福建出入境检验检疫局科技计划项目(FK2008-05)
- 作品数:3 被引量:14H指数:3
- 相关作者:李海明沈建国吴祖建陈启建林双庆更多>>
- 相关机构:福建出入境检验检疫局福建省农业科学院福建农林大学更多>>
- 发文基金:福建出入境检验检疫局科技计划项目国家自然科学基金福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 3种方法检测黄瓜绿斑驳花叶病毒的灵敏度对比分析被引量:8
- 2010年
- 以带有黄瓜绿斑驳花叶病毒的黄瓜叶片为材料,应用双抗体夹心酶联免疫吸附测定法(DAS-ELISA)、反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)、核酸斑点杂交(NASH)技术,进行检测灵敏度比较研究。3种方法检测灵敏度试验结果表明:DAS-ELISA、RT-PCR和斑点杂交可以检测出黄瓜病叶的最小量分别是39.6μg、0.25ng和5ng。RT-PCR检测灵敏度高于地高辛标记的核酸斑点杂交技术,DAS-ELISA检测灵敏度最低。
- 李海明沈建国吴祖建陈启建
- 关键词:黄瓜绿斑驳花叶病毒反转录-聚合酶链式反应核酸斑点杂交
- 黄瓜绿斑驳花叶病毒的生物学与分子检测鉴定被引量:4
- 2011年
- 根据已报道的黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)外壳蛋白(CP)基因序列合成1对引物,对侵染黄瓜的CGMMV广西分离物CP基因片段进行扩增和序列分析,结果表明该分离物与CGMMV-GX-G(DQ647384)同源性最高,达100%。将病毒分离物摩擦接种于5种葫芦科植物、普通烟、心叶烟及苋色藜上,结果表明在葫芦科植物上均表现症状,在苋色藜上产生局部侵染,不侵染普通烟和心叶烟。接种实验发现不同植物及接种时间对寄主的发病有一定影响。上述植物接种后进行RT-PCR检测,结果表明,从接种病毒的葫芦科植物上和苋色藜上均扩增到该病毒的特异性条带,而普通烟、心叶烟和健康对照没有扩增出目的条带。生物学与分子检测鉴定结果表明CGMMV-GX属于CGMMV西瓜株系。
- 李海明吴祖建陈启建沈建国
- 关键词:黄瓜绿斑驳花叶病毒生物学检测分子检测RT-PCR
- TC/IC-RT-PCR检测黄瓜绿斑驳花叶病毒被引量:6
- 2012年
- 根据GenBank上登录的黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)外壳蛋白基因保守序列,设计特异性引物,利用试管捕捉RT-PCR(TC-RT-PCR)和免疫捕捉RT-PCR(IC-RT-PCR)技术对黄瓜绿斑驳花叶病毒进行检测.结果表明,TC-RT-PCR和IC-RT-PCR均具有良好的特异性,检测灵敏度分别比DAS-ELISA高10和100倍;通过对一批进境黄瓜样品的检测,验证了2种检测技术的实际应用效果.因此,本研究建立的TC-RT-PCR和IC-RT-PCR检测技术,可有效应用于CGMMV的快速检测.
- 沈建国林双庆蔡伟李海明王念武翁瑞泉黄可辉
- 关键词:黄瓜绿斑驳花叶病毒