四川省科技厅科技支撑计划项目(4160220)
- 作品数：1 被引量：5H指数：1
- 相关作者：袁惠辜海英陈昌金赵梓亦杨雪梅更多>>
- 相关机构：成都中医药大学附属医院四川大学更多>>
- 发文基金：四川省科技厅科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 多效生长因子基因转染小鼠脂肪来源干细胞的实验研究被引量：5
- 2013年
- 目的探讨多效生长因子基因(pleiotrophin,Ptn)转染小鼠脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)作为组织工程血管的重建种子细胞的可行性,并检测其基因表达,为缺血性病损治疗提供新手段。方法取3只清洁级近交系C57BL/6W雌性小鼠(体重15～20 g)腹股沟皮下脂肪,采用酶消化法体外分离、培养ADSCs,流式细胞仪行细胞表面标志物CD29、CD44鉴定。实验分为转染pIRES2-LEGFPN1组(含Ptn基因编码序列,A组)和转染pLEGFP-N1负对照组(含GFP基因编码序列,B组)。ADSCs转染后,A组以最佳筛选浓度200μg/mL的G418对转染后细胞进行筛选,流式细胞仪鉴定转染后细胞免疫表型。实时荧光定量PCR、Western blot检测A、B组细胞Ptn基因和PTN蛋白表达。结果实验成功分离、培养小鼠ADSCs;细胞表面标志物CD29、CD44阳性率分别达99.5%、95.8%,双阳性率达93.6%。A组转染Ptn后细胞表面标志物CD29、CD44阳性率分别达99.1%、95.6%,双阳性率达93.4%。实时荧光定量PCR、Western blot检测示,A组Ptn基因和PTN蛋白相对表达水平均显著高于B组(P<0.05)。结论 Ptn基因能转染小鼠ADSCs并高表达PTN蛋白,为组织工程血管构建种子细胞选择提供了新思路。
- 陈昌金袁惠辜海英杨雪梅赵梓亦
- 关键词：血管组织工程脂肪来源干细胞转染小鼠
