广东省医学科学技术研究基金(B2008027)
- 作品数：11 被引量：95H指数：4
- 相关作者：蒋小云莫樱陈述枚张巧玲陆慧瑜更多>>
- 相关机构：中山大学附属第一医院深圳市龙岗中心医院广州医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：广东省医学科学技术研究基金广东省科技计划工业攻关项目广东省科技厅科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 过敏性紫癜肾炎患儿血清IgA1半乳糖水平的测定被引量：1
- 2010年
- 目的了解过敏性紫癜肾炎患儿血清IgA1半乳糖水平。方法研究对象分成三组,分别为过敏性紫癜肾炎组(n=20),非IgA肾病、过敏性紫癜肾炎组(n=18),正常对照组(n=18)。用蚕豆凝集素(vicia villosa lectin,VVL)亲和ELISA法测定IgA1与VVL的结合力,间接反映IgA1的半乳糖水平,结合力高提示IgA1半乳糖水平低。结果过敏性紫癜肾炎组患儿血清IgA1分子与VVL结合力[(0.34±0.09)U]高于正常对照组[(0.27±0.06)U]及非IgA肾病、过敏性紫癜肾炎组[(0.28±0.08)U](P<0.05)。结论过敏性紫癜肾炎患儿血清IgA1呈低半乳糖基化。
- 蔡勇蒋小云陈述枚张巧玲
- 关键词：过敏性紫癜肾炎IGA1酶联免疫吸附法
- IgA肾病患儿血清IgA1低糖基化水平的变化及临床意义被引量：3
- 2009年
- 目的探讨IgA肾病(IgAN)患儿血清IgA1低糖基化水平的变化及临床意义。方法肾活检证实为IgAN的26例患儿按临床表现分为孤立性血尿组(10例)、血尿蛋白尿组(6例)和肾病综合征组(10例);按病理分级分为病理Ⅰ加Ⅱ级组(5例)、Ⅲ级组(11例)和Ⅳ加Ⅴ级组(10例)。同期门诊体检的健康儿童20例作为健康对照组。以蚕豆凝集素(VVL)亲和ELISA检测VVL与血清IgA1的结合力,间接反映血清IgA1糖基化程度(结合力增高说明IgA1呈低糖基化)。采用SPSS11.0软件进行分析,组间比较采用t检验、单因素方差分析和LSD-t法,相关分析采用Pearson法。结果IgAN患儿血清IgA1低糖基化水平显著高于健康对照组(P=0),在不同临床表现和病理分级组中的差异无统计学意义(P>0.05)。IgA1低糖基化水平与患儿起病年龄、尿红细胞计数、24h尿蛋白定量、血清清蛋白(Alb)、胆固醇(Chol)、BUN、Cr水平和内生肌酐清除率(Ccr)无相关性。采用VVL亲和ELISA测定其血清IgA1与VVL结合力反映IgA1低糖基化水平诊断IgAN的灵敏度为88.5%,特异度为90.0%,与肾穿病理诊断的符合率为88.5%,阳性预测价值为92.0%,阴性预测价值为85.7%。结论IgAN患儿血清存在IgA1低糖基化,其低糖基化水平与临床表现和病理改变无关。采用VVL亲和ELISA测定血清IgA1与VVL结合力反映IgA1低糖基化水平这一方法在诊断儿童IgAN方面显示出很好的有效性和实用性,对临床无创性诊断IgAN有一定的应用价值。
- 蒋小云张巧玲吴伟莫樱陆慧瑜陈述枚
- 关键词：酶联免疫吸附法儿童
- 阿霉素肾病大鼠肾组织中nephrin和CD2AP的表达及意义被引量：13
- 2009年
- 【目的】动态观察nephrin、CD2相关蛋白(CD2AP)在阿霉素肾病大鼠肾小球中的表达变化,探讨其在蛋白尿发生发展过程中的作用。【方法】72只大鼠分为2组,模型组36只和对照组36只,模型组大鼠尾静脉一次性注射盐酸阿霉素,对照组大鼠尾静脉一次性注射等容积生理盐水,分别于注射后3、5、7、14、28、42d各杀检6只大鼠。采用实时荧光定量PCR、免疫组织化学检测大鼠肾小球中nephrin、CD2AP的表达和分布变化。【结果】①模型组大鼠7d时nephrinmRNA表达增加,14d时其蛋白表达(9.44±0.49)亦显著增加;CD2AP表达增加时间较晚,28d时其mRNA和蛋白表达(7.88±1.01)才显著增加。②与对照组相比,模型组nephrin、CD2AP出现分布异常,从沿着毛细血管袢线样分布逐渐转变为不连续性颗粒样或斑片状分布。③肾小球nephrinmRNA、CD2APmRNA表达量与24h尿蛋白量均呈正相关关系(r=0.878,P<0.01;r=0.945,P<0.01)。【结论】①nephrin早期出现表达增加及分布异常,可能是导致蛋白尿的原因及判断肾小球足细胞损伤的一个早期重要指标。②CD2AP在后期出现表达增加,可能是足细胞抵抗损伤的一种代偿反应。
- 彭亚琴莫樱蒋小云张巧玲陈述枚
- 关键词：NEPHRINCD2AP阿霉素蛋白尿
- IgA肾病大鼠模型的建立被引量：43
- 2011年
- 目的通过改良IgA肾病(IgAN)大鼠模型的制备方法,建立更安全、可靠、成功率更高的IgAN模型。方法牛血清白蛋白(BSA)400 mg/kg隔天灌胃8周;每周1次皮下注射四氯化碳(CCl4)0.1 ml+蓖麻油0.3 ml,共9周;第6周尾静脉注射0.05 mg脂多糖(LPS)。在建模过程观察血尿、蛋白尿、血生化、肾组织病理I、gA沉积情况。结果 (1)模型组在第6周末出现血尿、蛋白尿,渐增多(均P<0.01);(2)模型组大鼠肾组织在第8周末后出现系膜增生,在第4周末起见足突融合;(3)模型组大鼠肾组织有IgA沉积。结论改良方法建立的IgAN大鼠模型更安全、可靠,其临床指标、病理改变均接近人类IgAN。
- 陆慧瑜张巧玲蒋小云陈丽植莫樱陈述枚
- 关键词：动物
- IgA1对人肾小球系膜细胞TGF-β_1、Smad7和纤连蛋白表达的影响被引量：3
- 2010年
- 目的:研究IgA1对人肾小球系膜细胞(HMCL)转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad7和纤连蛋白(FN)表达的影响。方法:分别以正常人IgA1(NIgA1)、正常人聚合IgA1(aNIgA1)、IgA肾病(IgAN)患者IgA1(PIgA1)和IgAN患者聚合IgA1(aPIgA1)剌激体外培养的HMCL;RT-PCR法检测HMCL TGF-β1、Smad7和FN mRNA的表达,Western印迹法检测HMCL Smad7蛋白水平,ELISA法检测HMCL TGF-β1和FN蛋白水平。结果:PIgA1和aPIgA1能显著上调TGF-β1、Smad7F、N mRNA和蛋白的表达,且aPIgA1刺激组明显强于PIgA1刺激组(P<0.01或P<0.05)。在对照组、NIgA1刺激组和aNIgA1刺激组间,TGF-β1、Smad7、FN表达水平的差异无统计学意义(P>0.05)。在aPIgA1刺激HMCL不同时间组,TGF-β1、Smad7和FN表达水平逐渐升高,mRNA分别在12 h、12 h和24 h达高峰,蛋白水平分别在12 h2、4 h和24 h达高峰。结论:PIgA1和aPIgA1能上调HMCLTGF-β1、Smad7和FN的表达,aPIgA1的作用强于PIgA1,且呈一定的时间依赖性,提示IgAN患者血清IgA1,而且主要是aIgA1可通过影响TGF-β1、Smad7和FN而在IgAN进展中发挥作用。
- 张巧玲蒋小云吴伟陆慧瑜莫樱陈丽植
- IgA肾病患者Cosmc基因启动子甲基化状态的检测被引量：3
- 2010年
- 目的检测IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)患者β1,3半乳糖基转移酶(β1,3galactosyltransferase,β1,3GT)分子伴侣Cosmc(core1β3-Gal-T specific molecular chaperone)基因启动子的甲基化状态。方法选择2006年5月至2007年2月在中山大学附属第一医院确诊为IgA肾病的23例患者,纳入IgAN组(n=23);病理学分级分别为Ⅰ级2例,Ⅱ级4例[Ⅰ级+Ⅱ级组(n=6)],Ⅲ级6例[Ⅲ级组(n=6)],Ⅳ级8例,Ⅴ级3例[Ⅳ级+Ⅴ级组(n=11)]。选择同期在中山大学附属第一医院就诊的非IgA肾病患者纳入非IgAN组(n=10),健康体检者纳入正常对照组(n=23)。三组受试者年龄、性别构成比较,差异无显著意义(P>0.05)(本研究遵循的程序符合中山大学附属第一医院人体试验委员会制定的伦理学标准,得到该委员会批准,分组征得受试对象监护人的知情同意,并与其签署临床研究知情同意书)。IgAN诊断标准:①以IgA为主的免疫球蛋白在肾小球系膜区和或血管袢沉积;②排除狼疮性肾炎、紫癜性肾炎及乙肝病毒相关性肾炎等继发性肾脏疾病。IgAN病理学分级参照Lee分级标准,分为Ⅰ～Ⅴ级。分离外周血B淋巴细胞,提取DNA,对DNA进行亚硫酸氢钠修饰。采用巢式甲基化特异性聚合酶链反应(nested methylation specific Polymerase Chain Reaction,nMSP)检测外周血B淋巴细胞Cosmc基因启动子CpG岛甲基化状态。扩增产物经克隆、测序验证。结果 IgAN组、非IgAN组及正常对照组外周血B淋巴细胞Cosmc基因启动子CpG岛均呈部分甲基化。IgA肾病不同病理学分级组外周血B淋巴细胞Cosmc基因启动子CpG岛均呈部分甲基化。结论尚未发现IgA肾病患者外周血B淋巴细胞Cosmc基因启动子检测位点范围内CpG岛存在异常甲基化。
- 蔡勇蒋小云陈述枚孙良忠莫樱陆慧瑜史成军
- 关键词：肾小球肾炎IGA肾病甲基化
- 泼尼松、依那普利、氯沙坦对多柔比星肾病大鼠肾组织足细胞分子的影响被引量：1
- 2009年
- 目的从足细胞分子nephrin和CD2相关蛋白(CD2AP)的变化探讨泼尼松、依那普利、氯沙坦3种药物抗蛋白尿作用的机制。方法予24只大鼠尾静脉一次性注射盐酸多柔比星,制备肾病模型,予6只大鼠尾静脉一次性注射等容积9 g/L盐水作为正常对照组。模型分为肾病组、泼尼松组、依那普利组及氯沙坦组各6只,分别灌服蒸馏水、泼尼松、依那普利、氯沙坦。采用实时荧光定量PCR、免疫组织化学检测大鼠肾小球nephrin、CD2AP的表达和分布变化。结果1.与正常对照组比较,肾病组24 h尿蛋白定量显著增加(P<0.01),且渐增加至6周;与肾病组比较,泼尼松组、依那普利组及氯沙坦组大鼠经治疗4周后尿蛋白定量均显著降低(Pa<0.01);3个治疗组间尿蛋白量无明显差异。2.nephrin mRNA、CD2AP mRNA表达变化:肾病组均显著高于正常对照组(Pa<0.01),泼尼松组、依那普利组、氯沙坦组均较肾病组降低(Pa<0.01),以泼尼松组下降最明显。3.nephrin、CD2AP蛋白水平变化:肾病组较正常对照组明显增加(Pa<0.05),泼尼松组、依那普利组、氯沙坦组均较肾病组降低(Pa<0.05),各治疗组间比较无明显差异。4.nephrin、CD2AP分布变化:肾病组肾小球nephrin、CD2AP染色增强,为连续性或不连续性颗粒样或节段性斑片状分布,泼尼松组、依那普利组、氯沙坦组中二者分布均较肾病组接近正常。结论泼尼松、依那普利、氯沙坦可通过稳定肾小球足细胞分子nephrin和CD2AP,从而起到减轻或消除蛋白尿的作用。
- 彭亚琴莫樱蒋小云张巧玲陈述枚
- 关键词：泼尼松依那普利氯沙坦足细胞
- IgA肾病患者血清IgA1对人肾小球系膜细胞转化生长因子β1／Smads信号通路的影响被引量：3
- 2009年
- 目的研究IgA肾病（IgAN）患者血清IgA1对人肾小球系膜细胞（HMC）转化生长因子β1（TGF-β1）、磷酸化Smad3（p-Smad3）和纤连蛋白（FN）的刺激作用，探讨IgA1对TGF-β1／Smads信号通路的影响。方法体外培养HMC，分5组，即健康对照组、健康人IgA1（NIgA1）刺激组、健康人聚合IgA1（aNlgA1）刺激组、IgAN患者IgA1（PIgA1）刺激组和IgAN患者聚合IgA1（aPIgA1）刺激组。RT—PCR检测各组细胞TGF-β1、p-Smad3和FNmRNA的表达。Western免疫印迹检测HMCp-Smad3蛋白水平。ELISA检测HMC培养上清液中TGF-β1、FN蛋白水平。结果PIgA1和aPIgA1能显著上调TGF-β1，P—Smad3、FNmRNA和蛋白的表达（P〈0．05）。aPIgA1上调二三者mRNA表达的能力分别为PIgA1的1．5倍、1．3倍和1．5倍（均P〈0．05）。aPIgA1上调TGF-β1和p-Smad3蛋白表达的能力分别为PIgA1的2．1倍和1．6倍（均P〈0．01）。在aPlgA1刺激不同时间，TGF-β1和p-Smad3mRNA表达于12h达高峰（0．866±0．055和0．891±0．251），于24h同到基线水平。FNmRNA表达于24h达高峰（0．968＋0．031）。TGF-β1和p-Smad3蛋白表达逐渐升高，TGF-β1于12h达高峰[（246．960±1．270）ng/L]，p-Smad3于6h达高峰（0．490±0．046）后开始下降。FN蛋白表达逐渐升高，24h达高峰[（1．804±0．038）mg／L]（均P〈0．01）。结论PIgA1和aPIgA1能显著上调HMCTGF-β1、p-Smad3、和FNmRNA表达和蛋白水平，且aPIgA1的作用强于PIgA1，提示IgAN患者血清的IgA1，主要是aIgA1可通过TGF-β1／Smads信号通路在IgAN进展中起作用。
- 蒋小云吴伟张巧玲莫樱陈丽植陆慧瑜陈述枚
- 关键词：肾小球系膜细胞转化生长因子Β1纤连蛋白
- 槐杞黄对IgA肾病大鼠蛋白尿及肾组织nephrin及podocin的影响被引量：18
- 2009年
- 目的观察槐杞黄对IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)大鼠蛋白尿及肾组织nephrin及podocin的影响,探讨槐杞黄对IgA肾病大鼠蛋白尿的治疗作用及其机制。方法将24只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、槐杞黄组,每组8只。模型组和槐杞黄组建立IgA肾病模型,槐杞黄组给予槐杞黄颗粒治疗。应用定量尿沉渣计数法检测尿红细胞个数,考马斯亮蓝法检测24 h尿蛋白定量,全自动生化分析仪检测血生化指标。应用直接免疫荧光法检测肾小球IgA沉积强度,间接免疫荧光法检测肾小球nephrin及podocin蛋白的表达及分布,采用实时荧光定量PCR技术检测肾皮质nephrin mRNA和podocin mRNA的表达。结果①槐杞黄组大鼠的尿红细胞计数、尿蛋白,较模型组显著减少,差异有显著意义(P<0.05);②槐杞黄组大鼠肾组织病变,较模型组减轻;③槐杞黄组大鼠肾小球nephrin表达量,较模型组显著升高,差异有显著意义(P<0.01),podocin表达量较模型组稍有下降,但差异无显著意义(P>0.05);槐杞黄组大鼠肾皮质nephrin mRNA及podocin mRNA的表达,较模型组显著升高,差异有显著意义(P<0.01);④槐杞黄组大鼠肾小球nephrin及podocin的不连续斑片状、团块状异常分布,较模型组改善。结论IgA肾病大鼠肾组织nephrin及podocin出现表达变化及分布异常,槐杞黄能降低IgAN大鼠尿蛋白,其作用可能与调节nephrin及podocin的表达及分布有关。
- 陆慧瑜张巧玲蒋小云陈丽植莫樱陈述枚
- 关键词：IGA肾病蛋白尿NEPHRINPODOCIN
- 肾小球疾病患儿血浆黏附分子P选择素的表达及意义被引量：2
- 2008年
- 目的探讨不同肾小球疾病患儿外周血黏附分子P选择素(CD62P)的水平及其临床意义。方法选择不同肾小球疾病患儿154例为病例组。其中原发性肾病综合征(PNS)54例,IgA肾病(IgAN)32例,紫癜性肾炎(HSPN)26例,狼疮性肾炎(LN)32例,乙肝相关性肾炎(HBV-GN)10例。病例均处于活动期。42例年龄、性别相匹配的健康儿童为健康对照组。采用放射免疫法(RIA)测定各组外周血CD62P水平,并分析其与患儿24h尿蛋白定量、血小板(PLT)、血清清蛋白(ALB)、胆固醇(CHOL)、BUN、Scr和尿N-乙酰-氨基葡萄糖苷酶(NAG)、β2微球蛋白(β2-MG)、溶菌酶(Lys)之间的相关性。结果1.各病例组活动期患儿外周血CD62P水平均明显增高,与健康对照组比较均有显著性差异(Pa<0.01)。2.各病例组中,PNS组患儿CD62P水平增高最为显著,IgAN组患儿CD62P水平显著低于其他各组(Pa<0.05)。3.各病例组患儿外周血CD62P水平均与24h尿蛋白定量呈正相关,与血清ALB呈负相关,与血清PLT、CHOL、BUN和Scr均无相关性。4.各病例组患儿外周血CD62P水平与尿NAG、β2-MG水平均呈正相关,与尿Lys水平无相关性。结论CD62P在肾小球疾病患儿外周血中表达增强,提示其参与了儿童肾小球疾病的发生和发展。
- 张巧玲蒋小云董淑红莫清萍莫樱陈述枚
- 关键词：肾小球疾病黏附分子P选择素儿童
