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白细胞介素-21在慢性乙型肝炎病毒感染中的作用被引量：7: 2012年; 细胞因子网络是炎症及免疫应答反应的重要效应因子,特别对于获得性免疫网络的构成起到了重要的作用。近年来,以细胞因子为切入点,探讨慢性感染性疾病的发病机制、诊断、预防和治疗策略成为重要的研究方向,如白细胞介素（IL）-28B在丙型肝炎（丙肝）抗病毒治疗[1]、IL-17在重度肝。; 马世武黄璇侯金林; 关键词：乙型肝炎病毒白细胞介素-21

siRNA抑制感染细胞模型中HCV复制的研究被引量：1: 2011年; 目的:探讨siRNA能否有效抑制丙型肝炎病毒(HCV)感染细胞中HCV的复制。方法:用HCV JC1质粒体外制备HCV RNA转录体,转染Huh-7.5.1细胞,收集细胞上清,再次孵育Huh-7.5.1细胞以建立HCV感染细胞模型,并用间接免疫荧光检测细胞内HCV核心蛋白的表达。将针对HCV NS5B基因的siRNA转染HCV感染细胞(浓度为4、40和200 nmol/L,时间为24 h、48 h和72 h),将4、40和200 nmol/L siRNA转染正常Huh-7.5.1细胞,并设空白对照、脂质体对照、无关siRNA对照以及IFNα-2b(1 000 IU/ml)组,用荧光定量PCR检测细胞内HCV RNA和PKRmRNA水平。结果:HCV感染的Huh-7.5.1细胞中检测出HCV核心蛋白表达。40 nmol和200nmol/L siRNA 24 h组及4、40、200 nmol/L siRNA 48 h和72 h组,HCV RNA水平分别降至58%、54%、29%、17%、17%、33%、22%、19%,明显低于对照组(P<0.05或P<0.01)。1 000 IU/mlIFN的各时间组HCV RNA水平均明显低于对照组(P<0.05或P<0.01)。各浓度siRNA组的PKR mRNA的表达与对照组无明显差异(P>0.05)。结论:针对HCV NS5B区的siRNA能够明显抑制HCV感染细胞中HCV的复制,而不引起双链RNA依赖的蛋白激酶(PKR)基因表达的激活。; 邢小康何继亮陈智; 关键词：HCV复制 NS5B 感染细胞

miR-122对IFN-α抗HCV效应的影响被引量：5: 2011年; 目的:探讨miR-122对α-干扰素(IFN-α)抗丙型肝炎病毒(HCV)效应的影响。方法:给感染HCV的Huh7.5.1予miR-122模拟物(20 nmol/L、100 nmol/L、400 nmol/L)和(或)IFN-α(1 000 IU/ml)处理,采用荧光定量PCR检测HCV RNA水平;给Huh7.5.1细胞感染不同数量HCV(107拷贝,106拷贝,105拷贝)和(或)IFN-α处理,荧光定量PCR检测HCV RNA水平。结果:IFN-α以时间依赖方式抑制HCV复制,在48 h时使HCV RNA下降了83%。miR-122模拟物呈剂量依赖性促进HCV RNA复制(P<0.05)。IFN-α的抗病毒效应与miR-122模拟物水平(20 nmol/L、100nmol/L、400 nmol/L)成反比,与对照组比较有显著性差异(73.3%±3.5%,64.67%±5.5%,56.33%±5.1%vs 84%±4.5%,后两组P<0.05)。IFN-α的抗病毒效应与HCV载量呈反比(105拷贝组vs 107拷贝组,P<0.05)。结论:在细胞感染模型中,miR-122促进HCV的复制,并且,miR-122的表达可部分中和IFN-α的抗HCV效应。; 李苏娟陈智朱海红; 关键词：MIR-122 IFN-Α 抗病毒效应

VEGF和p53在肝细胞性肝癌组织中的异常表达与预后的关系被引量：5: 2012年; 目的:探讨VEGF和p53在肝癌组织中表达与肝癌预后的关系,为肝癌的防治提供新的思路。方法:回顾性分析了2006年1月到2009年8月收治的40例肝癌患者的临床资料,采用免疫组织化学法测定肝癌组织、癌旁组织和正常组织中VEGF和p53的表达。结果:VEGF和p53阳性表达率在肝癌组分别为62.5%和47.5%,癌旁组分别为22.5%和2.5%,在正常组未检测到VEGF和p53阳性表达,三组之间比较有显著性差异(P<0.05);本组40例肝癌患者术后均获随访,22例复发;复发组患者癌组织中VEGF和p53的阳性表达率均高于未复发组,相比较有显著性差异(P<0.05)。结论:在肝癌组织中存在VEGF和p53的异常表达,VEGF和p53异常表达与肝癌的预后密切相关。; 郭晓东张苧月赵景民熊璐周光德赵雨来; 关键词：肝癌抑癌基因 VEGF P53 免疫组化

ALT持续正常及持续或间断升高的慢性乙型肝炎患者肝脏硬度值分析被引量：7: 2014年; 目的目前ALT持续正常(PNALT)以及持续或间断升高(PIEALT)的慢性乙型肝炎(CHB)患者肝脏硬度值(LSM)的数据十分有限。本研究对该组患者LSM范围及其影响因素进行了探讨,以供临床应用参考。方法将在2012年9月-2013年3月于本院就诊的208例初治CHB患者纳入研究,均接受瞬时弹性扫描仪(FS)检查。PNALT组:在最近1 a随访至少3次,每次间隔2个月以上,ALT水平均正常,入组时ALT正常;PIEALT组进一步分为ALT轻度升高(过去1 a随访中ALT水平至少有1次升高但<2×ULN)以及ALT明显升高(过去1 a随访中ALT水平至少有1次升高>2×ULN),入组时ALT<2×ULN。根据现有的研究结果,当ALT<2×ULN时,用于诊断以及排除进展性肝纤维化的标准分别为LSM≥10.6 kPa和LSM<7.4 kPa。计量资料分析采用t检验、方差分析和秩和检验,计数资料采用χ2检验,相关因素采用双变量相关分析及Logistic回归分析。结果受试人群平均LSM为(6.2±2.9)kPa。在PNALT患者中,LSM≥7.4 kPa占14.3%(18/126),LSM≥10.6 kPa占2.4%(3/126)。在总体PIEALT患者中,这个比例分别是35.4%(29/82)以及13.4%(11/82)。多元回归分析中,ALT>1×ULN(OR=2.63,P=0.037)、男性(OR=5.29,P=0.012)是LSM≥7.4 kPa的独立影响因素;HBV DNA定量>5 log10拷贝/ml是LSM≥10.6 kPa唯一的独立影响因素(OR=13.84,P=0.046)。结论在PIEALT和PNALT的CHB患者中,分别有35%及14%的患者不能排除进展性肝纤维化的可能;大约13%的PIEALT患者根据LSM结果可判断为进展性肝纤维化。对于ALT>1×ULN、HBV DNA拷贝数的对数值大于5的男性CHB患者,建议对其进行密切随访。; 钟曼华梁携儿陈永鹏杨淑玲彭劼谭文娟于文轩孙剑; 关键词：乙型弹性成像技术

慢加急性重型乙型病毒性肝炎患者血清干扰素γ水平的检测及临床意义被引量：6: 2012年; 目的:探讨血清干扰素-γ(IFN-γ)在慢加急性重型乙型病毒性肝炎(acute-on-chroni hepatitis B lover failure,ACHBLF)发病中的作用,旨在为ACHBLF的诊治提供理论参考。方法:采用ELSIA法测定30例ACHBLF患者和30例CHB患者血清IFN-γ水平,采用全自动生化仪检测肝功能常规指标。结果:ACHBLF组IFN-γ水平显著高于CHB组,相比较有显著性差异(P<0.05);ACHBLF组TBIL、ALT水平显著高于CHB组,相比较有显著性差异(P<0.05);ACHBLF组PTA水平显著低于CHB组,相比较有显著性差异(P<0.05);ACHBLF患者的IFN-γ水平与TBIL呈显著正相关(r=0.818,P<0.01),与PTA呈显著负相关(r=-0.529,P<0.05),而与ALT无明显相关性(r=0.172,P>0.05)。结论:IFN-γ参与ACHBLF的发病,并且是ACHBLF病情严重程度的重要指标之一。; 郭晓东张苧月熊璐胡瑾华周光德赵雨来; 关键词：干扰素Γ 肝炎

Huh7.5.1细胞感染HCV观察干扰素治疗后miRNA表达谱变化被引量：1: 2011年; 目的:探寻可能对丙型肝炎病毒(HCV)有作用的mi-RNA。方法:用体外转录得到的HCV感染正常的Huh-7.5.1细胞,然后加入干扰素作用,采用mi-RNA表达谱芯片技术,分别测定Huh-7.5.1细胞正常组和HCV感染组及干扰素作用组的mi-RNA的表达,采用2(-ΔΔCT)法分析组间microRNA的表达情况。结果:以正常Huh-7.5.1细胞中表达的mi-RNA为基准,经过筛选发现13种mi-RNA在HCV感染后表达上调,而在干扰素治疗后则出现下调;另外还有7种mi-RNA则在HCV感染后出现表达下调,而在干扰素治疗后则发生上调。结论:mi-RNA10a、mi-RNA21、mi-RNA149和mi-RNA152及mi-RNA210可能与HCV的复制转录有关。; 鲁兖鲁兖邢小康陈智; 关键词：丙肝病毒

基于RNA干扰技术和microRNA调控的丙型肝炎治疗研究进展被引量：4: 2011年; 丙型肝炎病毒(HCV)感染是一个全球性的健康问题,全球约有1.7亿人感染了HCV,慢性丙型肝炎常导致肝硬化、肝癌等严重的肝脏疾病,但至今尚无针对HCV感染的有效疫苗或抗体。RNA干扰(RNAi)是一种抵御病毒感染的最具前景的治疗策略,近年来基因治疗领域的发展进一步提升了其临床应用的可行性。RNAi技术加速了对HCV生物学基础的认知,并揭示了许多可作为治疗新靶点的病毒和宿主细胞分子。同时,基因运载体系的发展以及microRNA(miRNA)在HCV感染中关键作用的发现,使得基于RNAi和miRNA的抗病毒治疗策略具有巨大前景。文中就丙型肝炎治疗的RNAi靶点,肝脏靶向基因运载体系,microRNAs抗HCV感染潜能等研究领域中的最新进展作一综述。; 刘艳宁楼国华陈智; 关键词：肝炎病毒属 RNA干扰微RNAS 短发卡RNA 小RNA

VEGF和MMP-9在肝癌病理诊断中的应用价值被引量：4: 2012年; 目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在原发性肝癌(PHC)组织中的表达及病理诊断价值。方法:采用免疫组化法,检测80例PHC标本和30例正常组织中VEGF和MMP-9的表达。结果:PHC组VEGF和MMP-9阳性表达率分别为68.8%、62.5%,均显著高于对照组(23.3%、26.7%),相比较有显著性差异(P<0.05)。肿瘤直径≥5 cm、无包膜和低分化肿瘤组织中VEGF和MMP-9阳性表达均显著高于肿瘤直径<5 cm、包膜完整和高中分化肿瘤组,相比较有显著性差异(P<0.05);而VEGF和MMP-9阳性表达在不同性别和年龄构成之间、有癌栓组和无癌栓组之间、AFP阳性组和阴性组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:VEGF和MMP-9在PHC组织中呈高表达,VEGF和MMP-9可以作为PHC的预后指标。; 郭晓东张苧月赵景民熊璐周光德赵雨来; 关键词：血管内皮生长因子基质金属蛋白酶-9 原发性肝癌组织

丙型肝炎病毒F蛋白缺失对病毒复制及感染性的影响被引量：2: 2012年; 探索了F蛋白缺失及核心蛋白(Core)二级结构改变对丙型肝炎病毒(HCV)复制和感染性的影响.利用定点突变方法,将J6JFH1的核心基因引进5个终止密码子以中断F蛋白的表达,从而获得F蛋白缺失的病毒复制子J6JFH1/ΔF.体外制备RNA转录体,并电穿孔转染Huh7.5.1细胞,采用免疫荧光、实时荧光定量PCR方法以及病毒感染等方法,观察F蛋白缺失对病毒复制、蛋白质表达及转染细胞上清感染性病毒颗粒产生的影响.在此基础上,构建5个单一突变病毒体,对HCV核心蛋白进行二级结构分析,观察核心蛋白二级结构对HCV复制和翻译的影响.结果显示,转染48 h后,J6JFH1/ΔF与野生型J6JFH1相比,J6JFH1/ΔF转染阳性细胞数明显降低,细胞内HCV RNA水平降低约95%,J6JFH1/ΔF转染后不同时间点细胞上清中HCV RNA拷贝数和病毒颗粒也明显降低.5个单一突变体不影响核心基因二级结构,病毒在细胞内复制和感染性与野生型水平一致.J6JFH1/ΔF所产生的改变可能是由于5处突变导致核心基因二级结构改变而造成的.结果说明,HCV F蛋白缺失不影响病毒的复制翻译及病毒颗粒的包装释放,核心蛋白二级结构的改变对病毒复制和翻译则产生较大影响.; 王文博许刚王岩陶清源任浩戚中田; 关键词：丙型肝炎病毒 F蛋白核心蛋白病毒复制

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国家科技重大专项(2012ZX10002-003)

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