国家自然科学基金(30500658) 作品数:9 被引量:58 H指数:6 相关作者: 杨玲 侯晓华 钱伟 朱锐 但丹 更多>> 相关机构: 华中科技大学 湖北省中医院 武汉市第一医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 中国博士后科学基金 湖北省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
ANGⅡ-AT_1 Receptor Pathway Is Involved in the Anti-fibrotic Effect of β-elemene 被引量:1 2009年 To investigate the effects of β-elemene on the ANG Ⅱ-ATI receptor pathway in rats with liver fibrosis, a model of hepatic fibrosis was induced by hypodermical injection of carbon tetrachloride (CC14) into Wistar male rats. D-elemene was intraperitonealy administered into the rats for 8 weeks (0.1 mL/100 g body weight per day). Masson staining was used to observe the liver fibrosis of rats and liver functions were measured by enzymatic kinetic analysis. The content of hydroxyproline in liver tissues was detected by specimen alkaline hydrolysis. The level of plasma ANG Ⅱ in blood plasma was detected by radioimmunoassay. The expression of AT1R in rat liver were measured using reverse transcriptional-polymerase chain reaction and immunohistochemistry respectively. The results showed that β-elemene could reduce the collagen disposition in liver and inhibit the progression of liver fibrosis. In addition, the levels of plasma ANG Ⅱ and the expression of hepatic AT1R in rats with liver fibrosis were also suppressed by β-elemene. It is concluded that the ANG Ⅱ-AT1 receptor pathway plays an important role in the development of hepatic fibrosis and D-elemene could down-regulate the levels of plasma ANG Ⅱ and the expression of hepatic ATIR in rats with liver fibrosis. 朱锐 杨玲 沈霖 叶进 刘建国 胡胜军关键词:Β-ELEMENE β榄香烯对肝星状细胞分泌ANGⅡ及表达AT_1R mRNA的影响 被引量:6 2008年 目的为肝纤维化的治疗提供新思路。方法将肝星状细胞(HSC)-T6细胞株培养24 h,分别以质量浓度为10.0、5.0、2.5 mg/L的β榄香烯(实验1、2、3组)作用4、12、24 h,收集细胞上清及细胞,并设空白对照组。放射免疫法检测培养上清中血管紧张素Ⅱ(ANGⅡ)水平,RT-PCR检测ANGⅡ的Ⅰ型受体(AT1R)mRNA表达。结果作用12、24 h时各实验组ANGⅡ水平及均较空白对照组降低(P<0.05、0.01);三个时间点各实验组AT1R mRNA表达均显著低于空白对照组(P<0.01),并呈剂量依赖性。结论β榄香烯可能延缓肝纤维化的发生、发展。 朱锐 沈霖 杨玲 但丹 刘建国关键词:肝纤维化 Β榄香烯 肝星状细胞 肝星状细胞表型转化过程中的影响因素及信号机制 2006年 杨玲 侯晓华关键词:细胞表型转化 肝星状细胞 信号机制 CELLS 疾病状态 甘油三酯 β-榄香烯抑制肝星状细胞表达ANGⅡ及RhoA/ROCK信号 被引量:14 2009年 目的:探讨β榄香烯对肝星状细胞表达分泌血管紧张素II、血管紧张素原及Rho/ROCK的影响.方法:HSC-T6细胞株培养24h,以不同浓度β榄香烯及空白对照分别作用4,12,24h后,放射免疫法检测培养上清中ANGⅡ的量,RT-PCR检测HSC中AGT及Rho/ROCK mRNA的表达。结果:在4h时,10.0mg·L-1β-榄香烯组培养上清中ANGII的分泌量为(50.970±8.081)pmol·L-1,较空白组(74.500±10.999)pmol·L-1明显下降(P<0.05),而5.0,2.5mg·L-1β-榄香烯组对ANGII分泌无明显抑制作用。12h时,10,5mg·L-1β-榄香烯组ANGⅡ分泌量分别为(83.727±6.850),(91.090±3.226)pmol·L-1,显著低于空白对照组(104.367±5.030)pmol·L-1,(P<0.01,P<0.05);而2.5mg·L-1β-榄香烯组作用不明显。24h时,5,2.5mg·L-1β榄香烯组ANGⅡ分泌量分别为(104.133±3.296),(100.957±2.581)pmol·L-1,与空白组(116.620±7.110)pmol·L-1比较明显减少(P<0.05,P<0.01);而10mg·L-1β-榄香烯组作用不明显。与空白组比较,4,12,24h各时间点,各个浓度的β榄香烯对HSC表达AGTmRNA均有抑制作用,F分别为30.33,28.04,107.19,P均为0。4,12,24h各时间点,2.5,5.0,10mg·L-1β榄香烯对HSC表达RhoA mRNA均有抑制作用,F分别为19.87,14.35,40.13,均P=0,无明显剂量依赖性;4,24h时间点,2.5,5.0,10mg·L-1β榄香烯对HSC表达ROCK-1,ROCK-2 mRNA均有抑制作用(P<0.01),而12h时各组之间无显著差异。结论:β榄香烯能使HSC分泌ANGⅡ及HSC内AGT mRNA表达降低,同时抑制下游信号RhoA,ROCK-1,ROCK-2 mRNA的表达,抑制ANGⅡ的生物学效应,从而延缓肝纤维化及门脉高压的发生。 杨玲 但丹 朱锐 周雯 钱伟 叶进 侯晓华关键词:肝纤维化 Β-榄香烯 肝星状细胞 β-榄香烯对血管紧张素Ⅱ诱导的HSC T6细胞增殖和迁移及RhoA的影响 2008年 目的探讨β-榄香烯对血管紧张素(ANG)Ⅱ诱导的肝星状细胞(HSC)增殖迁移及RhoA信号的影响。方法体外培养HSC,应用ANGⅡ诱导HSC增殖迁移,采用四甲基偶氮唑盐法测定细胞增殖,Transwell小室检测细胞迁移,RTPCR检测RhoAmRNA,Westernblot检测RhoA蛋白。结果1、2、4、8、10μmol/LANGⅡ组A490分别为0.129±0.004、0.143±0.016、0.166±0.012、0.183±0.004、0.283±0.014,与空白对照组(0.110±0.002)比较,ANGⅡ可显著促进HSC增殖,F=112.640,P〈0.01;10、8、4μmol/L的ANG11可显著诱导HSC迁移,细胞迁移数分别为每高倍视野(17.40±2.07)、(12.60±1.14)、(9.00±1.58)个,与空白对照组【(1.60±0.55)个】比较,F=117.496,P〈0.01。10、5、2.5mg/L的D榄香烯组4490分别为0.076±0.005、0.086±0.003、0.105±0.038,显著低丁4mol/LANGⅡ组,F=95.706,P〈0.01;10、5、2.5mg/L的β-榄香烯组细胞迁移数分别为每高倍视野(1.33±0.58)、(2.67±0.58)、(1.67±0.58)个,与4μmol/LANGⅡ组比较,F=55.600,P〈0.01,差异有统计学意义。4μmol/LANGⅡ组可显著诱导RhoA蛋白(相对表达量0.975±0.001)及mRNA(相对表达量0.951±0.045)表达,经10、5、2.5mg/L的β-榄香烯作用后RhoA蛋白相对表达量分别为0.077±0.032、0.538±0.026、0.701±0.078,RhoA mRNA相对表达量分别为0.734±0.038、0.845±0.036、0.881±0.027,较4μmol/LANGⅡ组始著下降,F值分别为217.119,18.010,P值均〈0.01。结论ANGⅡ可显著诱导HSC增殖、迁移,随剂量的增加诱导作用加强,β-榄香烯可有效抑制ANGⅡ诱导的HSC增殖迁移,并能抑制HSC表达RhoA。 杨玲 朱清静 周雯 叶进 钱伟 朱锐 胡泰洪 侯晓华关键词:肝星状细胞 迁移 细胞 Β-榄香烯 β-榄香烯对肝星状细胞增殖和细胞周期的影响 被引量:6 2009年 目的观察β-榄香烯对大鼠肝星状细胞(HSCs)增殖及细胞周期的影响。方法用不同浓度的β-榄香烯对HSCs进行处理,以四甲基偶氮唑蓝法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期,An-nexin-Ⅴ-碘化丙锭染色检测细胞凋亡,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测HSCs细胞周期蛋白D1(CyclinD1)mRNA、半胱天冬酶2(Caspase2)mRNA的表达。结果2.5、5.0、10.0μmol/L的β-榄香烯均能显著且剂量依赖性的下调CyclinD1mRNA的表达、上调Caspase2mRNA的表达、抑制HSCs的增殖、诱导HSCs凋亡,并可阻滞细胞周期进程,各组G0/G1期细胞百分比随药物浓度逐渐升高。结论β-榄香烯对大鼠HSCs增殖及细胞周期具有调控作用,其机制可能与影响CyclinD1mRNA和Caspase2mRNA的表达有关。 朱锐 杨玲 沈霖 刘建国 钱伟 侯晓华关键词:Β-榄香烯 肝星状细胞 细胞周期 CYCLIN D1 β-榄香烯对肝星状细胞凋亡相关蛋白Bcl-2家族的影响 被引量:8 2007年 [目的]研究β-榄香烯对肝星状细胞(HSC)凋亡及凋亡相关蛋白的影响。[方法]传代培养的大鼠HSC系HSC-T6与不同剂量β-榄香烯(终浓度为10、5、2.5 mg/L)共同培养48 h后,应用Annexin-V-碘化丙锭染色检测β-榄香烯对HSC凋亡的影响,免疫组化检测凋亡相关蛋白BcL-2/Bax。[结果]β-榄香烯可使HSC凋亡率明显增多,同时可使凋亡抑制分子Bcl-2表达下调,促凋亡分子Bax表达增强(P<0.01)。[结论]β-榄香烯可通过下调Bcl-2/Bax比率,促进HSC凋亡。 朱清静 熊振芳 杨玲关键词:Β-榄香烯 肝纤维化 肝星状细胞 凋亡 β-榄香烯对肝星状细胞周期及凋亡的影响 被引量:14 2006年 肝纤维化是肝脏细胞外基质(EcM)异常生成和积累的结果,肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)为肝纤维化形成的关键细胞。HSC在诸多因素(如细胞因子、生长因子、肝细胞、Kupffer细胞、内皮细胞等)的调控下,HSC持续激活导致胶原生成细胞增多,并最终引起ECM的大量沉积,同时在肝纤维化的逆转过程中,HSC的减少主要通过凋亡机制。因此HSC的激活增殖是各种原因引起肝纤维化形成的中心环节,阻抑激活的HSC增殖和诱导其凋亡是治疗慢性肝损伤和肝纤维化的重要策略。莪术为临床抗肝纤维化治疗的常用中药,不少研究显示该药具有抗肝纤维化、抑制ECM生成的作用。榄香烯为其有效成分,具有抗血栓形成、抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡的作用。榄香烯是否为莪术抗肝纤维化的有效成分尚少见报道,本实验采用传代的HSC系HSC-T6初步探讨β-榄香烯对HSC凋亡、增殖的影响。 杨玲 钱伟 侯晓华关键词:肝脏细胞外基质 Β-榄香烯 凋亡机制 抗肝纤维化治疗 HSC-T6 肝纤维化形成 软坚消痰活血化瘀法抗肝纤维化的作用机制概述 被引量:15 2005年 目的对软坚消痰、活血化瘀法抗肝纤维化的作用机制进行了概述。方法本文从三个方面进行了论述①软坚消痰、活血化瘀法的立法及抗纤软肝颗粒的组方意义;②抗纤软肝颗粒影响肝星状细胞增殖的作用机制;③软坚消痰、活血化瘀法抗胀纤维化的作用机制。结果肝纤维化的基本病机是血瘀痰结,治疗应软坚消痰、活血化瘀为大法。该法抗肝纤维的主要机制有①保护肝细胞;②抑制肝星状细胞增殖,促进肝星状细胞凋亡;③干扰肝星状细胞激活的细胞内信号传导。结论软坚消痰。 杨玲 朱清静 张赤志关键词:肝纤维化 活血化瘀 抗纤软肝颗粒