重庆市教委科研基金(KJ080319)
- 作品数：4 被引量：5H指数：1
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- 重组E.coli LLO/WT1诱导树突状细胞成熟并促进特异性抗肿瘤免疫被引量：1
- 2009年
- 目的:观察重组疫苗E.coli LLO/WT1诱导人外周血树突状细胞(dendritic cell,DC)成熟及其致敏的T细胞对WT1+肿瘤细胞的杀伤作用.方法:以E.coli为对照,采用E.coliLLO/WT1刺激健康人外周血树突状细胞后,流式细胞术分析DC的CD83,CD86和HLA-DR的表达,MTT法观察活化DC促进T细胞增殖和杀伤WT1+人胃癌细胞SGC-7901的效果,ELISA检测DC及DC和T细胞混合培养上清液内IL-12和IFN-γ的含量.结果:E.coliLLO/WT1较E.coli刺激的DC表达更高水平的CD83,CD86和HLA-DR,其阳性率分别为78.1%,83.4%,93.2%和65.8%,61.2%,75.8%;两组DC培养上清内IL-12的含量分别为(270.42±3.85)ng/L和(204.17±4.23)ng/L(P<0.05);E.coli LLO/WT1活化的DC较E.coli活化的DC更明显地促进了同源T细胞增殖,混合培养细胞上清液内IFN-γ的含量也更高,分别为(86.32±2.00)ng/L和(44.71±1.45)ng/L(P<0.05);活化的T细胞发挥了更强的溶解WT1+SGC-7901的作用,其杀伤率分别为68.44±3.78和36.76±2.63(P<0.05).结论:重组疫苗E.coliLLO/WT1有效地活化了人外周血树突状细胞,并促进了WT1+特异性抗肿瘤T细胞免疫.
- 蒋小卫徐曼
- 关键词：E.COLI
- 重组疫苗E.coli LLO/OVA诱导树突状细胞成熟并表达趋化因子及受体
- 2009年
- 目的:探讨重组疫苗E.coliLLO/OVA诱导树突状细胞成熟和表达趋化因子及其受体的作用.方法:采用基因芯片杂交及RT-PCR检测经E.coliLLO/OVA刺激后小鼠骨髓树突状细胞(BMDC)的NF-κB信号通路相关分子和趋化因子及其受体mRNA的表达,流式细胞分析BMDC活化状况及趋化因子受体CXCR4的表达.结果:未成熟BMDC表达趋化因子基因Ccl2,Ccl4,Ccl6,Ccl9,Ccl17,Ccl22,Cxcl2,Cxcl4和趋化因子受体基因Ccr2,Ccr5和Ccr7.经E.coliLLO/OVA刺激后4～8 h,BMDC明显上调表达基因Myd88,Nf-κb1,Ccl3,Ccl5,Ccl7,Ccl22,Cxcl1,Cxcl9和Ccr12,同时下调表达趋化因子受体基因Ccr2和Ccr5,但持续表达Ccr7.经该疫苗刺激后8 h,BMDC上调表达基因Tlr2,Myd88,Nf-κb1和Cxcr4.该疫苗刺激后12 h,BMDC下调一系列趋化因子和趋化因子受体基因表达,仅持续表达基因Ccl5和Cxcr4.经疫苗刺激24 h后BMDC上调表达CD40,CD80,CD86,MHC-II类分子及CXCR4.结论:重组疫苗E.coliLLO/OVA可能通过Myd88/NF-κB信号途径诱导了小鼠骨髓树突状细胞成熟并表达一系列趋化因子及趋化因子受体基因,尤其上调了趋化因子受体CXCR4的表达.
- 徐曼徐光绪王渝琦戴明燊
- 关键词：趋化因子趋化因子受体
- 重组疫苗E. coli LLO/OVA促进小鼠树突状细胞NOD1受体活化并表达IFN-γ
- 2009年
- 目的探讨重组疫苗E.coli LLO/OVA诱导树突状细胞的细胞内受体NOD(nucleotide-binding oligomerizationdomain)活化及表达IFN-γ的作用。方法采用基因芯片杂交分析经E.coliLLO/OVA刺激后小鼠骨髓树突状细胞(bonemarrow-derived dendritic cells,BMDC)Card4/NOD1及其下游NF-κB信号通路相关分子mRNA的表达,RT-PCR检测BMDC的NOD1、NOD2和IFN-γmRNA表达,ELISA测定BMDC培养上清液内IFN-γ含量。结果经E.coli LLO/OVA刺激后4h至8h,BMDC出现Card4/NOD1基因表达上调,其下游信号途径相关分子基因Rip2、Ikkα、Ikkβ、Nfκb1、Nfκb2和IFN-γ均出现表达上调。RT-PCR结果显示该疫苗刺激后BMDC的NOD1与IFN-γ基因表达时段一致。经E.coliLLO/OVA刺激后24h,BMDC培养上清液内IFN-γ含量明显高于E.coli OVA刺激后的BMDC。结论重组疫苗E.coliLLO/OVA诱导小鼠骨髓树突状细胞NOD1受体信号途径活化并促进了IFN-γ表达。
- 徐曼王渝琦徐光绪蒋小卫戴明燊
- 关键词：骨髓树突状细胞
- 重组疫苗E.coli LLO／OVA经TLR4和NOD1受体诱导树突状细胞表达细胞因子被引量：4
- 2009年
- 目的:探讨树突状细胞(DC)的模式识别受体(PPRs)活化与细胞因子表达的关系。方法:采用基因芯片及RT-PCR检测经E.coliLLO/OVA刺激后小鼠骨髓树突状细胞(bone marrow-derived dendritic cell,BMDC)的PPRs及其下游NF-κB信号通路相关分子mRNA的表达水平,并观察BMDC的活化状况及培养上清液内细胞因子含量。结果:经E.coliLLO/OVA刺激后2h,BMDC出现短暂的TLR4mRNA表达上调,其下游信号途径相关的Myd88、Rip2、Irak1、Irak2、Ikkα、NF-κB1和NF-κB2mRNA均出现表达上调,黏附分子Icam1、细胞因子IL-1a、IL-1b、IL-6和TNF-α的mRNA也表达上调;经E.coliLLO/OVA刺激后4h,BMDC出现Card4(NOD1)mRNA表达上调,其下游信号途径相关的Rip2、Ikkβ、NF-κB1和NF-κB2mRNA均出现表达上调,IFN-γ、TNF-β和CD40mRNA也上调表达。经E.coliLLO/OVA刺激后24h,BMDC表达共刺激分子及MHC-II类分子上调;且培养上清液内IL-12和IFN-γ含量增高。结论:重组疫苗E.coliLLO/OVA经TLR4和NOD1受体激活NF-κB信号通路,诱导了小鼠BMDC成熟并表达一系列细胞因子尤其是IL-12和IFN-γ。
- 徐曼戴明桑米粲
- 关键词：骨髓树突状细胞模式识别受体
