中国医学科学院放射医学研究所基金(SF0626)
- 作品数：1 被引量：9H指数：1
- 相关作者：赵启仁颜廷东贺欣宋娜玲更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：中国医学科学院放射医学研究所基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肿瘤抑素T_7肽及其衍生物T_7-NGR载体构建及表达被引量：9
- 2008年
- 目的为了提高作用靶向性,将导向肽NGR与肿瘤抑素T_7肽的C端连接,获得T_7肽及其衍生物T_7-NGR的载体。方法通过PCR和合成基因序列方法分别构建了肿瘤抑素T_7肽及T_7-NGR的克隆载体pMD-T_7和pMD-T_7N,经酶切和测序鉴定后,将2种载体分别双酶切,经低熔点琼脂糖凝胶电泳分离后,切下目的片段与酶切回收的质粒载体pET28a在低熔点琼脂糖中直接进行连接反应。阳性克隆经酶切和测序鉴定,转化感受态E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达。结果酶切和测序鉴定结果正确,分别成功构建表达载体pET-T_7和pET-T_7N,经IPTG诱导,完成了表达条件的优化。Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳结果显示,当IPTG浓度为1mmol/L时,25℃诱导8h,分别获得了T_7肽和T_7-NGR的表达产物。结论已经成功构建T_7肽和T_7-NGR的表达载体,获得了表达产物,为下一步的小肽活性实验奠定了基础。
- 贺欣赵启仁宋娜玲颜廷东
- 关键词：基因克隆表达
