国家自然科学基金(31270963)
- 作品数：14 被引量：44H指数：5
- 相关作者：张冬青陈呢喃赵蓉钱柳周晓薇更多>>
- 相关机构：上海交通大学上海交通大学医学院附属瑞金医院上海市徐汇区中心医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 抗人IL-6Rβ(gp130)单克隆抗体对IL-6信号分子调控浅析被引量：4
- 2014年
- 目的:分析鼠抗人IL-6Rβ(gp130)单克隆抗体[anti-IL-6Rβ(gp130)mAb]的生物学特性及对IL-6信号分子的调节作用。方法:利用Western blot、竞争性ELISA实验、功能表位结合实验,检测anti-IL-6Rβ(gp130)mAb的亲和力、效价及与gp130抗原表位结合特异性。进而探讨anti-IL-6Rβ(gp130)mAb对U266细胞、RA患者外周血单个核细胞(PBMC)及滑膜液单个核细胞(SFMC)增殖和分化中的IL-6信号分子的调控机制。结果:Anti-IL-6Rβ(gp130)mAb对gp130具有高亲和性(如10A1细胞株的亲和力常数可达为2.62E-10),所获得的多株单抗还具有针对不同抗原结合表位的特性,可用于分析和研究IL-6信号通路及下游STAT3的磷酸化。结论:获得针对不同抗原结合表位的anti-IL-6Rβ(gp130)mAb,初步的实验结果表明此类单抗不仅具有调控IL-6信号分子和下游STAT3磷酸化的生物学功能,并为解析临床RA的发病与IL-6信号分子的关联性提供了初步的实验结果。
- 周晓薇苗平陈呢喃赵蓉钱柳余奇文张继英许荣何东仪何东仪陆梅生张冬青
- 关键词：IL-6GP130STAT3RA
- 抗胶原Ⅱ功能域抗体诱导的RA样小鼠模型的建立及其免疫病理学指标分析被引量：5
- 2013年
- 应用IFN-β药物干预由抗胶原Ⅱ功能域抗体诱导建立的类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)样小模型(CAIA),揭示RA发病可能的新靶点以及为将IFN-β药物用于RA患者以调节其免疫功能紊乱和骨代谢失衡提供新的理论和实验依据。本研究采用不同浓度的抗胶原Ⅱ功能域抗体诱导BAIB/c小鼠,建立RA样动物模型,通过观察其外观、关节评分以及番红固绿和HE染色并与正常对照组比较来评估该模型的成功建立:采用RT-PCR和免疫组化等技术检测各组模型小鼠与免疫功能紊乱和骨质破坏密切相关的MMP-3、MMP-3/TIMP-1、RANKL及c-Fos分子的表达水平。研究发现CAIA组模型小鼠上述各炎症分子的表达均显著高于对照组小鼠,同时利用重组鼠源性IFN-β调控该模型,发现其能缓解CAIA小鼠的发病情况,证明IFN-β具有使RA样小鼠免疫功能重建以及阻抑模型小鼠骨破坏的生物学作用,为进一步深入研究其调控机制和尽快将IFN-β用于临床RA的治疗奠定了实验基础。
- 赵蓉许荣周晓薇苗平钱柳余奇文张继英陈雪华张冬青
- Vγ9Vδ2T细胞亚群的建立与功能分析被引量：2
- 2013年
- 目的:建立γδT细胞的一个亚群(Vγ9Vδ2 T细胞亚群),分析其免疫学相关功能。方法:对健康人外周血单个核细胞进行磁珠分选,获得富含γδT细胞的细胞群,用异戊烯焦磷酸(isopentenyl pyrophosphate,IPP)、白细胞介素2(IL-2)刺激γδT细胞增殖。通过流式细胞仪检测分析Vγ9Vδ2 T细胞(γδT细胞主要亚群)在IPP刺激后的分化趋势及表面标志,分离出效应型Vγ9Vδ2 T细胞,对其抗原递呈功能进行研究,并分析不同表型的Vγ9Vδ2 T细胞的分泌格局。结果:Vγ9Vδ2 T细胞在IPP作用下可被激活,不断增殖并分化为效应记忆型(TEM、CD45RA-CD27-γδT),该细胞群高表达HLA-DR和CD80/86等分子,呈现出专职性抗原递呈细胞的表型特征;此群效应记忆型Vγ9Vδ2 T细胞能有效递呈PPD、TT等可溶性抗原给CD4+T细胞,具有与B细胞相当的抗原递呈功能。实验还发现,不同表型的Vγ9Vδ2 T细胞具有不同的细胞因子分泌格局,新鲜分离的健康人外周血Vγ9Vδ2 T细胞(非效应型)以分泌IFN-γ为主,而效应记忆型Vγ9Vδ2 T细胞在产生IFN-γ的同时能分泌IL-17。结论:Vγ9Vδ2 T细胞亚群能在IPP的作用下激活、增殖,并分化为具有抗原递呈细胞功能的效应记忆型细胞,其分泌IFN-γ的同时可分泌IL-17。
- 邱潮林周晓薇胡朝英谢秋华胡锦辉赵蓉钱柳张冬青
- 关键词：T细胞
- 医用小型猪骨加工工艺与免疫原性的检测与分析
- 2013年
- 目的制备医用小型猪骨的浸出性异种蛋白,检测和分析其皮质和松质混合骨(以下简称混合骨)与单纯皮质骨(以下简称皮质骨)浸出性异种蛋白刺激和诱导人淋巴细胞增殖的应答反应。方法应用化学和物理学方法制备获得医用小型猪混合骨与皮质骨粉,以定量RPMI-1640搅拌和浸泡4℃72h后高速离心获取上清液且进行蛋白定量检测;随即应用CCK-8方法检测和分析混合骨与皮质骨浸出性异种蛋白刺激和诱导人外周血淋巴细胞增殖的差异性;以及人外周血淋巴细胞增殖培养上清中四种细胞因子表达的异同。结果 CCK-8实验结果表明:CCK-8实验未见混合骨与皮质骨浸出性异种蛋白具有刺激和诱导人淋巴细胞增殖的应答反应的统计学差异;而应用ELISA酶联免疫吸附实验对人淋巴细胞培养上清中IFN-r、IL-1、IL-10和TNF-a的检测结果提示:与对照组相比,经工艺处理后小型猪骨组的四种炎症相关因子均较处理前组具有统计学的显著性差异(P<0.05),而皮质骨组较混合骨组其炎症相关因子的表达同样具有统计学差异。结论本实验结果提示,应用已建立的小型猪骨加工工艺可有效处理和抑制异种蛋白对人淋巴细胞增殖的刺激和诱导作用,表明小型猪混合骨与皮质骨其异种蛋白的抗原性存在一定的差异;本小型猪骨加工工艺和免疫原性的检测和分析系统的建立为医用性异种骨的使用提供了理论与实验数据的参考。
- 周小垚顾翔风柳伯安孔繁平赵蓉张继英余奇文张冬青
- 关键词：小型猪异种蛋白抗原CCK-8酶联免疫吸附
- 视黄醇结合蛋白4检测在营养性疾病及肝肾损害检测中的临床应用被引量：6
- 2015年
- 视黄醇结合蛋白（retinol binding protein，RBP）是一种分泌型视黄醇结合蛋白，主要合成于肝脏，广泛分布于人体血液、尿液等体液中的视黄醇（VitA）运载蛋白，在协助 VitA发挥生理功能中起到关键作用。最新研究表明：RBP4是一种新的脂肪细胞因子，参与胰岛素抵抗和2型糖尿病的发生，与糖尿病肾病、营养性疾病等的发展存在着一定的相关性。这一发现使得 RBP4更加受到人们的重视。该文就 RBP4的生理功能，在肝肾疾病、糖尿病等各类疾病方面的应用以及新型临床检测方法作一综述。
- 孟俊顾志冬陈呢喃张冬青
- 关键词：视黄醇结合蛋白4营养性疾病肝肾损害
- 多发性硬化症与EB病毒及白细胞介素17/白细胞介素23关联性分析被引量：4
- 2017年
- 目的:探讨抗EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)抗体在多发性硬化症(multiple sclerosis,MS)患者脑脊液中的表达情况,以及细胞因子白细胞介素(interleukin,IL)-17、IL-23与其发病间的关联性,借以对MS发病机制进行研究,并为临床诊治和实验室检验提供进一步参考。方法:选取29例中枢神经免疫疾病患者(研究组,包括MS、视神经脊髓炎等)和43例同期非中枢神经免疫疾病患者(对照组,包括周围神经病、偏头痛等),采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)分别检测2组患者脑脊液中EBV-壳抗原(VCA)Ig M、EBV-核抗原(EBNA)-1 Ig G、IL-17、IL-23的表达水平。结果 :中枢神经免疫疾病患者(研究组)患者脑脊液中EBV-EBNA-1 Ig G、EBV-VCA Ig M和IL-23的表达水平显著高于非中枢神经免疫疾病患者(对照组)(P<0.01)。研究组中MS患者脑脊液(cerebrospinal fluid,CSF)IL-23表达水平较对照组显著增高(P<0.01),同时MS亚组患者CSF的IL-17表达水平较对照组显著增高(P<0.05)。结论:抗EBV抗体的表达预示着MS患者的发病可能与EBV感染相关,可能是MS的发病机制之一。同时,IL-17/IL-23轴的异常也可能与MS发病间存在一定的关联。MS的发病不仅与EB病毒感染有关,且与患者的免疫紊乱密切相关。
- 孟俊彭奕冰王学锋陈呢喃张冬青
- 关键词：多发性硬化EB病毒抗体白细胞介素
- 干扰素-β/抗白细胞介素-6受体单抗干预类风湿关节炎机制的新认识被引量：2
- 2015年
- 类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）是一种以慢性滑膜炎症、进行性骨质破坏和关节功能丧失为特征的自身免疫性疾病,主要表现为进行性侵蚀性关节炎及晨僵,部分患者可出现发热、贫血、皮下结节及淋巴结肿大等关节外表现。在我国乃至亚洲,RA的发病率约为1.0%,致残率则高达15%。关于RA的发病机制尚正在不断研究和揭示中,而其与遗传、内分泌、环境、细胞凋亡及感染等众多因素密切相关。
- 张冬青
- 关键词：类风湿关节炎干扰素-Β免疫干预
- 干扰素β通过RANK/RANKL信号分子调控胶原抗体诱导关节炎小鼠的分子学机制被引量：1
- 2014年
- 目的:研究干扰素β(interferonβ,IFN-β)在抗胶原Ⅱ功能域抗体诱导的小鼠类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)样模型中的调控作用,探讨RA潜在的干预新靶点。方法:应用抗胶原Ⅱ功能域抗体诱导建立胶原抗体诱导关节炎(collagen antibody induced arthritis,CAIA)小鼠模型,通过其表型、关节评分、免疫组织化学染色、X射线衍射分析是否建模成功,并用IFN-β基因工程药物干预,RANK体外诱导破骨细胞生成,抗酒石酸酸性磷酸酶染色法检测破骨细胞数量,实时荧光定量聚合酶链反应检测RANK/RANKL关键分子变化。结果:CAIA小鼠建模成功,IFN-β能显著缓解CAIA小鼠的病情,实时荧光定量聚合酶链反应显示IFN-β干预后小鼠骨关节中c-FOS、NFATc-1的表达量下降,IFN-β能抑制破骨细胞生成。结论:IFN-β缓解CAIA小鼠模型发病的可能机制是通过RANK/RANKL-IFN-β-NFATc-1下调破骨细胞的生成。
- 陈呢喃赵蓉周晓薇苗平许荣张冬青
- 关键词：干扰素Β
- 脑脊液寡克隆区带检测联合IgG指数在中枢神经系统疾病诊断中的意义被引量：6
- 2015年
- 目的:探讨脑脊液寡克隆区带(oligoclonalbands,OCB)检测联合IgG指数对中枢神经系统疾病的临床诊断意义。方法:选取38例中枢神经系统炎性疾病患者和43例同期非中枢神经系统疾病患者(对照组),取其脑脊液和血清标本,应用等电聚焦电泳检测OCB,免疫散射比浊法计算IgG指数,并进行比较分析。结果:中枢神经系统炎性疾病组中,多发性硬化、吉兰巴雷综合征、视神经脊髓炎、急性脊髓炎、病毒性脑炎及其他中枢神经系统炎性疾病患者的脑脊液OCB阳性分别为11例(11/13)、2例(2/9)、1例(1/3)、2例(2/5)、0例(0/5)及3例(3/3),而对照组的脑脊液OCB均为阴性。中枢神经系统炎性疾病各亚组的IgG指数均有高于对照组的趋势,但仅多发性硬化组(1.34±1.65)与对照组(0.54±0.36)间的差异有统计学意义(P<0.05)。结论 :检测患者脑脊液OCB并计算IgG指数,可用于了解其内源性免疫球蛋白IgG的合成情况,对中枢神经系统疾病的诊断具有一定的辅助价值。
- 孟俊朱巍巍彭奕冰王学锋陈呢喃张冬青
- 关键词：脑脊液寡克隆区带IGG指数中枢神经系统等电聚焦电泳
- Vγ9Vδ2T细胞亚群与类风湿关节炎发病关联性分析被引量：1
- 2014年
- 目的分析RA患者外周血和关节滑膜液中γδT细胞亚群及其与RA发病的关联性。方法采用流式细胞仪检测健康人外周血、RA患者外周血PBMCs及滑膜液单个核细胞（SFMCs）中Vγ9Vδ2T细胞亚群；ELISA法检测在OA患者滑膜液、RA患者血清和滑膜液、RA患者PBMCs和SFMCs培养上清中IFN-γ／和IL-17的表达水平；氚-胸腺嘧啶核苷（3H—TdR）掺入法检测PBMCs和SFMCs对抗原肽的应答能力，以及18T细胞的抗原递呈能力。采用t检验、单因素方差分析进行统计学分析。结果RA患者外周血中效应记忆型Vγ9Vδ2T细胞占叫8T细胞的（48．2±17．6）％，并有（42．8±17．7）％和（2．2±1．5）％的v19v82T细胞表面分别表达HLA—DR4和CD86分子；关节滑液中效应记忆型Vγ9Vδ2T细胞占18T细胞的（62．9±7．9）％，并有（85．8±1．7）％和（17．3±2．0）％的Vγ9Vδ2T细胞表面分别表达HIJA—DR4和CD86分子。RA患者的PBMCs和SFMCs具有分泌IFN-γ和IL-17炎症因子的特征，且较健康人PBMCs相比，对抗原肽具有更强的免疫反应。同时实验结果还表明RA患者的叮γδT细胞的抗原递呈能力较B细胞强。结论γδT细胞在RA的发病过程中不仅通过分泌细胞因子与炎症细胞协同作用参与炎症反应，而且通过特异性免疫应答的机制发挥树突状细胞样的作用，不断将病毒肽和自身抗原肽递呈给CD4＋T细胞。
- 许荣赵蓉钱柳胡朝英苗平余奇文李云春何东仪张冬青
- 关键词：类风湿抗原呈递ΓΔT细胞
