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强光照处理菠菜叶片产生的交联聚合物中D1蛋白部分发生磷酸化被引量：4: 2005年; 利用D1蛋白特异性抗体, 在强光照(800～2500 mol photons·m 2·s1)处理3 h的菠菜叶片类囊体膜中检测到4种D1蛋白聚合物, 它们的相对含量与处理时光照强度相关. 进一步分析表明, 70 kD聚合物为D1蛋白与CP43交联产物, 65和60 kD聚合物是D1蛋白与D2蛋白交联产物, 41 kD聚合物是D1蛋白与细胞色素b559 α亚基交联物. 1000mol photons·m2·s1光照处理生成的D1/Cyt b559聚合物最多, 光强增加时其含量下降. 磷酸化苏氨酸抗体Western blot分析结果显示, D1/Cyt b559和D1/CP43聚合物中存在磷酸化蛋白; 外加磷酸酯酶处理后, 磷酸化的D1/Cyt b559和D1/CP43聚合物减少. 上述结果表明, 强光照处理叶片引起D1蛋白与其他PSⅡ核心蛋白交联, 所生成的聚合物中部分D1蛋白以磷酸化形式存在.; 魏慧敏郭军伟张爽黄博刘映秋杜林方; 关键词：D1蛋白蛋白磷酸化光抑制

拟南芥STN7和STN8蛋白激酶的结构预测和功能分析被引量：3: 2008年; STN7和STN8蛋白激酶分别参与了LHCⅡ蛋白和PSⅡ核心蛋白的磷酸化。作者用折叠识别的方法建立了拟南芥蛋白激酶STN7和STN8核心结构域的三维结构,同时结合其他生物信息学方法对STN7和STN8蛋白的结构和作用机制进行了探讨,选择特异位点合成多肽,并制备抗体。结果表明STN7和STN8蛋白激酶活性区域的电荷和形状互补性决定了两者作用底物蛋白的差异,蛋白印迹结果显示分别制备得到了STN7特异抗体和STN8特异抗体,证实结构预测的正确。; 胡源杜林方蒋佳宏; 关键词：蛋白磷酸化

一种高效经济的高质量植物RNA提取方法被引量：28: 2004年; 建立了一种高效经济的植物RNA提取方法 .在提取缓冲液中加入蔗糖、氯化钾和镁离子以提供对RNA分子的保护 .破碎后的细胞于提取缓冲液中裂解后 ,用酚 /氯仿变性并去除内源RNA酶和其他蛋白质 ,而后用pH 5 6 的NaAc沉淀RNA .用该方法提取RNA的得率较高 ,经电泳检测 ,RNA的完整性很好 .RNA印迹分析和RT PCR也都得到很好的结果 .该方法还使实验成本大大降低 .; 张年辉韦振泉何军贤杜林方梁厚果; 关键词：RNA分离植物 RNA酶

低温对水稻类囊体膜蛋白磷酸化及光合机构光能分配的影响被引量：19: 2006年; 研究了低温胁迫对水稻类囊体膜蛋白磷酸化和光能分配的影响。类囊体膜蛋白组分的SDS-PAGE和免疫印迹分析结果显示,低温弱光条件下光系统Ⅱ(PSⅡ)功能蛋白的稳态水平均有所降低。低温(77K)荧光分析表明,低温处理后类囊体膜光能吸收明显下降,而且FPSⅡ/FPSⅠ的比值均较对照组下降,表明低温弱光条件下有更多的激发能被分配到PSⅠ。低温处理同时还改变了类囊体膜蛋白磷酸化水平,捕光天线LHCⅡ蛋白中lhcb1的磷酸化水平明显降低,lhcb2的磷酸化水平增加,进一步证实lhcb2向PSⅠ移动,改变光能分配。PSⅡ反应中心D1、D2蛋白和核心天线CP43的磷酸化水平增高,有利于PSⅡ二聚体的稳定。; 郭军伟魏慧敏吴守锋杜林方; 关键词：低温胁迫蛋白磷酸化光合机构

温度对拟南芥STN7激酶表达及LHCⅡ蛋白磷酸化的影响: 2008年; 拟南芥STN7蛋白激酶参与了LHCⅡ蛋白的磷酸化和状态转换过程.本研究根据STN7激酶的蛋白序列,合成了一段含11个氨基酸的亲水肽段,与牛血清蛋白BSA偶联后,免疫家兔制备得到合成多肽的抗体,免疫双扩散和Western blot检测表明该多肽抗体效价和特异性较高.借助该多肽抗体、磷酸化抗体和低温(77K)荧光,研究了温度对拟南芥LHCⅡ蛋白的磷酸化、状态转换和STN7激酶表达的影响.结果表明,温度不仅调节LHCⅡ蛋白的磷酸化水平,而且还调节STN7激酶的表达水平.另外,LHCⅡ蛋白的磷酸化随温度的变化趋势与STN7激酶表达量的变化趋势相对一致,并且与状态转换密切相关,为LHCⅡ蛋白磷酸化及STN7激酶表达调控机理研究提供了有用的信息.; 胡源高秀蒋佳宏冉艳杜林方; 关键词：合成多肽温度影响

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国家教育部博士点基金(20020610094)