广西壮族自治区自然科学基金(0832230)
- 作品数:3 被引量:10H指数:1
- 相关作者:王琪李力张玮于红静尹巧云更多>>
- 相关机构:广西医科大学附属肿瘤医院广西医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 小分子蛋白慢病毒表达系统的构建被引量:9
- 2011年
- 目的构建趋化因子蛋白慢病毒表达系统,建立稳定表达GFP的卵巢癌细胞系,为研究趋化因子蛋白的功能及作用机制打下基础。方法趋化因子CCL18、IL-8、CXCL1基因克隆质粒经PCR扩增、酶切,与慢病毒载体PWPI连接,构建的重组慢病毒质粒按比例与包膜质粒PCMV-dR8.74及包装质粒PMD2.G混合,LipofectinTM2000共转染293T细胞系包装病毒颗粒,病毒液感染卵巢癌SKOV3细胞后,采用流式细胞仪分选出GFP表达的细胞作为转染成功的细胞。实时荧光定量PCR验证转染后目的基因的表达,Westernblot验证目的蛋白的表达。结果重组慢病毒基因能高效地转导入靶细胞,转导效率达95%以上,并稳定表达;实时荧光定量PCR检测结果显示:细胞和组织中转染目的基因组与对照组比较,均见目的基因的表达显著增高(P<0.05);Westernblot验证转染目的基因组小分子蛋白成功表达。结论本实验成功构建了小分子蛋白慢病毒表达系统,为进一步研究小分子蛋白在人体的功能及作用机制建立了实验基础。
- 尹巧云李力于红静王琪
- 关键词:慢病毒卵巢癌
- 卵巢恶性肿瘤患者血清中白细胞介素8亚型的纯化、鉴定和临床验证
- 2009年
- 早诊早治是提高卵巢恶性肿瘤患者生存率的最佳途径。本课题组先期已运用表面增强激光解吸离子化-飞行时间质谱(SELDI—TOF—MS)技术分析卵巢恶性肿瘤患者与卵巢良性肿瘤患者和健康人血清差异蛋白表达谱,筛选出31个差异蛋白作为潜在的血清肿瘤标志物。本研究对两个质荷比(M/Z)为8136(M8136)和8927(M8927)的卵巢恶性肿瘤血清差异蛋白进行纯化、鉴定,证实M8136和M8927分别为白细胞介素8(IL-8)的两个亚型,并临床验证血清中这两个亚型的含量。
- 王琪李力黎丹戎张玮
- 关键词:卵巢恶性肿瘤恶性肿瘤患者白细胞介素8人血清纯化
- β-淀粉样蛋白在卵巢癌组织中的表达及与临床关系研究被引量:1
- 2009年
- 目的研究β-淀粉样蛋白(Amyloid beta A4 protein,APP)mRNA在卵巢肿瘤患者组织中的表达,并探讨其临床意义。方法Trizol一步法提取卵巢肿瘤患者卵巢组织总RNA,实时荧光定量PCR技术对49例卵巢癌、20例卵巢良性肿瘤、16例正常卵巢组织进行定量分析。结果APP mRNA在卵巢癌中表达量比在卵巢良性肿瘤和正常卵巢组织中明显升高(P<0.05);卵巢颗粒细胞瘤患者组织APP的表达显著高于上皮性卵巢癌(P<0.05);术前行新辅助化疗的卵巢癌患者APP表达量显著高于良性组和正常对照组,但与非化疗患者的表达没有差异,提示化疗不会降低其表达量。APP表达量与卵巢癌患者的生存率无显著相关性,不是独立判断卵巢恶性肿瘤患者预后的因素。结论卵巢癌患者肿瘤组织APP mRNA水平显著高于良性和正常对照组,并在卵巢颗粒细胞瘤中高表达,提示其增高与恶性肿瘤的组织学类型有关,具有一定的临床诊断意义和价值。
- 于飞李力王琪张玮阳志军姚德生张洁清唐步坚
- 关键词:卵巢癌AMYLOIDBETAA4实时荧光定量PCR