国家自然科学基金(30800734)
- 作品数：5 被引量：13H指数：2
- 相关作者：李亚宁刘大群沈凤英吴伟刚闫红飞更多>>
- 相关机构：河北农业大学河北北方学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划河北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63负调控基因nsdB的克隆及序列分析
- ＜正＞玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63是从马铃薯疮痂病自然衰退的土壤中分离得到的一株颉抗菌。温室和大田试验表明该菌株及其次生代谢产物对棉花黄萎病菌、瓜类白粉病菌、番茄灰霉病菌等多种重要的植物病原菌具有很强的抑制作...
- 冀红柳刘大群孟庆芳李亚宁
- 文献传递
- 玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63负调控基因nsdAmgh的克隆及序列分析被引量：4
- 2009年
- nsdA(Negative regulator of Streptomyces differentiation)基因是天蓝色链霉菌中发现的与抗生素合成相关的负调控基因。根据天蓝色链霉菌A3(2)的序列设计引物扩增玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63菌株中的该基因,经测序和序列分析表明,由保守序列引物nsdA-2R和nsdA-2L克隆到的Men-myco-93-63菌株中的该基因800 bp片段与已知nsdA基因核苷酸保守区域序列同源性达到99%,由全长序列扩增引物nsdA WZ-R和nsdA WZ-L克隆到的该基因包含一个完整的开放阅读框,共编码369个氨基酸,与变铅青链霉菌和天蓝色链霉菌A3(2)中的nsdA基因的核苷酸序列同源性达到100%,氨基酸序列同源性达到99%。该全长基因命名为nsdAmgh,其在玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63中的发现为阻断该负调控基因以期获得抗生素高产工程菌株提供了重要依据。
- 沈凤英刘力强吴伟刚李亚宁刘大群
- 关键词：玫瑰黄链霉菌MEN-MYCO-93-63克隆
- 玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63 nsdA_(mgh)基因的验证被引量：1
- 2010年
- 玫瑰黄链霉菌(Streptomyces roseoflavus)Men-myco-93-63是分离自马铃薯疮痂病自然衰退土壤中的一株拮抗菌。该菌株及其发酵液对棉花黄萎病菌(Verticillium dahliae)等多种重要的植物病原真菌都具有较强的抑制作用。nsdA(negative regulator of Streptomyces differentiation)基因是从天蓝色链霉菌中发现的与抗生素合成相关的负调控基因。根据天蓝色链霉菌A3(2)的序列设计引物,PCR扩增出Men-myco-93-63nsdAmgh基因,经斑点杂交法验证,nsdAmgh确实在该生防菌中存在。该基因的发现有助于进一步了解该生防菌产生抗生素调节的分子机制,也为抗生素高产菌株的获得提供了新的靶标。
- 沈凤英吴伟刚冀红柳李亚宁刘大群
- 关键词：玫瑰黄链霉菌MEN-MYCO-93-63斑点杂交核酸探针
- 生防链霉菌Men-myco-93-63遗传转化体系的建立和优化被引量：7
- 2009年
- 玫瑰黄链霉菌(Streptomyces roseoflavus)Men-myco-93-63是分离自马铃薯疮痂病(S. scabies)自然衰退土壤中的一株拮抗菌。该菌株及其发酵液对棉花黄萎病菌(Verticillium dahliae)、瓜类白粉病菌(Sphaerotheca fuliginea Poll.)等多种重要的植物病原菌具有很强的抑制作用,有良好的生防应用潜力。为了对玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63中一些功能基因进行研究,得到高产抗生素的工程菌株,首先应对该菌的遗传转化条件进行优化。作者分别以基因整合型质粒pSET152和基因破坏型质粒pKC1139为出发质粒,ET12567(PUZ8002,pSET152/pKC1139)为供体,Men-myco-93-63孢子和菌丝体为受体,选取MS、PDA、TSB琼脂培养基、燕麦培养基为不同的培养基进行接合转移试验。结果表明MS培养基为接合转移的最适培养基,经验证,已成功地将质粒pSET152/pKC1139转入到了Men-myco-93-63中。以孢子为受体时,孢子预萌发条件为50℃热激10min,37℃温育2.5h,转化效率是10-7～10-6。以菌丝体为受体时,转化效率是10-7～10-6,但菌丝培养过程中容易出现污染。另外,抗生素的覆盖时间对接合转移效率的影响较明显,16～18h覆盖效果最好。
- 沈凤英李亚宁刘力强吴伟刚刘大群
- 关键词：玫瑰黄链霉菌
