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江苏省基础研究计划(BK2012769)
作品数:
1
被引量:5
H指数:1
相关作者:
李晋玉
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张雯娜
陶小荣
卫其巍
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相关机构:
南京农业大学
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发文基金:
江苏省基础研究计划
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2014
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逆转录环介导等温扩增技术快速检测大豆花叶病毒
被引量:5
2014年
大豆花叶病毒(Soybean mosaic virus,SMV)是一种在世界很多国家广泛分布并极具破坏性的植物病毒,导致大豆严重减产和种质衰退,每年都会给很多国家带来巨大的农业经济损失,为此,建立了一种逆转录环介导等温扩增( Reverse-transcription loop-mediated isothermal amplification, RT-LAMP)全新的SMV检测技术,利用该技术可以快速、准确与有效地检测大豆植株和种子中携带的SMV。根据GenBank数据库中大豆花叶病毒的外壳蛋白基因序列,设计并筛选到了SMV RT—LAMP特异性引物组,应用该引物组优化了RT—LAMP反应参数,灵敏度实验结果表明,RT-LAMP检测SMV比普通RT—PCR灵敏度高10~100倍。结合RNA粗提法,建立了一步法RT—LAMP快速、灵敏地检测到植物叶片中的SMV。加入荧光染料SYBR Green Ⅰ则可在反应管中直接观察检测结果,实现了检测的可视化。该RT-LAMP技术还可灵敏地检测到大豆种子中携带的SMV。RT-LAMP检测方法第一次应用于SMV的检测,具有灵敏度高、速度快和特异性强的优点,可应用于实验室和田间大豆样品SMV的快速检测。
张雯娜
李晋玉
田金艳
卫其巍
智海剑
陶小荣
关键词:
大豆花叶病毒
大豆
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