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湖南省科技计划项目(2008FJ3160)
作品数:
2
被引量:3
H指数:1
相关作者:
杨开焰
文言广
陈道瑾
李小荣
艾专产
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相关机构:
中南大学湘雅三医院
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发文基金:
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文言广
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1篇
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RhoA基因shRNA表达载体的构建及鉴定
被引量:2
2010年
目的:构建针对RhoA基因的shRNA表达载体并进行鉴定。方法:针对人RhoA的mRNA序列,设计并合成编码的shRNA的两条寡核苷酸序列,经退火成互补双链,再克隆至pGPU6/GFP/Neo质粒,构建重组体pGPU6/GFP/Neo—RhoA,进行酶切及测序鉴定,然后脂质体转染LoVo细胞。荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达。结果:将合成的DNA序列退火后克隆到载体,酶切及测序证实质粒为所需的序列。结论:成功地构建了针对RhoA基因的shRNA表达载体,为下一步进行RNAi的相关研究奠定了基础。
杨开焰
陈道瑾
李小荣
文言广
关键词:
RHOA
SHRNA
结肠癌
质粒
沉默RhoA基因对结肠癌LoVo细胞体内生长的抑制作用
被引量:1
2011年
目的 RNA干扰使RhoA基因沉默后对结肠癌LoVo细胞在裸鼠体内生长的影响。方法构建靶向RhoA基因的shRNA真核表达载体,转染LoVo细胞,筛选RhoA基因沉默的稳定克隆。采用Western blot法检测RhoA蛋白的表达水平。将稳定转染RhoA shRNA表达载体、转染空载体和未转染的LoVo细胞分别接种于裸鼠皮下,4周后测量瘤体的体积和重量;免疫组化检测肿瘤组织RhoA,VEGF和MMP-2蛋白的表达。结果 RhoA shRNA转染组瘤体的体积与瘤重明显低于其他两对照组(P<0.01)。免疫组化结果显示,RhoA shRNA染组瘤体组织RhoA,VEGF和MMP-2蛋白表达均较两对照组显著降低(P<0.01)。结论沉默RhoA可以抑制结肠癌LoVo细胞移植瘤的生长。
杨开焰
陈道瑾
李小荣
艾专产
文言广
关键词:
结肠肿瘤
RHOA
裸鼠
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