国家自然科学基金(39970707)
- 作品数：34 被引量：110H指数：8
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- 异体移植气管中骨形态发生蛋白诱导软骨再生的实验被引量：1
- 2006年
- 目的:比较骨形态发生蛋白2在犬自体、异体、冷冻异体气管移植体内诱导软骨再生的作用。方法:实验于2004-03/10在第四军医大学唐都医院实验外科完成。21只杂种犬随机等分为3组,自体移植组、异体移植组、冷冻后的异体移植组。各组动物颈部切除4环气管段作为移植体,植入骨形态发生蛋白2后埋入腹腔大网膜中。骨形态发生蛋白2均以胶原溶液作为缓释载体,用注射器直接注入各软骨环间。术后5周处死实验动物,通过对标本组织学观察、碱性磷酸酶活性和钙含量测定,对各标本的新生软骨进行观察和定量分析。结果:各组实验犬均存活到预杀期。①定量组织学观察:各实验组骨形态发生蛋白2植入区均可见新生软骨细胞和软骨岛,HPLAS-1000病理图像分析系统计算各环间新生软骨的像素面积,自体移植组、异体移植组、冷冻后的异体移植组的新生软骨面积差异有显著性犤2573.6±738.4,1691.3±743.6,2482.9±827.5,F=5.711,P<0.05犦自体移植组和深低,而温冷冻后的同种异体移植组差异无显著性。②碱性磷酸酶活性和钙含量测定:自体移植组、冷冻后的异体移植组与异体移植组均差异有显著性犤体移植组:(7.00±0.50)μkat/g,(5.48±1.15)mg/g;冷冻后的异体移植自组:(7.00±0.83)μkat/g,(5.03±0.91)mg/g;异体移植组:(5.00±0.67)μkat/g,(3.57±0.98)mg/g,P<0.05犦,自体移植组与深低温冷冻后的同种异体移植组间无显著性差异(P>0.05)。结论:骨形态发生蛋白2能在气管移植体内有效地诱导出新生软骨,在冷冻后的异体气管移植体内的作用效果与自体气管移植体内相似,明显优于异体气管移植体。
- 刘勇李小飞程庆书闫小龙汪健
- 关键词：软骨气管移植骨形态发生蛋白质类软骨再生
- 犬同种异体气管移植中骨形成蛋白-2对气管软骨碱性磷酸酶的影响
- 2005年
- 目的:明确局部应用骨形成蛋白2(BMP2)对犬同种异体移植段气管碱性磷酸酶(ALP)活性的影响.方法:将西安地区健康雄性杂种犬40只随机平均分为实验组与对照组,两组间动物各取一6环颈段气管,交换后原位移植,应用犬双侧胸骨舌骨肌-胸骨甲状肌联合肌瓣包裹移植段气管提供良好血运,试验组在移植段气管环间注射BMP2/I型胶原复合物,对照组仅注射I型胶原作为空白对照,术后2,4,8,1wk分别处死实验动物,取移植段气管标本,观察其大体形态HE染色观察软骨环的微观变化;改良钙钴法测定移植段软骨组织中碱性磷酸酶的分布.结果:术后4wk后实验组移植段气管通畅度高于对照组(0.84±0.04,P<0.05);HE染色发现各个时间点两组移植段软骨细胞密度无显著性差异(P>0.05);应用图像分析软件计算切片染色阳性的像素面积,发现在术后8wk及以前,试验组动物的碱性磷酸酶染色阳性面积比例明显高于对照组(0.29±0.02,P<0.05),术后12wk两者的差别无统计学意义(P>0.05).结论:BMP2可以提高移植段气管软骨碱性磷酸酶表达,增强气管软骨的钙化,维持移植段气管环状软骨形态及气管环的稳定,为临床应用同种异体气管移植解决大段气管缺失奠定基础.
- 王律李小飞卢强程庆书刘勇阎小龙徐鉷
- 关键词：气管碱性磷酸酶骨形态发生蛋白质类
- 不同时间段内骨形态发生蛋白诱导移植气管软骨再生
- 2005年
- 目的:研究不同时间段内骨形态发生蛋白诱导犬自体移植气管软骨再生的作用.方法:36只杂种犬,随机分为A,B两组,颈部切去5个气管环,A组气管环间植入重组人骨形态发生蛋白2/胶原复合物,B组为空白对照组,然后植入自体腹腔大网膜中.在术后1,2,3,5,9,12wk分别从两组中各取3例移植段气管行组织学检查和骨钙素(BGP)的放免测定.结果:rhBMP2植入区内软骨再生存在于移植后的各个时间段,且以术后2wk至5wk较为明显.两组标本BGP水平测定均随着时间的延长而增高,除术后1wk无显著性差异(P>0.05),其余各时间段两组差异均有显著性(P<0.05).结论:rhBMP2可诱导气管移植段软骨再生,但在不同时间段的作用效果不同.
- 刘勇李小飞闫小龙卢强王律汪健
- 关键词：气管骨形态发生蛋白质类软骨
- bFGF对rhBMP-2诱导犬气管损伤后软骨再生的作用
- 2008年
- 目的:研究应用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)促进重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)诱导犬气管环部分缺损后软骨再生的可行性.方法:切除连续5个气管环前端的部分软骨,形成1cm×3cm的气管原位软骨缺损,建立犬气管软骨缺损模型.将18只犬随机分为A,B,C组,每组6只,A组为对照组,于软骨缺损处未行任何处理,B组于气管软骨缺损部位植入rhBMP-2/聚乙烯吡咯烷酮(PVP)复合材料,C组于气管软骨缺损部位植入rhBMP-2/bFGF/PVP复合材料.于术后12wk处死各实验犬,行大体及组织学检查,组织学半定量测定新生软骨情况.结果:A组气管软骨损伤残端出现气管软骨软化现象,气管管腔狭窄明显,软骨缺损处未见新生软骨生成;B,C两组气管软骨损伤部位残端未见气管软化,管腔狭窄不明显,软骨缺损处可见新生软骨及软骨岛生成,其中C组诱导新生软骨面积较B组更大(P<0.05).结论:rhBMP-2/PVP及rhBMP-2/bFGF/PVP缓释系统均可诱导气管软骨再生,rhBMP-2/bFGF/PVP缓释系统效果优于rh-BMP-2/PVP缓释系统.bFGF可能具有促进rhBMP-2诱导犬气管损伤后软骨再生的作用.
- 李小飞闫小龙韩静汪健卢强徐鉷程庆书
- 关键词：骨形态发生蛋白碱性成纤维细胞生长因子气管软骨
- 兔骨髓基质干细胞与软骨细胞混和培养体内成软骨(英文)被引量：6
- 2008年
- 背景：诱导因子及软骨微环境是影响骨髓基质干细胞成软骨分化及软骨形成的主要因素。目的：利用少量软骨细胞以共培养方式诱导骨髓基质干细胞体内成软骨。设计、时间及地点：2004-09/2005-03在解放军第四军医大学口腔医院病理教研室完成的随机对照动物实验。材料：选择清洁级新西兰兔15只用于细胞支架复合物的种植,随机分为混合细胞组、软骨细胞组、骨髓基质干细胞组,5只/组。取新生1-3d龄新西兰兔5只用于骨髓基质干细胞、软骨细胞的分离培养。聚羟基乙酸无纺网支架为上海易括公司产品,材料直径15μm,平均间距150-200μm,孔隙率97%,厚2mm。方法：混合细胞组将骨髓基质干细胞与软骨细胞按3：1混匀,调整细胞密度为6.0×10^10·L^-1,接种于经培养液预湿的塑形聚羟基乙酸5mm×5mm的支架上,然后在复合物周围滴加含胎牛血清的DMEM液培养1周。软骨细胞组、骨髓基质干细胞组的细胞密度调整为6.0×10^10·L^-1后同法接种于支架上。各组兔麻醉后于背部一侧皮下组织植入对应的细胞-支架复合物。主要观察指标：植入后第8周行新生软骨大体观察和苏木精-伊红、Masson三色染色。结果：各组细胞与聚羟基乙酸支架黏附情况良好。植入8周后,混和培养组和软骨细胞组均形成了成熟的软骨样组织,并基本保持复合物初始的大小和形状,两组新生软骨外观及组织学特征较接近。骨髓基质干细胞组在体内培养过程中未形成软骨组织,而是形成了纤维结缔组织。结论：骨髓基质干细胞与软骨细胞按3：1混合形成的微环境,能有效诱导骨髓基质干细胞向软骨细胞分化,并促进骨髓基质干细胞的体内成软骨。
- 倪云峰李小飞刘源雷战军卢强
- 关键词：骨髓基质干细胞软骨细胞聚羟基乙酸
- 深低温冷冻对鼠异体异位气管移植体免疫调节的影响
- 2011年
- 目的研究应用深低温冷冻处理气管移植体,异体异位移植后移植体的结构变化,并观察术后CD3阳性淋巴细胞在移植体中的浸润情况,探索应用深低温冷冻来降低免疫排斥反应的可行性。方法取SD大鼠5个环气管段冷冻后作为供体气管移植体,行冷冻或未冷冻同种异体异位移植于Wister大鼠腹腔大网膜内。64只Wister大鼠按接受移植体是否在术前行深低温冷冻及术后处死时间,等分为8组,于术后1周、4周、8周、12周分别取标本行大体及病理学检查,组织学半定量测定上皮、软骨情况,免疫组织化学法检测各组CD3阳性淋巴细胞浸润的情况。结果冷冻组气管移植体管腔通畅度优于未冷冻组(P<0.01);1、4、8周两组比较,冷冻组上皮积分低于未冷冻组(P<0.01),而软骨形态结构积分较未冷冻组高(P<0.01);冷冻组软骨积分不随术后存活时间延长减低,未冷冻组上皮积分与术后存活时间成反比,且该组软骨形态结构积分与术后存活时间成反比。CD3阳性细胞浸润主要见于黏膜下层及气管环间,可见于气管软骨,冷冻组CD3阳性细胞浸润数积分低于未冷冻组,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论异体异位移植后,气管移植体管腔结构保持良好,可长期存活,深低温冷冻可降低气管移植体的抗原性,减轻移植后的免疫排斥反应。
- 闫小龙韩静周勇安姜涛韩勇汪健倪云峰赵晋波李小飞
- 关键词：气管移植物排斥
- 骨形态发生蛋白质诱导犬的自体气管移植段软骨再生被引量：6
- 2002年
- 目的 :将重组人骨形态发生蛋白 2 (rhBMP 2 )植入犬的自体气管移植段内 ,促进新生软骨形成 ,克服移植后软骨软化吸收造成的移植段气管塌陷。 方法 :2 4只杂种犬随机等分为三组 ,颈部切除 5个气管环段作为移植段。A组原位再植 ,外覆带蒂大网膜 ;B组移植段植入rhBMP 2后埋入腹腔大网膜中 ;C组移植段植入rhBMP 2后原位再植 ,外覆带蒂大网膜。以上rhBMP 2均以胶原溶液作为缓释载体 ,用注射器直接注入各环间。术后 1、2、4、8周处死动物 ,标本行大体及组织学观察。 结果 :三组移植体软骨环均有不同程度的吸收。B、C组移植体的rhBMP 2植入区有软骨再生 ,且以B组再生更明显。 结论 :rhBMP 2可刺激气管移植段软骨再生 ;胶原可充当rhBMP 2的缓释载体 。
- 张涛李小飞王道喜程庆书刘锟王春杰
- 关键词：气管移植软骨再生
- 骨形态发生蛋白对兔骨髓间充质干细胞成软骨分化的定向诱导作用被引量：9
- 2005年
- 目的研究骨形态发生蛋白(BMP)对兔骨髓间充质干细胞(MSCs)的定向诱导作用,探讨MSCs的成软骨能力。方法分离并培养兔MSCs,BMP诱导MSCs向软骨细胞分化,观察其形态学改变及碱性磷酸酶(ALP)活性。将诱导后的MSCs接种PGA无纺网体外培养2周,将MSCsPGA无纺网复合体植入裸鼠背部皮下,2个月后取材,进行组织学观察。结果经BMP诱导后,MSCs的形态由长梭形向多角形和三角形转化,群体倍增时间约为3.0d。诱导5、10d后,ALP活性为0.282±0.015,0.502±0.012,明显高于对照组0.265±0.010,0.315±0.021(P<0.01),ALP染色阳性。MSCsPGA无纺网复合体植入裸鼠后,组织学可见软骨陷窝,陷窝内可见核蓝染的成软骨细胞,证实MSCs具有体内成软骨能力。结论经BMP诱导的MSCs向软骨细胞分化和增殖,在裸鼠体内可形成软骨组织。
- 汪健李小飞田苗邓三明卢强
- 关键词：骨髓间充质干细胞骨形态发生蛋白成软骨分化软骨细胞分化ALP活性成软骨细胞
- 犬自体气管移植中骨形态发生蛋白复合不同载体的成软骨比较被引量：3
- 2002年
- 目的 以三种可溶性物质作为重组人骨形态发生蛋白 - 2 (rhBMP - 2 )的载体 ,寻求适合作为rhBMP- 2在犬的自体气管移植段内诱发新生软骨的缓释载体。方法 32只犬随机等分 4组 ,颈部切取 5环气管段作为移植段。等量的rhBMP - 2分别与葡聚糖、聚乙烯吡咯烷酮 (PVP)和胶原复合 ,另设无载体作为对照 ,均注射入各移植段内。然后将移植段埋入自体的腹腔大网膜中。于术后 4周处死动物取材 ,行大体及组织学观察。结果 移植段固有软骨环被部分地吸收。PVP和胶原组软骨环间rhBMP - 2复合物植入区有大量新生软骨形成 ,且以胶原组更明显。结论 PVP和胶原均可协助rhBMP - 2诱发气管移植段软骨再生 ,胶原更适合充当rhBMP - 2的缓释载体。
- 张涛李小飞程庆书刘锟王道喜
- 关键词：软骨气管移植缓释载体葡聚糖
- 犬异体气管移植的实验研究被引量：9
- 2003年
- 目的 通过研究与移植气管狭窄相关的因素 ,寻求可行的解决移植气管狭窄的方法。方法 16只杂种犬随机分为A、B 2组 ,每组 8只 ,行原位气管移植 ,带血管蒂大网膜包绕。A组犬术后不给予特殊处理 ,B组犬术后给予免疫抑制剂。术后 4周处死动物 ,行大体及病理学检查 ,并测定移植气管的通畅度 ,组织学半定量测定上皮及软骨情况。 结果 B组犬移植气管结构保持较好、狭窄程度低、上皮及软骨积分均较A组高 ,并且 2组犬移植体的通畅度与上皮及软骨积分均成正相关。结论 应用免疫抑制剂有助于移植体结构的保持。上皮的再生及软骨的保持与气管移植体的狭窄密切相关。
- 张涛李小飞王道喜程庆书刘锟
- 关键词：免疫抑制剂
