国家自然科学基金(81102514)
- 作品数：13 被引量：27H指数：3
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- 鞘内西地那非能减轻神经病理性疼痛大鼠的痛觉高敏被引量：1
- 2012年
- 目的观察鞘内注射西地那非对腰5(L5)脊神经切断大鼠痛觉高敏及对脊髓小胶质细胞活化、炎症细胞因子表达的影响。方法♂SD大鼠120只,随机分为5组(n=24),Ⅰ组:假手术组;Ⅱ组:L5脊神经切断模型鞘内注射生理盐水20μl;Ⅲ～Ⅴ组:L5脊神经切断模型分别鞘内注射3μg/20μl、10μg/20μl、30μg/20μl西地那非组。Ⅰ组仅暴露L5脊神经,Ⅱ～Ⅴ组均切断L5脊神经,术后d 7开始鞘内给药,Ⅰ、Ⅱ组注射20μl生理盐水,Ⅲ～Ⅴ组分别给予上述剂量西地那非,各组每天1次,连续5 d。测定各组大鼠术前1d,术后7、8、10、12 d机械痛阈(mechanical withdrawa1 thresh-old,MWT),术后8、10、12 d取L5脊髓,测定各组大鼠肿瘤坏死因子(tumor necrosis factorα,TNF-α)、白细胞介素1β(in-terleukin-1β,IL-1β)含量和小胶质细胞标记物白细胞分化抗原11b(cluster differentiation antigen 11b,CD11b)的mRNA表达水平。结果①术后7 d,与Ⅰ组相比,各组MWT明显下降(P<0.05),术后8、10、12 d与Ⅱ组相比,Ⅲ～Ⅴ剂量依赖地升高MWT(P<0.05)。②与Ⅰ组相比较,其余各组大鼠术后8、10、12 d TNF-α和IL-1β的水平及CD11b mRNA含量均明显上升(P<0.05),与Ⅱ组相比较,Ⅲ～Ⅴ于术后8、10、12 d明显剂量依赖地抑制了TNF-α和IL-1β及CD11b mR-NA的表达(P<0.05)。结论西地那非能剂量依赖性地缓解大鼠神经病理性痛觉过敏的发展,该效应可能与抑制脊髓小胶质细胞活性,减少TNF-α和IL-1β表达有关。
- 王洪超李伟伟李雪飞许倩刘清珍刘健李伟彦
- 关键词：西地那非磷酸二酯酶神经病理性疼痛小胶质细胞细胞因子
- 口服阿托伐他汀在腹式全子宫切除术术后镇痛的应用
- 2014年
- 目的探讨口服阿托伐他汀用于全子宫切除术术后镇痛的效果。方法择期行腹式全子宫切除术患者90例随机均分为阿托伐他汀组(A组)和对照组(C组)。A组术前12h口服阿托伐他汀80mg,麻醉前即刻、术后12h和24h分别口服阿托伐他汀20mg;对照组口服安慰剂。记录术后不同时间点安静状态和90度翻身活动时的VAS疼痛评分、镇痛泵有效按压次数及不良反应。计算术后曲马多累积使用量。分别于麻醉前即刻、术后24h测定血清超敏C反应蛋白(hsCRP)和IL-6水平。结果与C组相比,A组术后各时间点安静状态及90度翻身活动时的VAS评分、镇痛泵按压有效次数、曲马多累积使用量、术后恶心呕吐及出汗发生率均减少,术后24h时的hsCRP和IL-6水平均降低(P<0.05)。结论阿托伐他汀能增强曲马多术后静脉镇痛的效果,且不良反应发生率低;其镇痛作用可能与抑制炎症介质释放有关。
- 刘杨刘健谢军明金利嵇晴李伟彦
- 关键词：阿托伐他汀全子宫切除术术后镇痛
- 鞘内注射PDE4A、PDE4C亚型特异性siRNA对L5脊神经结扎大鼠神经病理性疼痛的影响被引量：1
- 2013年
- 目的观察鞘内分别注射针对磷酸二酯酶4A、4C亚型基因(phosphodiesterase 4A,PDE4A;phosphodiesterase 4C,PDE4C)的小干扰RNA(siRNA)对L5脊神经结扎(SNL)大鼠的痛觉高敏行为的影响。方法72只鞘内置管成功的成年雄性SD大鼠,随机均分为六组:假手术组(S组)、生理盐水组(NS组)、单纯载体组(Lipofectamin TM RNAiMAX,V组)、错配SiRNA组(M组)、PDE4A siRNA组(siR-A组)和DE4C siRNA组(siR-C组)。S组仅暴露L5脊神经,其余五组行SNL。S组、NS组分别在术后即刻、术后1、3、5、7d给予等量生理盐水10μl,其余四组分别给予Li-pofectamin TM RNAiMAX、错配SiRNA、PDE4A siRNA、PDE4C siRNA 2μg/10μl,并在术前1d、术后2、4、6、8d测定热缩足潜伏期(TWL)和机械缩足阈值(MWT),第8天行为学测定结束后处死大鼠,取腰段脊髓,采用western blot和ELISA法分别测定PDE4A、PDE4C的蛋白表达水平及肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β表达水平。结果与S组和siR-A组比较,其它四组大鼠PDE4A蛋白含量明显增加(P<0.05)。与S组和siR-C组比较,其它四组的PDE4C蛋白含量明显增加(P<0.05)。与S组比较,其它五组大鼠术后2、4、6、8dTWL明显减慢,MWT明显下降(P<0.05);术后第8天大鼠脊髓TNF-α和IL-1β含量明显升高(P<0.05)。结论鞘内分别注射PDE4A-siRNA、PDE4C-siRNA可明显抑制SNL大鼠腰脊髓段PDE4A、PDE4C蛋白的表达,但不能缓解大鼠机械和热痛觉高敏,抑制TNF-α、IL-1β的表达。
- 和晓韵底妍刘清珍刘健嵇晴李伟彦
- 关键词：磷酸二酯酶4
- 鞘内注射PDE4B-siRNA对L5脊神经结扎大鼠痛觉高敏的影响被引量：1
- 2013年
- 目的观察鞘内注射针对磷酸二酯酶4B(PDE4B)基因的小干扰RNA(siRNA)对L5脊神经结扎(SNL)大鼠的热痛觉及机械痛觉高敏的影响。方法雄性SD大鼠70只,随机均分为假手术组(Sham组)、生理盐水组(NS组)、单纯载体组(V组)、错配siRNA组(siRNA-M组)和PDE4B-siRNA组(siRNA-B组),分别于神经结扎术后即刻以及术后1、3、5、7d鞘内注射生理盐水、生理盐水、LipofectamineRNAiMAX、错配siRNA 2μg和PDE4B-siRNA 2μg,容量均为10μl。PDE4B-siRNA、错配siRNA与载体均在注射前30min混匀。于术前1d及术后2、4、6、8d分别测定五组大鼠的机械缩足阈值(MWT)和热缩足潜伏期(TWL);术后4、8d行为学测试结束后每组各处死6只大鼠,取腰段脊髓,采用实时定量PCR(real-time PCR,RT-PCR)和western bolt分别测定PDE4B的mRNA和蛋白表达。结果与术前1d比较,术后2、4、6、8dNS组、V组、siRNA-M组和siRNA-B组大鼠MWT明显缩短、TWL明显减小(P<0.05)。与NS组比较,术后2、4、6、8dsiRNA-B组大鼠MWT明显延长、TWL明显增加(P<0.05)。与Sham组比较,术后4、8dNS组、V组、siRNA-M组、siRNA-B组大鼠脊髓组织的PDE4B mRNA、PDE4B蛋白表达升高(P<0.05)。与NS组比较,术后4、8dB组大鼠脊髓PDE4B mRNA、PDE4B蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论鞘内注射PDE4B-siRNA可显著抑制L5SNL大鼠腰段脊髓PDE4B的mRNA和蛋白表达,有效缓解机械和热痛觉高敏。
- 底妍和晓韵嵇晴刘清珍刘健李伟彦
- 关键词：神经病理性疼痛脊神经结扎小干扰RNA
- 右美托咪定预防吗啡耐受及其对脊髓内胶质细胞和ERK的影响被引量：9
- 2014年
- 目的探讨右美托咪定对正常大鼠慢性吗啡耐受的影响及其相关的分子机制。方法6SD大鼠48只，体质量180～220g，随机分成6组（n=8）：I组为空白对照组，Ⅱ组为吗啡耐受组，Ⅲ组为50μg·kg^-1右美托咪定对照组，Ⅳ组为12．5μg·kg^-1右美托咪定处理组，V组为25μg·kg^-1右美托咪定处理组，Ⅵ组为50μg·kg^-1右美托咪定处理组。d1测定大鼠基础热缩足潜伏期（PWL），然后皮下注射吗啡10mg·kg^-1，计算30min时各组大鼠吗啡的MPE值。d2，I组注射生理盐水，Ⅱ组皮下注射吗啡10mg·kg^-1，每天2次；Ⅲ组早上皮下注射50μg·kg^-1右美托咪定，下午皮下注射等量的生理盐水；1V、V、VI组皮下注射吗啡10mg·kg^-1，每天2次，连续5d，每天上午皮下注射吗啡前30min，IV、V、Ⅵ组分别给予相应剂量的右美托咪定皮下注射。d7行为学检测后立即处死大鼠，留取腰5脊髓，分别采用免疫印迹法和免疫组织化学法分析细胞外调节蛋白激酶（ERK）、磷酸化的细胞外调节蛋白激酶（p-ERK）及星形胶质细胞特异性标记物GFAP的表达水平。结果d1，6组大鼠基础热痛阈和MPE值无明显差异。d7，6组大鼠的基础热痛阈无明显差异，但与I组相比，Ⅱ、Ⅳ、V、Ⅵ组的MPE值降低（P〈0．05）；与Ⅱ组相比，Ⅲ、V、Ⅵ组的MPE值增高。d7，6组大鼠腰5脊髓内总ERK的表达无明显差异；与I组相比，Ⅱ、Ⅳ、V组腰5脊髓内p-ERK的表达明显增多（P〈0．05）；与Ⅱ组相比，Ⅲ、Ⅳ、V、Ⅵ组腰5脊髓内p-ERK的表达均减少（P〈0．05）。与I组相比，Ⅱ，Ⅳ组腰5脊髓内GFAP的表达明显增强（P〈0．05）；与Ⅱ组相比，Ⅲ，V，Ⅵ组腰5脊髓内GFAP的表达明显降低（P〈0．05）。结论右美托咪定能够剂量依赖地预防正常大鼠吗啡耐受的形成，这可能与其能够抑制脊髓内ERK的磷酸化，减少星形胶质细胞的活化有关。
- 周宁陈春龙高珊高献忠刘清珍刘健嵇晴李伟彦
- 关键词：吗啡耐受细胞外信号调节激酶脊髓背角
- 磷酸二酯酶4B在脂多糖诱导大鼠小胶质细胞炎性因子释放中的作用被引量：1
- 2013年
- 目的 评价磷酸二酯酶4B（PDE4B）在脂多糖诱导大鼠小胶质细胞炎性因子释放中的作用.方法 采用随机数字表法,将原代大鼠小胶质细胞分为5组（n=24）：对照组、脂多糖组、单纯载体组、错配小干扰RNA组（siRNA）组和PDE4B-siRNA组.对照组和脂多糖组不转染;单纯载体组给予脂质载体1 μl;错配siRNA组和PDE4B-siRNA组分别加入错配siRNA 2μl、PDE4B-siRNA 2 μl与脂质载体1μl（加入100μl无血清培养基中,siRNA终浓度为20 nmol/L）,各组转染或培养48 h后,采用Western blot法和RT-PCR法分别测定PDE4B蛋白与mRNA的表达,除对照组外其余各组加入含有脂多糖100 ng/ml的无血清培养基,培养24 h后采用ELISA法测定TNF-α及IL-1β释放水平,采用Western blot 法检测小胶质细胞细胞外调节蛋白激酶（ERK）、磷酸化ERK（p-ERK）的蛋白表达.结果 与对照组相比,其余4组TNF-α和IL-1β释放水平升高,小胶质细胞p-ERK表达上调,PDFB-siRNA组小胶质细胞PDE4B蛋白及其mRNA表达下调（P＜0.05）,脂多糖组、单纯载体组和错配siRNA组差异无统计学意义（P＞0.05）;与脂多糖组相比,PDE4B-siRNA组TNF-α和IL-1β释放水平降低,p-ERK表达下调（P＜0.05）,单纯载体组和错配siRNA组差异无统计学意义（P＞0.05）.5组小胶质细胞ERK表达水平差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 PDE4B可促进脂多糖诱导的小胶质细胞炎性因子释放,机制与激活ERK有关.
- 和晓韵张利东底妍刘健李伟彦嵇晴
- 关键词：小神经胶质细胞脂多糖类细胞因子类
- 硫化氢复合浅低温对突触内N-甲基-D-天冬氨酸受体及其反应元件结合蛋白信号通路的影响被引量：2
- 2014年
- 目的：研究表明硫化氢（ H2 S）能调节大脑N-甲基-D-天冬氨酸受体（ N-methyl-D-aspartate receptors ， NMDARs）的功能，但其在脑复苏中的作用仍需进一步阐明。文中通过观察H2 S复合浅低温对大鼠全脑缺血再灌注后海马NMDARs的亚单位NR2A、NR2B及其环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（ phospho-cAMP response element binding protein ， p-CREB）信号通路的影响，旨在探讨H2 S是否存在脑复苏作用及其发挥作用的潜在机制。方法雄性SD大鼠随机分为5组（ n＝20）：假手术组、模型组、浅低温组、硫氢化钠（ NaHS）组、浅低温＋NaHS组。采用Pulsinelli-Brierley四血管阻塞法建立大鼠全脑缺血再灌注损伤模型，缺血15 min再灌注即刻NaHS组和浅低温＋NaHS组腹腔注射14μmol/kg NaHS，浅低温组和浅低温＋NaHS组行体表降温至肛温32～33℃。6 h后断头取海马，分别采用分光光度计法测H2 S的含量，Western blot法测NR2A、NR2B以及p-CREB的表达，RT-PCR法测脑源性神经营养因子（ brain derived neurotrophic factor ， BDNF） mRNA的水平，每组分别取4只于再灌注72 h取脑组织行HE染色观察CA1区锥体细胞病理改变。结果①与假手术组海马组织H2S含量（15．2±2．0）nmol/g相比，各组均升高（P＜0．05）；与模型组的H2S含量（25．2±3．5）nmol/g相比，浅低温组（26．5±3．5）nmol/g略升高（P＞0．05），而NaHS组（37．5±4．0）nmol/g和浅低温＋NaHS组（38．7±4．4）nmol/g显著升高（P＜0．05）；②与假手术组相比，各组NR2A、NR2B的灰度值均增高（P＜0．05），且模型组和浅低温组NR2A/NR2B＜1，NaHS组和浅低温＋NaHS组NR2A/NR2B＞1；③与模型组的p-CREB表达（0．55±0．06）相比，浅低温组（0．99±0．15）、NaHS组（1．05±0．12）、浅低温＋NaHS组（1．02±0．15）显著升高（P＜0．05）；与模型组的BDNF mRNA表达量（0．83±0．12）相比，浅低温组（1．11±0．13）、
- 代海滨胡益民嵇晴张利东苗晓蕾朱四海李伟彦段满林
- 关键词：硫化氢N-甲基-D-天冬氨酸受体环磷酸腺苷反应元件结合蛋白脑缺血再灌注损伤
- 塞来昔布多模式镇痛用于妇科子宫切除手术的临床研究被引量：1
- 2015年
- 目的观察塞来昔布多模式镇痛用于妇科经腹子宫切除手术的术后镇痛效应。方法将择期手术的患者随机分为超前镇痛组、术后镇痛组和对照组三组,每组各20例。超前镇痛组:术前2 h给予患者口服塞来昔布200 mg,术后距第一次给药12 h、24 h再次分别口服200 mg。术后镇痛组:术后即刻口服塞来昔布200 mg,术后距第一次给药12 h、24 h再次分别口服200 mg。对照组:术前2 h给予口服安慰药,术后距第一次给药12 h、24 h再次分别口服安慰药。安慰药为复合维生素片。观察三组的患者,术后静息状态和运动状态的VAS评分;术后4个时间段的吗啡用量以及术后24 h、48 h的吗啡总用量。结果塞来昔布术前使用或术后使用,都在术后早期(12 h),对静息和运动状态的疼痛,镇痛效果较对照组优越(P<0.05)。而且,在术后极早期(6 h),术前使用较术后使用对术后运动状态的疼痛,镇痛效果更优越(P<0.05)。在吗啡用量方面,塞来昔布术前使用或术后使用,都可以在术后早期(术后24 h内),较对照组减少吗啡的用量(P<0.05);而且,术前使用较对照组,对吗啡的总用量(24 h和48 h),减少更明显(P<0.05)。结论塞来昔布术前、术后都应使用,并且术前开始使用对静息及运动状态疼痛的镇痛效果更优越,并减少吗啡的用量更明显。
- 代海滨徐苗苗李伟彦朱四海嵇晴吴智方段满林徐建国
- 关键词：塞来昔布多模式镇痛超前镇痛术后镇痛
- 线粒体及凋亡相关信号途径在脑缺血性损伤细胞死亡过程中的重要角色被引量：6
- 2015年
- 背景:脑缺血后神经细胞病理变化的机制仍未完全阐明,现有的研究已经从细胞器水平,如线粒体等,深入研究其病理变化的机制。目的:总结和讨论线粒体及凋亡相关信号途径在脑缺血性损伤中的作用。方法:应用计算机检索CNKI和Pub Med外文数据库,以"线粒体,凋亡,脑缺血,活性氧,再灌注,超氧化物歧化酶,一氧化氮合酶,Bcl-2蛋白家族,综述"为中文检索词,以"cerebral ischemia,mitochondrion,apoptosis,reactive oxygen species,reperfusion,superoxide dismutase,nitric oxide synthase,Bcl-2 protein family,review"为英文检索词,按纳入和排除标准对文献进行筛选,排除与研究目的无关和内容重复者,保留50篇文献做进一步分析。结果与结论:现有的研究表明,线粒体可通过产生大量活性氧,进而激活多种信号途径,及调控线粒体相关凋亡途径在脑缺血性损伤中起重要的作用。活性氧在脑缺血导致的细胞死亡中有重要作用,不仅引起生物大分子损伤,而且可引起凋亡信号转导。线粒体产生大量的活性氧,从而激活多种信号通路及参与凋亡的内在途径调控,在细胞死亡中起重要作用。
- 代海滨苗晓蕾嵇晴段满林
- 关键词：线粒体脑缺血凋亡再灌注
- 沉默PDE4B对内毒素刺激的小胶质细胞内cAMP的影响被引量：1
- 2013年
- 目的观察磷酸二酯酶4(phosphodiesterase 4,PDE4)4种亚型(A、B、C和D)的siRNA对内毒素刺激前后小胶质细胞内cAMP的影响。方法 24孔板接种原代培养的小胶质细胞,收集细胞测定PDE4 4种亚型的蛋白含量。随机将细胞分为空白对照组、LPS组、单纯载体组、错配siRNA组、PDE4A-siRNA组、PDE4B-siRNA组、PDE4C-siRNA组和PDE4D-siRNA组,空白对照组与LPS组细胞不进行转染;其余5组分别转染LipofectaminTMRNAiMAX、错配siRNA、PDE4A siRNA、PDE4B siRNA、PDE4C siRNA和PDE4D siRNA,48 h后收集各组细胞测定4种亚型mRNA及细胞内cAMP的表达水平;除空白对照组外,其余7组细胞在转染48 h后分别给予100μg·L-1LPS,刺激30 min后收集各组细胞测定细胞内cAMP的浓度。结果 PDE4 4种亚型蛋白均在小胶质细胞内表达;转染48 h后,PDE4A-siRNA、PDE4B-siRNA、PDE4C-siRNA和PDE4D-siRNA可分别明显抑制相应PDE4亚型mRNA的表达(P<0.05),各组细胞内cAMP的含量无明显改变(P>0.05);LPS刺激后各组细胞内cAMP的含量均比空白对照组明显增高(P<0.05),与LPS组相比,仅PDE4B-siRNA组细胞内的cAMP含量明显升高(P<0.05)。结论 PDE4B-siRNA可有效抑制PDE4B mRNA的表达并能明显升高LPS刺激后细胞内的cAMP含量。
- 和晓韵底妍张利东刘健刘清珍李伟彦嵇晴
- 关键词：小胶质细胞磷酸二酯酶4神经病理性疼痛环磷酸腺苷
