江苏省教育厅自然科学基金(07KJD320222)
- 作品数：3 被引量：17H指数：1
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- 脂质体转染Akt基因对心肌细胞缺血-再灌注的影响
- 2009年
- 目的研究转染脂质体介导的Akt基因对心肌细胞缺血-再灌注的影响。方法采用新生SD大鼠进行心肌细胞培养,建立模拟缺血/再灌注模型,将脂质体介导的人Akt基因转染心肌细胞。实验分5组:对照组(control组)、缺血/再灌注组(I-R组)、转染Akt基因组(Akt组)、转染阳离子脂质体空载体组(Vehicle control组)和Akt抑制剂组(Akt blockade组)。各组进行缺血-再灌注后以MTS比色法检测细胞活性,测定乳酸脱氢酶(LDH)活性、丙二醛(MDA)含量。结果Akt组较I/R组、Vehicle control组和Akt blockade组LDH、MDA明显降低,细胞活性高(P<0.05)。结论脂质体介导的Akt基因转染心肌细胞可保护心肌、减轻心肌细胞缺血-再灌注损伤。
- 张琳李东野夏勇张卓琦潘德峰朱红杨煜
- 关键词：AKT脂质体心肌细胞缺血-再灌注
- 新生大鼠心肌细胞原代培养方法的改良被引量：16
- 2008年
- 目的探讨更为简单、有效的新生大鼠心肌细胞分离、培养方法。方法取出生24 h内大鼠左心室,剪碎,0.125%胰蛋白酶、0.08%胶原酶Ⅰ分离,离心收集心肌细胞,差速贴壁法和化学试剂抑制非心肌细胞生长,纯化后培养于DMEM培养基。免疫荧光鉴定纯度,0.4%台盼蓝染色检查心肌细胞成活率。结果心肌细胞纯度为95%,平均成活率96%,并出现同簇细胞的同步跳动。结论本研究应用改良的新生大鼠心肌细胞培养方法,心肌细胞存活率高,纯度高,且操作简便,重复性好,是一种较为理想的心肌细胞原代培养方法,可满足实验要求。
- 张琳李东野王志荣夏勇朱红潘德峰张卓琦杨煜
- 关键词：心肌细胞原代培养
- 阳离子脂质体转染Akt基因对缺血性心脏病细胞凋亡的影响被引量：1
- 2009年
- 目的研究转染基因Akt对心肌细胞凋亡的影响。方法培养新生SD大鼠心肌细胞;提取人Akt质粒,用脂质体将其转染心肌细胞。实验分5组:空白对照(A)组、缺血-再灌注损伤对照(B)组、Akt基因(C)组、阳离子脂质体空载体(D)组和Akt抑制剂(E)组;各组进行模拟缺血-再灌注后测定乳酸脱氢酶(LDH)含量、细胞活性、细胞凋亡率及Akt、Bcl-2、NF-κB p65蛋白表达。结果C组LDH含量较B组、D组和E组明显减少(P<0.05),细胞活性高(P<0.05),细胞凋亡率低(P<0.05),Akt、Bcl-2与NF-κB p65蛋白表达增加(P<0.05)。结论细胞凋亡参与了心肌缺血-再灌注损伤过程,转染Akt基因可减少缺血-再灌注损伤心肌细胞凋亡率。
- 张琳李东野夏勇张卓琦潘德峰朱红杨煜
- 关键词：AKT基因心肌细胞细胞凋亡缺血-再灌注损伤
