国家自然科学基金(30900672)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- 癌性锚蛋白重复序列在胃癌细胞凋亡中的作用被引量：2
- 2010年
- 目的探讨癌性锚蛋白重复序列（Gankyrin）在人胃癌细胞的表达，以及在尼荚舒利诱导细胞凋亡过程中的改变。方法培养不同分化程度的人胃癌细胞系[MKN28（高分化）、AGS（低分化）、MKN45（低分化）和SGC7901（中分化）]，以尼美舒利处理细胞，应用四甲基偶氮唑盐试验和流式细胞术检测细胞活力及细胞凋亡，实时PCR和Western印迹法检测Gankyrin基因和蛋白表达。结果在4种不同分化程度的人胃癌细胞系中，均存在不同水平的Gankyrin基因和蛋白表达。尼美舒利以时间剂量依赖方式抑制AGS、SCC7901细胞增殖。与对照组相比，尼美舒利400μmol/L处理48h可诱导AGS、SGC7901细胞显著凋亡（细胞凋亡率分别为0．57％±0．19％比23．30％±2．50‰和0．88％土0．17％比16．80％±1．55％，P均〈0．01）。在AGS细胞凋亡过程中，Gankyrin基因和蛋白表达水平下降。以尼美舒利作用后24h（0.0035±0．0014）和36h（0．0980±0．0160）改变最为显著（对照组为0．4690±0．1190，P值均〈0．01）。结论在人胃癌细胞中存在Gankyrin基因和蛋白表达。Gankyrin可能参与尼美舒利诱导的AGS胃癌细胞凋亡。
- 张燕捷王碧君程芃包王洁朱黎明杨文燕戴强江佛湖
- 关键词：胃肿瘤尼美舒利细胞凋亡
- 应用酵母双杂交技术筛选与癌性锚蛋白重复序列相互作用的蛋白
- 2011年
- 目的:筛选与癌性锚蛋白重复序列(Gankyrin)相互作用的蛋白。方法:构建诱饵(Bait)质粒pGB-Psmd10-1,采用β-半乳糖苷酶滤膜分析检测其自身转录活性,以Bait质粒筛选人Hela细胞MATCHMAKER cDNA文库,共转染重复验证阳性克隆,并测序鉴定。结果:成功构建Bait质粒,经验证对报告基因LacZ无自激活作用。以Bait质粒筛选人Hela细胞cDNA文库,获得83个克隆,其中5个克隆经重复验证确定为阳性克隆,测序结果显示其cDNA为Psmc4的3段不同剪接体(NM_006503.2,NM_153001.1)。结论:在人Hela细胞中,Psmc4为与Gankyrin相互作用的蛋白。
- 包玉洁戴强杨文燕程芃王碧君张燕捷
- 关键词：酵母双杂交HELA细胞
