国家转基因植物研究与产业化专项(JY03-A-2402)
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 相关作者：李荣田郭德栋李海英孙晓凌郑天然更多>>
- 相关机构：黑龙江大学更多>>
- 发文基金：国家转基因植物研究与产业化专项黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- RNA干涉的研究进展被引量：1
- 2004年
- RNA干涉(RNA interfering)是目前分子生物学领域的研究热点之一,RNAi是一种极为保守的生物机制,而且已在很多种生物中发现了该现象,或是获得了成功的干涉实验。由于RNAi具有良好的技术优越性,使其在很多领域,如基因功能验证、疾病治疗方面有着广阔的应用前景。
- 王志伟周慧李荣田郭德栋
- 用于RNA干涉的siRNA的设计与合成
- 2008年
- RNA干涉是近年来分子生物学技领域的研究热点之一。对siRNA(small interfering RNA)的合成方法以及设计原则进行了归纳总结,并应用此原则根据GenBank上拟南芥fie基因cDNA保守区设计了3对21nt的寡核苷酸序列,加上8个与T7启动子引物3`端匹配的碱基序列CCTGTCTC,经过体外转录等一系列反应,获得3条用于RNA干涉的siRNA。
- 白莉杨忠亮李荣田
- 关键词：RNA干涉SIRNADSRNA
- 甜菜单体附加系M14花蕾cDNA文库的构建被引量：3
- 2004年
- 为了克隆甜菜单体附加系M14无融合生殖相关基因 ,采用cDNA文库快速构建法制备了M14花蕾cDNA文库。根据甜菜单体附加系M14无融合生殖的细胞胚胎学研究结果 ,提取甜菜M14花蕾三个关键时期的RNA ,分离纯化mRNA ,以Oligo(dT)为引物 ,在逆转录酶的作用下 ,合成第一链cDNA ,进而合成第二链cDNA。含有EcoRⅠ和NotⅠ粘性末端的双链cDNA在T4DNA连接酶的作用下与载体λZAP臂相连 ,并对连接产物进行体外包装 ,得到噬菌体颗粒 ,即甜菜单体附加系M14花蕾cDNA文库。经大肠杆菌寄主菌株XL1-blueMRF’平板检测 ,三个文库滴度分别为 2 .8× 10 5pfu·mL-1、1.6× 10 5pfu·mL-1和 3.5× 10 5pfu·mL-1,克隆重组率为 83%、78%和 81%。
- 郑天然李荣田孙晓凌李海英郭德栋
- 关键词：甜菜无融合生殖单体附加系CDNA文库
