国家自然科学基金(39870021)
- 作品数:10 被引量:42H指数:5
- 相关作者:张国成许东亮李飚曹玉红孙新更多>>
- 相关机构:第四军医大学西京医院四川大学济南陆军学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 人细小病毒B19-VP2-IgM的检测及其应用价值的研究被引量:4
- 2000年
- 目的 评估 EL ISA法检测抗人细小病毒 B19主要衣壳蛋白 Ig M(B19- VP2 - Ig M)诊断 B19病毒感染的价值 ;并初步了解 B19病毒感染临床表现多样性 .方法 对 5 5例小儿常见疾病包括急性再生障碍性贫血 (AA) 10例 .特发性血小板减少性紫癜 (ITP) 10例、急性淋巴细胞白血病 (AL L ) 15例、幼年类风湿关节炎 (JRA) 12例、过敏性紫癜 (SHP) 8例患者血清进行 B19- VP2 - Ig M检测 ;并对上述标本用巢式 PCR检测 B19- DNA作为对照研究 .结果 1EL ISA法检测 B19-VP2 - Ig M特异性高 ,稳定性好 . 2 B19- VP2 - Ig M总阳性率为10 / 5 5 (18.2 % ) ,其中 AA,ITP,AL L,JRA,SHP阳性率分别为 :2 / 10 (2 0 .0 % ) ,3/ 10 (30 .0 % ) ,2 / 15 (13.3% ) ,2 / 12(16 .7% ) ,1/ 8(12 .5 % ) . 3B19- DNA总阳性率为 17/ 5 5(30 .9% ) ,其中 AA,ITP,AL L ,JRA,SHP阳性率分别为 :3/ 10 (30 . 0 % ) ,4/ 10 (40 . 0 % ) ,4/ 15 (2 6 . 7% ) ,4/ 12(33.3% ) ,2 / 8(2 5 .0 % ) . 4B19- VP2 - Ig M阳性率略小于B19- DNA阳性率 ,但统计学检验无显著差异 (P >0 .0 5 ) .结论 1EL ISA法检测 B19- VP2 - Ig M简便快速 ,特异性高 ,适用于 B19病毒感染早期诊断 . 2 B19病毒感染临床表现多种多样 ,与小儿 AA,ITP,AL L,JRA,SHP关系密?
- 曹玉红许东亮张国成孙新李飚
- 关键词:ELISA聚合酶链反应人细小病毒B19免疫球蛋白
- 我国人细小病毒B19VP1和VP2部分基因序列测定及变异分析被引量:15
- 2002年
- 目的 探讨 B1 9病毒中国株的基因变异 .方法 采用长片段聚合酶链反应技术 ,从中国再障患儿血清中扩增HPVB1 9- XA2株的 VP1独特区基因和 VP1 /VP2基因片段 ,进行核苷酸序列分析 .结果 B1 9- XA2株的 VP1独特区和VP1 /VP2连接区基因大部分区域核苷酸序列被测定 ,其与国外 Au株基因核苷酸序列比较 ,有 4个核苷酸突变 ,并引起编码的 2个氨基酸改变 .结论 我国 B1 9病毒 VP1基因独特区和 VP1 /VP2连接区基因序列与
- 张国成孙新许东亮采华李飚陈星琪
- 关键词:细小病毒B19基因变异
- 我国再障患儿血清中人细小病毒B19 NS基因序列测定及变异分析(英文)被引量:5
- 2003年
- 目的 探讨B19病毒中国株NS基因的变异。方法 采用聚合酶链反应(PCR)技术,从中国再障患儿血清中扩增人细小病毒B19-XA17,XA18,XA20株的NS基因片段,进行核苷酸序列分析。结果 人细小病毒B19-XA17、XA18、XA20株的NS基因核苷酸序列被测定,测序结果与国外Au株基因核昔的序列比较,有4个核苷酸突变,并引起编码的4个氨基酸发生改变。结论 我国B19病毒NS基因序列与Au株相比有变异。
- 张国成苏国平孙新许东亮陈彩平汤雪晴Biao LI
- 关键词:人细小病毒B19基因再生障碍性贫血
- 人细小病毒B_(19)感染相关过敏性紫癜患儿的临床特征及治疗被引量:4
- 2006年
- 目的探讨人细小病毒B19(简称B19)感染相关过敏性紫癜患儿临床特征及治疗方法。方法采用巢式PCR和ELISA法对75例过敏性紫癜患儿进行B19-DNA及IgM检测;对B19-IgM阳性患儿进行临床特征分析,比较激素和丙种球蛋白的治疗效果。结果1.病例组75例中B19-DNA阳性26例(34.67%),B19-IgM阳性21例(28.0%);健康对照组32例中B19-DNA、B19-IgM阳性各1例(3.13%),两组B19-DNA和B19-IgM阳性率差异均有显著性(P均<0.01)。2.过敏性紫癜患儿临床各型间B19-DNA及B19-IgM阳性率均无显著差异(P均>0.05),B19-IgM阳性患儿中混合型所占比例最大,皮肤型次之。3.激素组和丙种球蛋白组治疗关节肿痛、胃肠道症状、肾损害方面差异均无显著性,但在皮疹消退方面,后者疗效优于前者。4.激素组B19-DNA清除率25.0%,丙种球蛋白组B19-DNA清除率为81.82%,两组清除率具有显著差异(P<0.05)。结论B19可能是导致过敏性紫癜的主要病原体之一;B19感染相关过敏性紫癜患儿临床表现具有多样性;对过敏性紫癜患儿应进行B19病毒检测;应用丙种球蛋白治疗B19感染相关过敏性紫癜可取得良好疗效。
- 曹玉红张光运张国成杨欣伟丁翠玲
- 关键词:细小病毒B19紫癜过敏性丙种球蛋白类
- 人细小病毒B19中国株结构蛋白VP1的克隆及表达被引量:3
- 2004年
- 目的 :构建人细小病毒B1 9中国株结构蛋白VP1基因片段的重组表达载体 ,探索大量表达VP1蛋白的最佳条件。 方法 :从该科保存的人细小病毒B1 9中国株结构蛋白VP1基因片段的重组克隆载体中获得VP1基因片段 ,将该片段亚克隆入表达载体pQE 30 ,构建VP1 pQE 30原核表达载体 ,并转化至感受态大肠杆菌M1 5中 ,给予不同浓度诱导剂异丙基硫代 β D 半乳糖苷 (IPTG)及在不同温度下进行诱导表达。 结果 :成功构建了融合蛋白VP1 pQE 30的重组表达质粒 ,表达的融合蛋白经 1 5 %SDS PAGE电泳证实其相对分子质量为 2 2 0 0 0。IPTG浓度为 1mmol/L ,诱导表达 5h ,37℃下无表达 ,2 5℃下有表达 ;采用不同的IPTG浓度诱导表达 5h ,0 .0 5mmol/L至 1mmol/L均有表达 ,表达率相近 ,为 (1 6± 1 ) %。 结论 :获得人细小病毒B1 9中国株结构蛋白VP1基因片段的原核表达载体及其产物 。
- 陈彩平张国成许东亮汪萍李茹英黄莹盛凯李飚
- 关键词:人细小病毒B19
- 人细小病毒B19中国株VP1蛋白独特区基因片段序列变异分析被引量:6
- 2002年
- 目的 研究 B1 9病毒中国株独特区 VP1的基因变异 .方法 采用聚合酶链反应技术 (PCR)从两例中国再生障碍性贫血患儿血清中扩增 VP1独特区基因片段 ,将其与PUC1 9连接 ,酶切鉴定筛选阳性克隆后测序分析 .结果 从一个患儿的血清中扩增出约 480 bp目的片段 ,并成功构建PUC1 9- VP1质粒 ,测序结果显示 ,与国外已发表的 Wi株VP1独特区序列相比 ,有 2处核苷酸发生改变 ,并可致所编码的氨基酸变化 .结论 中国 B1 9病毒
- 采华张国成许东亮李飚
- 关键词:细小病毒B19分子克隆
- 先天性心脏病心肌组织中HPVB19,RV基因的检测被引量:5
- 2001年
- 目的 探讨 HPVB19和 RV等病原感染与先心病的发病关系 .方法 采用 PCR,RT- PCR及 ISH等分子生物技术 ,对 79例先心病和 46例非先心病的先心病心肌组织中HSVB19,RV,TOX等病原基因进行检测及 B19病毒在心肌细胞内定位研究 .结果 1在先心病心肌组织中 B19,TOX,RV,HSV病原基因的检测阳性率分别为 18% (12 / 6 6 ) ,13%(10 / 79) ,2 3% (7/ 30 )和 4% (3/ 79) ,前三者与对照组间比较有显著性差异 (P<0 .0 5 ) ,而 HSV在两组间无统计学意义 (P>0 .0 5 ) ,提示 B19,TOX,RV为先心病发病的重要危险因子 .2对活检心肌组检测上述病原基因的阳性病例 ,同时作血清中 B19,TOX,RV的特异性 Ig M检测均阴性 . 3通过原位杂交显示 B19病毒 DNA主要分布在心肌细胞核内 ,光学显微镜下心肌细胞无炎性浸润 .结论 先心病心肌组织中可检测到 HPVB19,TOX,RV基因 ,并有较高的阳性率 。
- 张国成王晓明许东亮孙新李飚
- 关键词:先天性心脏病心脏组织人细小病毒B19风疹病毒
- 儿童细小病毒B19感染的诊断方法被引量:2
- 2003年
- 目的 :评价巢式PCR ,ELISA ,间接免疫荧光法 (IIF)诊断B19感染的价值 .方法 :用ELISA及巢式PCR对 12 9例小儿血液病和结缔组织病患者血清进行B19 IgM ,DNA检测 ;用IIF及巢式PCR对 5 0例血液病患者骨髓进行B19抗原及DNA检测 .结果 :病例组 12 9例 ,血清B19 DNA阳性 4 1例 ,阳性率31.8% ;IgM阳性 2 8例 ,阳性率 2 1.7% ;B19 DNA及IgM同时阳性 2 6例 ,仅IgM阳性 2例 ,B19感染率为 33.3% .对照组 5 0例 ,B19 DNA阳性率 2 % ,IgM阳性率 0 % ,B19感染率为 2 % .血液病患者 5 0例骨髓B19 DNA阳性 17例 ,阳性率 34% ;抗原阳性 8例 ,阳性率 16 % .与巢式PCR相比 ,ELISA法的灵敏度为 6 3.4 % ,特异度为 97.7% ,符合率为 86 .8% ,阳性预告值为(+PV)为 92 .8% ,阴性预告值 (-PV)为 85 .1% ;IIF法的灵敏度为 4 7.0 % ,特异度为 10 0 % ,符合率为 82 .0 % ,+PV为10 0 % ,-PV为 78.6 % .结论 :ELISA及IIF敏感性低于巢式PCR ,诊断B19感染时最好同时检测B19
- 曹玉红张光运张国成李如英曹艳华
- 关键词:人细小病毒B19聚合酶链反应酶联免疫吸附测定免疫荧光技术
- 小儿B19病毒感染相关性重症血液病51例被引量:9
- 2005年
- 目的探讨B19病毒感染相关性小儿重症血液病的临床特征与治疗。方法回顾性总结51例小儿B19病毒感染相关性重症血液病的临床资料 ,分析其治疗与预后。结果检测B19抗原或抗体阳性加B19DNA阳性 ,确定为B19病毒感染的重症血液病患儿51例中 ,急性血小板减少性紫癜32例 ,急性再生障碍性贫血9例 (包括纯红细胞再生障碍性贫血3例 ) ,急性白血病合并重度贫血6例 ,溶血性贫血并发急性再障危象3例 ,噬血细胞综合征1例 ;所有患儿均重度或极重度血细胞减少 ,38例合并内脏出血 ,12例合并细菌或真菌感染。经应用大剂量丙种球蛋白 ,同时加强对症治疗与支持疗法、防治严重并发症 ,结果好转和治愈48例 (94.12 % ) ,死亡3例 (5.88 % )。结论B19病毒感染相关性小儿重症血液病应加强抗病毒及止血的治疗。
- 张国成曹玉红廖清奎李如英陈彩平许东亮钱新宏李飚
- 关键词:人细小病毒B19
- 结缔组织病患儿B19病毒感染的意义被引量:3
- 2003年
- 目的 :研究我国小儿常见结缔组织病患者B19病毒感染的状况及其临床意义 .方法 :用巢式PCR法对 95例小儿常见结缔组织病患者进行B19 DNA检测 ,对其中 5 0例患者同时进行B19主要衣壳蛋白抗体IgM (B19 VP2 IgM )检测 .结果 :病例组 95例 ,B19 DNA阳性 34例 (36 % ) ,健康对照组 5 0例 ,B19 DNA阳性 2例 (4% ) ;病例组B19 DNA阳性率与对照组相比有显著差异 (P <0 .0 1) .病例组B19 VP2 IgM检测 5 0例 ,阳性 11例 (2 2 % ) ,健康对照组B19 VP2 IgM均为阴性 ;B19 VP2 IgM阳性率与对照组相比有显著差异(P <0 .0 1) .5种疾病间B19 DNA及B19 VP2 IgM阳性率无显著差异 (P >0 .0 5 ) .5 0例患者B19 DNA ,B19 VP2 IgM同时检测结果 :10例B19 DNA ,B19 VP2 IgM均阳性 ,1例仅B19 VP2 IgM阳性 ,7例仅B19 DNA阳性 .病例组B19阳性率为 37% (35 / 95 ) .结论 :我国结缔组织疾病患儿有较高的B19感染率 .B19与小儿结缔组织病密切相关 ,可能是导致这些疾病的主要病原体之一 .
- 曹玉红张国成钱新宏成胜权许东亮汪萍
- 关键词:人细小病毒B19结缔组织病聚合酶链反应酶联免疫吸附测定儿童