国家质检总局科技计划项目(2004IK084)
- 作品数：3 被引量：16H指数：2
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- 相关机构：东北农业大学黑龙江省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目国家社会公益研究专项计划国家标准化管理委员会项目更多>>
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- 转基因小麦的定性PCR筛选检测技术被引量：3
- 2007年
- 为了建立转基因小麦的PCR检测方法标准,以B73、B72、B102三个被转入外源高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS)基因的转基因小麦品系为材料,对目前国内外转基因小麦中通用的标记基因bar和uid A、NOS终止子和Ubiquitin启动子进行了定性PCR的筛选检测,在国内外首次找到了小麦中特有的内参照基因麦谷醇溶蛋白基因(GAG56D),设计并合成了麦谷醇溶蛋白基因(GAG56D)和Ubiquitin启动子的引物序列,并对PCR反应条件进行了优化,PCR产物经过琼脂糖凝胶电泳分析后,可以检测到预期大小的目的片段。同时对PCR产物用实时荧光定量PCR进行了确证实验,并得到预期的结果。定性PCR最低检测灵敏度为0.5%(w/w)。建立的转基因小麦定性PCR筛选检测方法具有通用性。
- 栾凤侠张洪祥白月
- 关键词：小麦转基因PCR
- 小麦贸易及转入外源基因研究进展被引量：13
- 2005年
- 随着小麦转基因技术进一步研究应用,转基因小麦的商品化生产和进出口贸易已指日可待,随之而来的是转基因小麦安全性和检验检疫问题。本文在前人研究基础之上系统地总结分析了小麦的贸易现状,对转基因小麦的研究和商品化生产进展缓慢的原因进行分析,并对目前小麦转入外源基因的研究进展情况进行了阐述。
- 栾凤侠陶波
- 关键词：转基因小麦外源基因转基因技术检验检疫小麦贸易贸易现状
- 小麦中转基因成分PCR与实时荧光PCR的定性检测低限被引量：1
- 2009年
- 为了确定小麦转基因成分PCR和实时荧光PCR方法的定性检测低限,将转基因小麦B73与非转基因小麦(检测外源基因)、小麦与大米(检测内源基因)分别进行质量分数配比后提取DNA用于测定相对检测低限,再将100%转基因小麦B73的DNA进行浓度稀释用于测定绝对检测低限,并应用已知的NOS、bar、ubiquitin,ui-dA(GUS)外源基因和Wx012、GAG56 D内源基因的引物和探针对模板DNA分别进行PCR与实时荧光PCR扩增。结果表明,最终确定PCR方法检测小麦转基因成分的相对检测低限为0.1%(质量分数),绝对检测低限为0.5 ng/μL;实时荧光PCR方法的相对检测低限为0.1%(质量分数),绝对检测低限为0.01 ng/μL。所确定的检测低限可满足国家对转基因产品的最低标识要求。
- 白月栾凤侠王珣
- 关键词：转基因小麦PCR
