国家自然科学基金(30070779)
- 作品数：16 被引量：86H指数：7
- 相关作者：李森恺李养群徐家杰刘立强王永前更多>>
- 相关机构：中国医学科学院中国协和医科大学中国医学科学院中国协和医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金卫生部临床学科重点项目国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 冻干无细胞膀胱黏膜下基质修复兔尿道缺损被引量：10
- 2005年
- 目的 探讨冻干无细胞膀胱黏膜下基质修复尿道缺损的效果。方法 应用反复冻融-酶法及冷冻干燥技术制备冻干无细胞人体膀胱黏膜下基质。 18只新西兰白兔建立尿道中段部分缺损模型 ,尿道缺损面积约 1 0cm× 0 5cm。其中 14只兔作为实验组 ,以冻干无细胞膀胱黏膜下基质修补尿道缺损 ,术后 1、2、3、4、8、12、2 4周分别取 2只行逆行性尿道造影 ,观察尿道情况 ,并采取尿道组织进行大体、组织学及超微结构观察 ;4只兔作为对照组 ,未采用任何材料修补尿道缺损 ,直接缝合尿道海绵体包膜、皮下组织及阴茎皮肤 ,术后 2、4周分别取 2只行逆行性尿道造影 ,采取尿道组织进行大体观察。结果 实验组 14只兔均未发现明显的尿道狭窄。冻干无细胞膀胱黏膜下基质组织相容性良好 ,移植后无细胞膀胱黏膜下基质内有细胞长入 ,新生血管形成 ,术后 2周无细胞膀胱黏膜下基质移植区完全上皮化。随着移植时间的延长 ,移植区胶原纤维排列由紊乱趋于规则。结论 冻干无细胞膀胱黏膜下基质能够诱导尿道黏膜细胞迁徙、生长和上皮化 ,初步认为可以作为尿道缺损修复材料。
- 王永前李养群刘立强徐家杰霍然李强李森恺
- 关键词：无细胞基质尿道缺损阴茎皮肤皮下组织
- 以L929细胞为滋养层的尿道黏膜上皮细胞体外培养被引量：13
- 2003年
- 目的 探索尿道黏膜上皮细胞体外培养的技术和方法 ,为进一步采用组织工程技术构建尿道黏膜组织奠定基础 ,并为尿道黏膜的生理、药理、毒理学及微生态研究提供实验模型。 方法 取刚离乳的雄性新西兰幼兔尿道黏膜组织 ,分别以 Dispase 消化液和混合消化液消化成单细胞悬液 ,以差速贴壁法排除成纤维细胞 ,接种后以 L92 9细胞为滋养层细胞进行培养 ,定期换液 ,细胞生长、增殖至 80 %～ 90 %融合时传代。细胞进行常规 HE染色、流式细胞仪检测 ,以扫描电镜、透射电镜观察其超微结构。再分别设立实验组 (n=2 0 )、阳性对照组 (正常尿道黏膜组织石蜡切片 ,n=2 0 )及阴性对照组 (成纤维细胞铺片 ,n=2 0 )行免疫组织化学染色。 结果 原代培养 10天左右细胞逐渐生长融合成片 ,如铺路石状 ,细胞大小均一。上皮细胞为二倍体细胞 ,生长期内均为单一的上皮细胞 ,无成纤维细胞混杂生长 ,细胞可传 11～ 13代 ,成活 5 0～ 6 0天。 结论 新西兰幼兔尿道黏膜上皮细胞可在体外进行培养 ,在一定时间内保持增殖活力 ,为构建组织工程化尿道奠定了基础 ,且为尿道黏膜的体外研究提供了实验模型。
- 翟弘峰李森恺刘红李养群徐军
- 关键词：L929细胞滋养层体外培养
- 人体口腔粘膜上皮细胞体外培养和鉴定被引量：7
- 2005年
- 目的建立稳定的人口腔颊粘膜上皮细胞体外培养方法.方法取正常人口腔颊粘膜,中性蛋白酶和胰蛋白酶消化后,获取的粘膜上皮细胞接种于10%含胎牛血清培养基中连续培养,探索最适培养条件,进行细胞定性及形态学观察.结果体外培养细胞中无成纤维细胞混杂,长满后呈上皮细胞特有的铺路石样外观,体外可连续传9～10代,生长期50～60天.细胞角蛋白免疫组化染色阳性,透射电镜下可见上皮细胞间特有的桥粒结构.结论采用含血清培养基体外连续培养口腔粘膜上皮细胞获得成功,4代以内培养上皮细胞形态结构与原代无差别,可用于组织工程化口腔粘膜构建.
- 陈文李森恺史宏道李养群蒋华贾文英祝君梅
- 关键词：细胞培养上皮细胞口腔粘膜
- 应用口腔粘膜(或中厚皮片)尿道下裂修复术与感染的关系研究被引量：5
- 2006年
- 目的:探索应用口腔粘膜(或中厚皮片)修复尿道下裂手术与感染的关系,研究采用这两种组织材料的三种再造尿道术式易感染性的差异,分析各术式与尿道下裂术后感染的关系,据此改进尿道下裂修复手术方法,降低感染率。方法:采用细菌培养鉴定法证实应用口腔粘膜(或中厚皮片)再造尿道的细菌的来源及种类。分别统计三种应用口腔粘膜(或中厚皮片)再造尿道手术方法的术后感染率,包括一期法口腔粘膜(或中厚皮片)与轴形皮瓣耦合再造尿道术、一期法口腔粘膜(或中厚皮片)与局部皮瓣耦合再造尿道术、分期法口腔粘膜(或中厚皮片)再造尿道术等三种术式。结果:三种方法的感染率均低于同时期尿道下裂术后平均感染率,三种术式中以分期手术感染率最低。结论:应用口腔粘膜(或中厚皮片)再造尿道,可以降低尿道下裂术后感染率。
- 范巨峰徐家杰李养群刘立强陈文王永前李强李森恺
- 关键词：再造尿道尿道下裂口腔粘膜中厚皮片
- 应用口腔黏膜再造尿道远期观察研究被引量：8
- 2006年
- 目的观察口腔黏膜再造尿道的远期外观与结构变化,以及与正常尿道黏膜的差异。明确口腔黏膜用作再造尿道材料的优缺点,以及与尿道下裂术后并发症是否有相关性。探讨用口腔黏膜作再造尿道材料的可行性。方法随访应用口腔黏膜再造尿道患者的远期形态与功能。应用尿道镜观察应用口腔黏膜再造尿道的远期外观。应用光学显微镜观察取自口腔黏膜再造尿道内壁的标本,同时对比观察正常口腔黏膜和尿道黏膜标本。结果应用口腔黏膜再造尿道,远期外形良好,排尿功能正常。再造尿道壁大体外观接近正常,但组织结构仍为典型口腔黏膜。结论应用口腔黏膜再造尿道,远期形态、功能均接近正常尿道,但组织结构没有改变。口腔黏膜是良好的再造尿道组织材料。
- 范巨峰刘立强李养群徐家杰陈文王永前李强李森恺
- 关键词：尿道下裂再造尿道口腔黏膜微环境
- 复杂性尿道下裂治疗初探被引量：10
- 2007年
- 目的:探讨多次手术失败后尿道下裂的治疗方法。方法:自2000年起应用植皮法再造尿道25例,取阴囊或腹股沟中厚皮片缝合固定于阴茎腹侧白膜,卷管再造尿道,并行龟头成形术。用带侧孔单腔硅胶导尿管支撑3～6个月。半年后行尿道吻接术。结果:1例患者手术后出现尿道口狭窄,行尿道外口切开术。2例发生尿瘘,其余无并发症发生,阴茎形态佳,尿道口为矢状裂隙。结论:会阴皮肤适合再造尿道,结合带侧孔单腔硅胶导尿管支撑是治疗复杂尿道下裂的较好方法,有推广价值。
- 李鹏程李强赵穆欣陈斌段晨旺陈文唐勇周传德李养群李森恺
- 关键词：尿道下裂尿道
- 无细胞人膀胱黏膜下基质的生物相容性初探被引量：1
- 2006年
- 目的探讨无细胞膀胱黏膜下基质(acellularurinarybladdersubmucosa,AUBS)的生物相容性。方法应用反复冻融-酶消化处理及冷冻干燥技术制备人AUBS。体外培养人口腔黏膜细胞,以2×106/ml密度接种于AUBS,观察细胞生长和增殖情况。取纯种SD大鼠18只,雌雄不限,体重250～300g。将AUBS1cm×1cm移植于大鼠腹部肌肉内,分别于术后3、6、10、14、21和28d各处死3只动物并取材进行组织学观察。结果AUBS主要由胶原纤维构成,呈三维立体网络状结构。第2代人口腔黏膜细胞接种于AUBS后能够生长和繁殖,10d后在AUBS表面形成了连续单层细胞结构。AUBS植入大鼠腹部肌肉内,术后6dAUBS移植区可见组织细胞浸润、生长,14d可见新生血管形成,28d胶原纤维排列规则。结论AUBS可以在体内、体外诱导细胞黏附和生长,生物相容性良好。
- 王永前刘立强李养群徐家杰霍然李强李森恺
- 关键词：生物相容性
- 应用会阴不同部位皮肤再造尿道远期微环境对比研究被引量：5
- 2006年
- 目的:观察应用不同部位皮肤再造尿道的远期微环境差异及与正常尿道的差别,探讨哪些部位来源的皮肤适合用于再造尿道。方法:应用尿道镜、尿道造影及术中直视下观察应用阴囊、阴茎、包皮等不同部位皮肤再造尿道的远期外观。应用光镜观察应用不同部位皮肤再造尿道内壁结构、正常皮肤(包括阴囊、阴茎、包皮等部位皮肤)结构、正常尿道黏膜结构,并对比其差异。结果:应用不同部位皮肤再造尿道的远期外观均可以接近正常尿道黏膜,但结构与同源皮肤完全相同。应用不同部位皮肤再造尿道的皮肤附属器检出率与同源皮肤相近,不同部位皮肤附属器检出率递增顺序依次为:包皮内外板、阴茎体、阴囊中隔、阴囊。结论:应用皮肤再造尿道的远期结构仍为同源皮肤。从微环境角度来说,会阴皮肤用于再造尿道的选择顺序依次为:包皮内外板、阴茎体、阴囊中隔、阴囊。
- 范巨峰李森恺李养群杨明勇
- 关键词：再造尿道尿道下裂皮肤微环境
- 口腔黏膜预植分期再造尿道修复复杂型尿道下裂被引量：12
- 2005年
- 目的探讨应用口腔黏膜预植对复杂型尿道下裂分期再造尿道的方法。方法1999年1月至2003年3月对40例患者应用口腔黏膜预植再造尿道,采用两种术式:一是游离移植口腔黏膜于阴茎腹侧,半年后二期卷管修复尿道(Ⅰ式),二是口腔黏膜卷管游离移植再造阴茎段部分尿道,半年后吻接两尿道(Ⅱ式)。结果所有病例二期手术后愈合良好,无尿瘘发生,排尿通畅。结论本术式为复杂型尿道下裂提供了一种可靠而有效的手术方法,有推广价值。
- 汪灏李森恺杨明勇李养群刘立强李强陈文徐家杰王永前吴意光
- 关键词：口腔黏膜尿道下裂尿道下裂口腔黏膜尿道修复复杂型
- 自体血清与胎牛血清培养口腔黏膜角质细胞及上皮组织的实验研究被引量：11
- 2006年
- 目的探讨自体血清培养人口腔黏膜角质细胞的可行性,为组织工程口腔黏膜用于临床提供理论和技术依据。方法应用自行制备的含10%、20%和30%自体血清的培养液及10%胎牛血清培养液,对人口腔黏膜角质细胞进行培养。对比观察不同浓度自体血清和胎牛血清培养的口腔黏膜角质细胞及上皮组织生长情况,绘制10%自体血清组及10%胎牛血清组细胞生长曲线及计算其倍增时间。并行抗-HLA免疫荧光检测培养上皮。结果各浓度自体血清组和10%胎牛血清组细胞生长及形态无明显差别,10%自体血清组细胞倍增时间为24.02±1.80h,与10%胎牛血清组20.90±0.79h比较,差异无统计学意义(P>0.05)。各组细胞24h克隆形成率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);随自体血清浓度升高获得黏膜上皮面积增大,厚度增加,以20%自体血清组最为明显,与10%胎牛血清组培养黏膜上皮比较,差异有统计学意义(P<0.05)。各组培养上皮经抗-HLA免疫荧光检测为阳性。结论制备的自体血清能完全替代胎牛血清对口腔黏膜角质细胞进行培养,且培养的口腔黏膜上皮组织分化优于胎牛血清。
- 刘立强李森恺范金财李养群刘元波王永前徐家杰曹蕊周传德
- 关键词：胎牛血清
