陕西省自然科学基金(SJ08-ZT09)
- 作品数：9 被引量：24H指数：3
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- 相关机构：陕西师范大学西安交通大学医学院第一附属医院西安交通大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- MMP-10在人膀胱癌T24细胞系体外侵袭中的作用
- 2010年
- 目的:探讨基质金属蛋白酶MMP-10在人膀胱癌细胞体外侵袭中的作用。方法:设计并合成针对MMP-10的siRNA和阴性对照siRNA,以脂质体转染法将其分别导入具有体外高侵袭潜能的T24细胞系,RT-PCR和Western blot法检测MMP-10基因及蛋白表达水平。Transwell体外侵袭实验比较干扰MMP-10前后T24细胞体外侵袭潜能的变化。结果:MMP-10-siRNA可有效沉默MMP-10基因的表达,并降低T24细胞系的体外侵袭能力。结论:MMP-10可能在膀胱癌侵袭转移过程中发挥重要作用,抑制MMP-10可为预防及治疗转移性膀胱癌提供新的思路。
- 屈卫星惠荣陈伟丁上书程永毅贺大林
- 关键词：膀胱癌基质金属蛋白酶10RNA干扰
- 人结直肠癌细胞Annexin A2基因敲除细胞系的建立被引量：1
- 2012年
- 为研究ANXA2与结直肠癌发展的关系以及其在肿瘤发展过程中作用的构效关系,构建了ANXA2基因敲除质粒重组子,然后导入人结直肠癌细胞系Caco2,经过一系列筛选过程,最终建立了基因敲除ANXA2的Caco2细胞系(ANXA2-/-Caco2).经过PCR和Western Blotting检测,确认该细胞系无任何野生ANXA2表达.
- 邢睿欢牟茂森高晓杰聂红娟杨敏敏徐竹熊艳吴琴丰陈亦雯宋铭侯颖春
- 关键词：基因敲除
- FAK表达水平对人肝癌细胞运动、增殖、凋亡等的影响被引量：2
- 2011年
- 构建了FAK基因siRNA质粒表达载体并用磷酸钙法转染人肝癌细胞SMMC—7721,采用半定量RT-PCR、Western Blot检测FAK siRNA转染后SMMC—7721细胞FAK mRNA和蛋白表达的变化.以损伤修复法检测FAK siRNA对SMMC—7721细胞迁移的影响,以四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测FAK siRNA转染对SMMC—7721细胞生长的抑制作用,以Hoechst染色法检测FAK siRNA对SMMC—7721细胞凋亡的影响.结果显示,特异性的FAK siRNA片段能有效降低SMMC—7721细胞FAK mRNA和蛋白的表达水平;转染FAK siRNA后,SMMC—7721细胞生长和迁移均受到抑制,凋亡细胞的数目也显著增多.表明靶向FAK基因的siRNA可以明显抑制SMMC—7721细胞的运动和增殖等生物学行为.
- 张楠楠魏丽丽强荣兵聂红娟高晓杰侯颖春
- 关键词：RNAI肝癌细胞运动细胞增殖和凋亡
- 黏着斑激酶与肿瘤发生、发展及预后的关系被引量：7
- 2011年
- 黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)作为一种非受体蛋白酪氨酸激酶,因其与肿瘤间的密切联系而备受关注。多年研究发现,FAK在许多肿瘤中过表达,通过多条信号通路调控细胞侵袭、迁移、增殖及凋亡等,从而参与肿瘤的发生、发展进程。研究表明FAK可以作为肿瘤预后因子,是潜在的抗肿瘤治疗靶点。本文对FAK与肿瘤进程的关系作一综述,以期更好地认识FAK在肿瘤发生、发展过程中所起的作用,为相关研究者提供资料参考。
- 杨艳丽李鹏鸽葛玉婷尹田乐侯颖春
- 关键词：黏着斑激酶肿瘤发生肿瘤发展肿瘤预后
- 脂质体介导p27基因转染对喉癌细胞系Hep-2生长影响的研究
- 2009年
- 目的探讨p27基因对喉癌Hep-2细胞系生长的抑制作用,为喉癌发生机制的研究和基因治疗提供理论依据。方法采用基因转染技术,将p27cDNA转染到喉癌Hep-2细胞系中,了解其对细胞增殖能力及细胞周期的影响。结果转染p27基因的喉癌细胞生长受到抑制,其在软琼脂上克隆形成能力降低了大约4倍。对细胞周期分析表明,处在G0～G1期的细胞由32.2%增加到66.9%,经Dotblot、Western blot杂交和免疫组化证实,p27mRNA表达有明显差异(P<0.01),p27的蛋白表达量有明显差异(P<0.01),说明p27蛋白具有生长抑制功能,其作用点为G1～S期。结论提高喉癌细胞中p27的表达,能抑制肿瘤细胞的生长,导入p27基因是一种治疗喉癌的新途径。
- 孙安孙永柱高卓平席爱民段学军陈谊辉
- 关键词：喉肿瘤基因肿瘤抑制转染
- 陕西省宫颈人乳头瘤病毒感染亚型分布特征分析被引量：7
- 2015年
- 目的：明确陕西省及周边地区成年女性宫颈人乳头瘤病毒（ HPV）感染基因亚型的分布及年龄特征。方法分析2009年11月至2015年4月在西安交通大学第一附属医院妇科门诊22306例宫颈样本21种HPV基因分型检测结果。 HPV分型检测采用凯普医用核酸分子快速导流杂交基因芯片技术。结果 HPV总感染率为28．84％。高危型HPV（16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68）感染率为26．26％，占HPV阳性标本的91．05％；低危型HPV（6、11、42、43、44、81）感染率为4．81％；高危／低危HPV混合感染率为2．22％。感染率最高的基因亚型为HPV16（9．31％），其他常见高危亚型依次为HPV52（5．08％）、HPV58（4．99％）、HPV18（2．09％）、HPV31（1．95％）、HPV39（1．86％）、HPV33（1．74％）；常见低危亚型为 HPV6（2．02％）、11（1．56％）、81（1．02％）。 HPV总体感染率和高危HPV亚型感染高峰年龄在30～34岁之间，以后随年龄增长逐渐降低，各年龄组间HPV检出率有显著性差异（χ2值为4．743～85．971，均P＜0．05）。结论陕西省及周边地区女性宫颈HPV处于较高的感染水平；其HPV感染基因型符合亚洲人群分布规律，但有一定区域性差异；随着年龄的增高，高危型HPV感染比例逐步缓慢增加。该结果对区域宫颈癌防治和疫苗制备具指导意义。
- 樊静李娜张忠明安瑞芳李娇赵静妮邹余粮苟文丽杨筱凤
- 关键词：人乳头瘤病毒亚型宫颈
- 敲减基质金属蛋白酶-10抑制人膀胱癌T24细胞系裸鼠皮下移植瘤生长
- 2011年
- 目的:探讨敲减MMP-10对人膀胱癌T24细胞系裸鼠皮下移植瘤生长的影响。方法:设计并合成针对人MMP-10的siRNA及阴性对照siRNA,分别注射至裸鼠皮下膀胱癌T24细胞系移植瘤,每周两次监测并比较各组裸鼠体重、瘤体大小,于接种后第5周处死裸鼠,取出皮下移植瘤,并比较各组瘤体重量的差异,并通过免疫组织化学染色检测MMP-10表达水平。结果:皮下注射膀胱癌T24细胞建立裸鼠皮下移植瘤模型,成瘤率达100%。瘤体内注射MMP-10 siRNA可以显著抑制膀胱癌T24细胞裸鼠皮下移植瘤的生长(P<0.05);观察结束时MMP-10 siRNA组所剥离的瘤体重量明显低于对照组(P<0.05)。各组裸鼠的平均体重并没有明显改变(P>0.05),提示瘤体内注射MMP-10 siRNA对裸鼠的一般情况影响不大,并没有明显的毒性或副作用。免疫组织化学染色结果示MMP-10 siRNA组MMP-10的染色强度及阳性细胞数均明显低于普通成瘤组和阴性对照组,提示瘤体内注射siRNA可以在体内有效敲低MMP-10的表达。结论:MMP-10在人膀胱癌T24细胞裸鼠皮下移植瘤的生长过程中发挥重要作用;瘤体内注射MMP-10 siRNA可以有效且安全地抑制膀胱癌T24细胞裸鼠皮下移植瘤的生长。
- 屈卫星惠荣陈伟丁上书程永毅贺大林
- 关键词：基质金属蛋白酶-10膀胱癌
- 膜联蛋白A2对人肝癌细胞生物学行为的影响被引量：5
- 2010年
- 为了研究膜联蛋白A2(ANXA2)基因表达水平与人肝癌细胞生物学行为之间的关系,采用已优化转染条件的磷酸钙法将针对ANXA2的siRNA重组质粒导入人肝癌细胞SMMC-7721并观察对靶基因表达及细胞生物学行为的影响。以半定量RT-PCR和Western blotting检测转染后不同时间(24h、48h、72h和96h)ANXA2mRNA及蛋白表达变化;以MTT法、Hoechast33258染色及体外损伤修复实验等分析抑制ANXA2表达后对SMMC-7721细胞生物学行为的影响。结果显示:所设计的四条siRNA序列均不同程度抑制了ANXA2的表达(p<0.05),且呈时间依赖性;细胞生长能力及运动能力被显著抑制(p<0.05),其抑制效应与ANXA2表达敲低程度呈正相关。结论:ANXA2的高表达水平与肝癌细胞的凋亡、生长及运动能力密切相关,以RNAi方法抑制该基因的表达可以有效地抑制肝癌细胞的恶性生物学行为。上述结果为肝癌的实验性基因治疗研究提供了新的思路和对策。
- 魏丽丽李润册强荣兵张楠楠刘月月张国芳杨梅侯颖春
- 关键词：膜联蛋白A2RNA干扰肝癌
- 磷酸钙法转染瘤细胞效率的优化被引量：2
- 2011年
- 为了探索磷酸钙法转染瘤细胞的最佳转染条件,以磷酸钙法将ANXA2特异性重组干扰质粒pU6H1-GFP-siANXA2导入人肝癌细胞SMMC-7721并优化了以下转染参数：转染前细胞汇合率、质粒剂量、质粒复合物形成时间、孵育时间、血清、抗生素有无及细胞传代次数等.以荧光显微镜观察GFP表达、半定量RT-PCR和western blotting评估转染效率.结果显示,转染前细胞50%~60%汇合率、8μg质粒用量（直径30 mm培养皿）、20~30 min沉淀形成时间及6 h孵育时间转染效率较高;细胞传代次数及抗生素有无对转染效率影响不显著,但血清在实验条件下是必不可少的.转染48 h后,GFP表达进入高峰期、ANXA2 mRNA和蛋白水平下调（P〈0.05）.
- 魏丽丽强荣兵张楠楠刘月月侯颖春
- 关键词：细胞转染转染效率肝癌细胞
