的表达及意义被引量：2
- 2016年
- 目的：探讨泛素连接酶Cbl-b在皮肤黑素瘤组织及黑素瘤细胞系A375、M14、MV3中的表达及意义。方法收集69份黑素瘤、30份色素痣组织，采用免疫组化法检测Cbl-b蛋白表达水平。实时荧光定量PCR、免疫印迹法分别检测黑素瘤细胞系A375、M14、MV3及黑素细胞中Cbl-b mRNA及蛋白表达水平。结果69份皮肤黑素瘤标本中，52份（75.36%）表达Cbl-b；30份色素痣标本中，4份（13.33%）表达Cbl-b，两组Cbl-b蛋白表达水平差异有统计学意义（χ2=32.745，P〈0.01）。黑素瘤组织中Cbl-b表达水平与肿瘤进展程度、Clark分级和Breslow厚度均呈正相关（rs分别为0.569、0.654、0.727，均P〈0.01）。实时荧光定量PCR显示，A375、M14、MV3细胞Cbl-b mRNA表达差异有统计学意义（F=176.537，P〈0.01）。免疫印迹法显示，A375细胞Cbl-b蛋白表达水平最高，黑素细胞最低。结论 Cbl-b蛋白在皮肤黑素瘤组织及其细胞株中均高表达。
- 王小坡温斯健粟倩雅宋昊倪娜娜姜祎群陈浩孙建方
- 关键词：肿瘤侵润肿瘤分级CBL-B
- 过表达RhoD对人黑素瘤A375细胞骨架和迁移侵袭的影响被引量：1
- 2016年
- 目的：探讨RhoD对人黑素瘤细胞株A375细胞骨架、迁移和侵袭能力等的影响及作用机制。方法实验分为A375-RhoD组和A375-增强型绿色荧光蛋白（EGFP）组，分别用携带RhoD的慢病毒载体和阴性对照慢病毒载体转染。罗丹明标记鬼笔环肽染色观察细胞骨架，Transwell小室实验检测细胞的迁移和侵袭能力，流式细胞仪检测细胞周期，Western印迹法检测丝切蛋白、磷酸化丝切蛋白、Diaph2和RhoD的表达。结果与A375-EGFP组细胞相比，A375-RhoD组细胞体积增大，应力纤维变细，软弱无力，黏着斑增多；丝状伪足形成增加；皱褶缘和板状伪足无明显变化。Transwell迁移实验显示，A375-EGFP组和A375-RhoD组平均每200倍视野下穿膜细胞数分别为152.67±11.23和72.67±5.03，两组间差异有统计学意义（t =11.25，P 〈0.05）。Transwell人工基底膜侵袭试验显示，A375-EGFP组和A375-RhoD组平均每200倍视野下穿膜细胞数分别为78.33±12.34和9.00±1，两组间差异有统计学意义（t=9.70，P〈0.05）。A375-EGFP和A375-RhoD两组间G1期、S期和G2期细胞所占百分比差异均无统计学意义（P〉0.05）。Western印迹结果显示，A375-RhoD组细胞可在RhoD的刺激下激活下游信号效应分子Diaph2，促进其表达，而A375-EGFP组未能激活，两组间丝切蛋白和磷酸化丝切蛋白表达差异不显著。结论 RhoD过表达可能通过下游效应分子Diaph2调节细胞骨架进而抑制A375细胞的迁移和侵袭能力。
- 温斯健倪娜娜周晓伟吴琼王小坡宋昊张韡孙建方
- 关键词：黑色素瘤细胞骨架A375细胞
- 酪氨酸激酶抑制剂在恶性黑素瘤分子靶向治疗中的进展
- 2015年
- 恶性黑素瘤是一种异质性肿瘤,不同发病部位或不同组织学类型,可能存在不同的基因和信号转导途径的异常.因此,针对异常基因、信号通路的靶向治疗药物的发明和临床应用为晚期黑素瘤患者的个性化治疗提供了新的选择.中国人最常见的黑素瘤是肢端型,该型黑素瘤中最常见的异常基因是c-kit基因.针对c-kit基因的靶向药物酪氨酸激酶抑制剂在治疗晚期黑素瘤方面已有较多体外研究及临床观察.主要介绍酪氨酸激酶抑制剂中的受体酪氨酸激酶抑制剂、多靶点酪氨酸激酶抑制剂和非受体酪氨酸激酶抑制剂3类药物的药理作用机制及国内外治疗黑素瘤的研究进展,以及酪氨酸激酶抑制剂的常见不良反应.
- 周璐陈浩孙建方
- 关键词：黑色素瘤分子靶向治疗
- 肿瘤相关巨噬细胞研究进展被引量：1
- 2015年
- 肿瘤相关巨噬细胞是肿瘤相关慢性炎症中的关键细胞，促进肿瘤生长、增殖、血管生成、侵袭、转移及化疗抵抗。巨噬细胞根据环境不同大致可极化为经典活化型巨噬细胞（M1型）及替代活化型巨噬细胞（M2型）。环氧酶2、核因子KB、T0ll样受体信号途径、缺氧、原癌基因MYC、Notch信号通路及细胞因子等参与肿瘤相关巨噬细胞发生M1-M2型别转化。巨噬细胞的表型及功能随着肿瘤进展的不同阶段而变化，针对巨噬细胞的抗肿瘤药物治疗，应取决于肿瘤所处的阶段。
- 吴琼姜祎群孙建方
- 关键词：巨噬细胞肿瘤表型
- 黑素瘤生物标志物的研究进展
- 2014年
- 黑素瘤是一种高度恶性的皮肤肿瘤,其发生率和致死率在世界范围内逐年上升.达卡巴嗪仍是治疗无手术适应证的转移性黑素瘤的标准治疗药物.由于缺少对治疗反应的预测因子,黑素瘤患者个体治疗方案的选择存在很大的随机性.激活癌基因的突变是重要的黑素瘤标志物,它们可以预测激酶抑制剂的治疗反应并可能是独立的预后判断因子;表观遗传的改变（DNA甲基化、染色质重塑和非编码RNA）也可能成为有价值的黑素瘤生物标志物.免疫学研究发现,Toll样受体的浸润程度可以作为判断黑素瘤预后的一个标志物.这些生物标志物的发现,为黑素瘤的个体化治疗、治疗反应和预后的判断提供了新的可能.
- 温斯健孙建方
- 关键词：黑色素瘤免疫遗传学表观
- 组氨酸三聚体核苷结合蛋白1在黑素瘤组织中的表达及其基因启动子甲基化水平研究被引量：2
- 2016年
- 目的：检测组氨酸三聚体核苷结合蛋白1（HINT1）在黑素瘤中的表达和HINT1基因启动子甲基化状态，探讨HINT1启动子甲基化与临床病理参数的关系。方法采用甲基化特异性PCR（MSP）法检测56例黑素瘤及瘤旁组织和51例色素痣组织中HINT1基因启动子区甲基化水平，免疫组化法检测56例黑素瘤和51例色素痣组织中HINT1蛋白的表达。结果 MSP显示，黑素瘤组织、瘤旁组织及色素痣组织中HINT1基因启动子区甲基化率分别为76.8%（43/56）、33.9%（19/56）和35.3%（18/51），黑素瘤组HINT1基因启动子区甲基化率明显高于瘤旁组织组和色素痣组，且差异有统计学意义（χ2=20.810、18.749，均P〈0.05），瘤旁组织组与色素痣组间差异无统计学意义（χ2=0.022，P〉0.05）。免疫组化显示，56例黑素瘤和51例色素痣组织中分别有12例（21.4%）和42例（82.4%）HINT1蛋白阳性表达，两组阳性率差异有统计学意义（χ2=39.633，P〈0.01）。12例HINT1蛋白阳性的黑素瘤组织中，有6例HINT1基因启动子甲基化，而在44例HINT1蛋白阴性的癌组织中HINT1启动子甲基化率高达84.1%（37/44），两组差异有统计学意义（χ2=6.147，P=0.013）。56例黑素瘤中，HINT1基因启动子区甲基化率在Clark分级Ⅰ~Ⅱ级组（59.1%，13/22）与Ⅲ~Ⅴ级组（88.2%，30/34）间差异有统计学意义（χ2=6.365，P=0.012）。结论 HINT1在黑素瘤组织中低表达，其机制可能与启动子区发生高甲基化有关；HINT1启动子区高甲基化可能参与黑素瘤的发生及发展。
- 温斯健倪娜娜张韡宋昊王小坡邵雪宝李阿梅程伟孙建方
- 关键词：黑色素瘤甲基化
- 兄弟分患色素异常性皮肤淀粉样变和皮肤异色病样淀粉样变病被引量：4
- 2015年
- 例1男，33岁。全身皮肤色素异常25年。8岁时无明显诱因躯干、四肢皮肤颜色加深，散在米粒大色素脱失斑，后逐渐增多，泛发面颈部、躯干、四肢。未曾发生水疱，无光敏感，无自觉症状。既往体健，
- 王光平孙建方
- 关键词：皮肤淀粉样变淀粉样变病色素异常性皮肤色素异常色素脱失斑
- CCL18在恶性黑素瘤中的表达及其与血管内皮生长因子、Ki67表达的相关性研究被引量：1
- 2016年
- 目的：探讨趋化因子配体18（CCL18）在恶性黑素瘤（恶黑）组织中的表达和临床意义，与血管内皮生长因子（VEGF）、Ki67表达的相关性。方法用免疫组化方法检测58例恶黑石蜡标本中CCL18、VEGF及细胞增殖核抗原Ki67的表达，同时检测20例色素痣石蜡标本中CCL18的表达水平。对CCL18的表达与恶黑临床病理及VEGF、Ki67的表达进行相关性分析。用免疫荧光方法验证CCL18在恶黑组织中的表达。结果 CCL18在恶黑组阳性率为84.48%（49/58），而在色素痣组均无表达，差异有统计学意义（χ^2=45.46，P〈0.01）。CCL18在恶黑的表达与肿瘤Clark分级、Breslow厚度呈正相关（rs值分别为0.609、0.644，均P〈0.01）；在有无溃疡以及有无淋巴结转移组间差异有统计学意义（均P〈0.05）。CCL18的表达在不同性别、年龄、肢端/非肢端恶黑患者组间差异无统计学意义（均P〉0.05）。恶黑中CCL18阳性表达水平与VEGF表达水平呈正相关（rs=0.727，P〈0.05），与Ki67表达水平无相关（P〉0.05）。免疫荧光显示，恶黑组织中肿瘤细胞胞质表达CCL18。结论 CCL18在恶黑组织中高表达，与肿瘤侵袭、转移有一定关系。
- 宋昊王白鹤邵雪宝程伟熊竞舒王小坡王建曾学思徐秀莲孙建方
- 关键词：病理过程血管内皮生长因子类KI-67抗原
