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采用同源重组技术构建金黄色葡萄球菌sae基因缺失突变株: 2012年; 针对金黄色葡萄球菌sae基因前后两段序列设计两对引物,PCR扩增出sae基因上下游同源臂序列,克隆到穿梭载体pBT2中;两段序列之间用来自质粒p646的Em抗性基因片段连接,作为筛选标记,从而构建同源重组穿梭质粒pBT2Δsae;将pBT2Δsae电转化到金黄色葡萄球菌菌株RN4220中,40℃经过七轮培养,进行抗性培养基筛选和PCR验证,以及RT-PCR观察基因表达水平。获得一株金黄色葡萄球菌sae基因缺失突变株RNΔsae,为进一步研究sae基因的调控机制等提供有用的实验材料。; 唐俊妮康铭松周锐史贤明陈焕春; 关键词：金黄色葡萄球菌同源重组

蜂蜜桑椹酒主要成分的分析被引量：7: 2011年; 对不同品种的蜂蜜桑椹酒中主要成分进行分析,结果表明:各种酒样在糖度、酸度、酒度上差异很小,但蛋白质含量差异较大。矿物元素表现出高钾低钠的特点,镁元素含量较高。氨基酸总含量和必需氨基酸含量以红果1号桑椹蜂蜜发酵酒最高,而农用桑椹蜂蜜发酵酒最低。在检测的7种酚酸和5种黄酮醇中,不同酒样间存在一定差异,但原儿茶酸、咖啡酸、槲皮素和桑色素是含量较高的4种物质。此外,以3-甲基-1-丁醇、2-甲基-1-丙醇、苯乙醇、4-羟基苯乙醇、2,3-丁二醇、乙酸乙酯、丁二酸单乙酯、S-乳酸乙酯、乙酸和癸酸等为蜂蜜桑椹酒的基本香气成分。; 陈娟阚建全张荣唐俊妮; 关键词：蜂蜜桑椹酒

抗菌肽BuforinⅡ衍生物的生物活性研究被引量：2: 2011年; 研究了抗菌肽BF2-A/B的抗菌活性及其他的生物活性。两个肽均具有很强的广谱抗菌活性,BF2-B对细菌的抑菌活性比BF2-A强,它们没有体外溶血活性。BF2-A几乎没有细胞毒性,而BF2-B在100μg/mL时,能抑制大约20%的肿瘤细胞生长。两个肽均能结合脂多糖,中和内毒素,BF2-B与脂多糖的亲和结合力比BF2-A强。BF2-A/B经胃蛋白酶和胰蛋白酶处理后,抗菌活力都略有下降,而经蛋白酶K处理一段时间后,就完全丧失了抗菌活性。; 郝刚乐国伟施用晖唐俊妮; 关键词：抗菌肽衍生物生物活性

食品源金黄色葡萄球菌耐药基因的检测被引量：1: 2017年; 金黄色葡萄球菌是引起食物中毒事件主要致病菌之一。本实验采用聚合酶链式反应(PCR)技术对103株食品源金黄色葡萄球菌进行甲氧西林类基因、氯霉素类基因、红霉素类基因、四环素类基因、喹诺酮类基因和内酰胺酶类基因检测。结果显示103株金黄色葡萄球菌菌株中6种耐药基因检出率分别为mec69.9%、chl80.6%、erm95.1%、tet87.4%、nor84.5%和bla18.4%。本实验表明多株金黄色葡萄球菌具有耐药特征,存在耐甲氧西林类、氯霉素类、红霉素类、四环素类、喹诺酮类、内酰胺酶类多种抗生素耐药基因。; 余璐; 关键词：金黄色葡萄球菌 PCR 耐药基因

食品中金黄色葡萄球菌检测方法研究进展被引量：11: 2011年; 金黄色葡萄球菌是引起食物中毒的重要致病菌之一,检测食品中金黄色葡萄球菌对于预防和控制金黄色葡萄球菌引起的食物中毒具有重要意义。论述和分析了传统培养方法、传统检测方法的改进、免疫学方法、以分子生物学为基础的快速检测方法以及商业化快速检测方法。; 杨蓉生王小玲唐俊妮; 关键词：金黄色葡萄球菌食品

食源性金黄色葡萄球菌粘附素基因的检测及蛋白酶K和DNase Ⅰ对菌株被膜形成的影响被引量：2: 2016年; 本研究以实验室保存的17株金黄色葡萄球菌食品分离菌株为研究对象,通过提取细菌DNA,采用PCR检测14种粘附素基因的分布情况,随后采用试管法和微孔板法对细菌成膜能力进行检测,进一步研究蛋白酶K和DNaseⅠ对生物被膜形成能力的影响。结果表明:17株菌株均携带clf B基因,检出率为100%,均不携带bap,bbp和clf A基因,有13株菌扩增出ica BC基因(76.5%),12株均扩增出cna基因(70.6%),11株菌扩增出eno基因(64.7%),10株菌分别扩增出fib和ica AD基因(58.8%),9株菌扩增出fnb A基因(52.9%),4株菌分别扩增出sas C,sas G和ebp S基因(23.5%),2株菌扩增出fnb B基因(11.8%)。试管法和微孔板法观察到17株菌株均有生物被膜形成,但不同菌株的被膜形成能力有差异,10号和30号菌株被膜形成能力显著强于其它15株菌(p<0.05)。在细菌生长过程中,蛋白酶K、DNaseⅠ以及两种酶的联合处理发现蛋白酶K和DNaseⅠ处理组细菌生物被膜形成能力明显低于对照未处理组(p<0.05),并且蛋白酶K对金黄色葡萄球菌生物被膜形成的抑制效果比DNaseⅠ好,但是两种酶联合处理效果与对照组差异不显著(p>0.05)。本研究旨在为食源性金黄色葡萄球菌生物被膜的形成与控制策略提供基础数据。; 马伊萨兰余博旸陈娟刘骥唐俊妮; 关键词：生物被膜形成 DNASE

抗菌肽BF2-A/B对细菌表面特性的影响及与脂质体的相互作用被引量：3: 2011年; 研究抗菌肽BuforinⅡ的衍生肽BF2-A/B对细菌表面特性的影响,以及与脂质体的作用模式。Zeta电位仪和十六烷萃取法检测发现BF2-A/B作用G-菌和G+菌后,能够提高细胞表面电负性和疏水性。选用卵磷脂和心磷脂制备包裹钙黄绿素的脂质体,模拟细菌胞膜,考察发现BF2-A/B能够引起荧光素从脂质体中泄漏,BF2-B对膜的扰动作用更大,引起的泄漏率比BF2-A高,但它们都不破裂脂质体膜。用FITC标记衍生肽,研究发现加入脂质体后,FITC-肽荧光光谱蓝移,量子产率增大,并且脂质体保护FITC-肽免受丙烯酰胺的荧光淬灭,说明BF2-A/B的N-端插入了脂质体的磷脂双分子层中。; 郝刚乐国伟施用晖唐俊妮; 关键词：抗菌肽细菌表面特性脂质体

大米浓缩蛋白酶法改性与功能性质评价被引量：1: 2011年; 以大米浓缩蛋白(rice protein concentrate,RPC)为原料,利用碱性蛋白酶(Alcalase)改性。探讨了在最适条件下,即底物浓度5%、酶与底物比例0.8%、pH8.5、55℃,经过改性制得改性大米浓缩蛋白(modified rice protein concentrate,MRPC)的功能性质:氮溶性指数(NSI)为52.9%、乳化活性(EA=0.101)、乳化稳定性(ES=26.7%)、表面疏水性(2627.6)以及分子量分布。研究表明,经过Alcalase改性后的MRPC与大豆分离蛋白接近,具有作为食品蛋白质添加剂开发的潜力。; 刘骥唐俊妮; 关键词：大米浓缩蛋白碱性蛋白酶改性功能性质

葡萄球菌核酸酶对金黄色葡萄球菌和其他细菌生物被膜形成的抑制作用被引量：11: 2011年; 葡萄球菌核酸酶是金黄色葡萄球菌(Staphylococ cusaureus)的一个重要毒力因子,它的生物学作用仍没有完全阐述清楚.本研究观察到金黄色葡萄球菌核酸酶产生菌株的生物被膜形成受到明显抑制.葡萄球菌核酸酶是由nuc1基因编码,当nuc1基因被敲除后,突变菌株生物被膜形成能力大大增加.扫描电子显微镜和激光共聚焦显微镜用于评价nuc1基因在生物被膜形成中的作用.另外,nuc1基因编码的产物——葡萄球菌核酸酶和NUC1重组蛋白对其他生物被膜形成细菌(铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae)和副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis))同样有明显抑制作用.本研究表明,葡萄球菌核酸酶和生物被膜的形成之间有直接联系,并且葡萄球菌核酸酶起着抑制生物被膜形成的重要作用,为研究葡萄球菌核酸酶的生物学作用和理解葡萄球菌核酸酶抑制生物被膜形成提供理论依据.; 唐俊妮康名松陈焕春史贤明周锐陈娟杜怡午; 关键词：生物被膜形成葡萄球菌核酸酶金黄色葡萄球菌

六株金黄色葡萄球菌生化特性、胞外分泌蛋白及肠毒素基因分析: 2011年; [目的]了解和比较6株金黄色葡萄球菌生化特性、胞外分泌蛋白及肠毒素基因等特征,为揭示其在感染疾病发生中的机制提供基础.[方法]采用API检测试纸条,SDS-PAGE电泳和PCR等方法研究6株金黄色葡萄球菌.[结果]6株菌株都可发酵葡萄糖、蔗糖和甘露糖,其中,5株菌株可分解精氨酸,4株菌株尿酶试验显阳性,2株菌株可分解山梨醇、苦杏仁苷和阿拉伯糖,1株菌株H2S试验呈阳性,1株菌株可分解肌醇和密二糖;SDS-PAGE显示4株菌株可产生多种胞外分泌蛋白;5对特异性传统肠毒素基因引物对6株菌株进行PCR扩增,其中4株携带肠毒素基因.[结论]研究结果揭示了肠毒素的产生与胞外其它分泌蛋白和毒素在一定程度上具有关联性.; 唐俊妮史贤明陈娟郝刚刘骥; 关键词：金黄色葡萄球菌胞外蛋白肠毒素基因食品微生物

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