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两种牛乳κ-酪蛋白的间接ELISA定量检测研究被引量：2: 2014年; 分别以免血清IgG与鸡卵黄抗体（IgY）为检测抗体,建立了两种牛乳κ-酪蛋白的间接ELISA定量方法.牛乳κ-酪蛋白分别免疫新西兰大白兔和临产母鸡,经亲和层析分离纯化后得到anti-κ-CN-IgG与anti-κ-CN-IgY两种抗体.两种抗体均与β-酪蛋白、α-乳白蛋白和乳清粉存在一定交叉反应,抗体与相应抗原进行免疫吸收后得到高特异性IgG与IgY.用吸收后的anti-κ-CN-IgG建立的间接ELISA法,当标准κ-CN质量浓度在0.098～3.125 mg/L时,A450 nm值与κ-CN的质量浓度具有线性关系,变异系数小于1％,回收率在99.10％～101.1％之间；用吸收后的anti-κ-CN-IgY检测κ-CN,在0.098～6.25 mg/L时,A450 nm值与κ-CN的质量浓度成良好的线性关系,变异系数小于2％,回收率在98％～100.8％之间.当三聚氰胺掺假量在0～20％时,两种抗体均能通过κ-CN的定量检测而实现乳品的掺假检验.; 薛海燕秦婧宋宏新韩芳潘洁; 关键词：间接ELISA

牛乳酪蛋白体外模拟消化液的ACE抑制活性及其肠道吸收被引量：7: 2018年; 本文对牛乳酪蛋白进行体外模拟消化,以ACE抑制活性为指征,LC-MS/MS确定水解物肽谱,并采用大鼠肠道模型对其吸收进行初步研究。结果为人工胃液消化、人工肠液消化、胃肠联合消化三种消化方式的水解度均随时间的延长而增大,单胃和单肠消化的ACE抑制率均随水解时间的延长先快速增加,随后逐渐降低,而胃肠联合的ACE抑制率则是先降低再增加,胃肠联合消化产生水解度最高为25.51%,其ACE抑制率在2 h时达到最高值为68.03%;LC-MS/MS测定消化液的肽谱,分析得出模拟消化后可能产生的ACE抑制肽有IPP、RYLGY、LHLPLP、AYFYPEL、RPKHPIKHQ及WQVLPNAVPAK;使用FITC标记酪蛋白进行体外模拟消化,SDS-PAGE和Tricine-SDS-PAGE都表明FITC-酪蛋白经过胃肠消化后荧光标记稳定存在,且水解物的分子量在5 ku以下;大鼠肠道吸收模型发现标记后的牛乳酪蛋白经模拟消化后在肠道吸收率大小依次为十二指肠吸收>空肠吸收>回肠吸收>结肠吸收,主要在十二指肠吸收。; 薛海燕薛丽欢贺宝元王战勇许淼白文卿; 关键词：牛乳酪蛋白 ACE抑制肽

卵清蛋白水解及抗氧化肽制备工艺研究被引量：5: 2016年; 卵清白蛋白是蛋清中主要的过敏原之一,采用胃蛋白酶水解可降低其过敏原性.本研究通过制备卵清白蛋白抗氧化活性多肽,以DPPH自由基清除率和水解度为指标,考察了底物质量分数、酶解时间、加酶量等因素对卵清白蛋白多肽抗氧化活性的影响.正交试验结果表明,胃蛋白酶的最佳水解条件为底物质量分数4%、酶解时间5h、加酶量9 000U/g,在此条件下卵清蛋白的水解度和DPPH自由基清除率均达到最大,分别为83.9%和89.2%.该条件下获得的卵清蛋白水解液可作为抗氧化剂或富含多种氨基酸的白蛋白营养液,在食品、医药等领域具有广泛的应用前景.; 薛海燕王战勇宋宏新李珊; 关键词：胃蛋白酶抗氧化活性水解度

卵黄抗体/壳聚糖微囊的制备与体外释放性能的研究被引量：1: 2014年; 研究卵黄抗体/壳聚糖缓释微囊的制备工艺。以壳聚糖为壁材,三聚磷酸钠为交联剂,采用离子交联法制备卵黄抗体(IgY)壳聚糖微囊,应用星点实验设计,以微囊对IgY的包封率和载药量为指标对壳聚糖溶液的质量浓度,壳聚糖与三聚磷酸钠质量比和IgY的初始浓度三个因素进行模型拟合,效应面分析,获得制备IgY-壳聚糖微囊的最佳工艺:壳聚糖溶液的质量浓度0.23g/100mL,壳聚糖与三聚磷酸钠质量比4∶1,IgY的质量浓度2.46mg/mL,以该条件制备的IgY-壳聚糖微囊的包封率(93.26%)和载药量(25.64%)高,与理论预测值的误差较小。IgY/壳聚糖微囊经粒度分析测得平均粒径为2.16μm,Zeta电位为26.20mV,分散度较好,体外有一定缓释作用,时间为6h,微囊化对IgY活性具有保护作用。; 薛海燕杜枘宣韩芳宋宏新; 关键词：IGY 壳聚糖

超声处理对牛乳酪蛋白结构及抗原性的影响被引量：10: 2019年; 利用超声波处理牛乳致敏蛋白α-酪蛋白(casein,CN)和β-CN,结合十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳、圆二色光谱、荧光光谱及酶联免疫吸附测定等方法分析α-CN和β-CN结构和抗原性的变化。结果表明:随着超声波功率的增大,α-CN的分子质量无显著性变化,β-CN在600 W时发生聚集,两种酪蛋白羰基含量上升,自由巯基含量先下降后回升,在500 W时达到最低,疏水性则呈现与自由巯基含量相反的规律;二级结构中,α-螺旋结构经超声处理后其相对含量减少,无规卷曲相对含量随着超声功率先增加后降低,功率为500 W时相对含量最高,β-折叠的相对含量变化趋势则与无规卷曲相反,这表明超声波处理破坏了酪蛋白的高级结构;随着超声功率的增强,抗原性呈现先升高后降低的趋势,其中500 W时抗原性最高,与酪蛋白疏水性及无规卷曲结构相对含量呈正相关,与β-折叠结构的相对含量呈现负相关。超声处理酪蛋白在影响蛋白构象及结构的同时改变其抗原性,且抗原性与疏水性及无规卷曲相对含量相关。; 薛海燕操歌贺宝元樊娇娇薛丽欢; 关键词：牛乳酪蛋白抗原性羰基巯基

牛乳酪蛋白双联胶体金免疫层析试纸条的研制被引量：5: 2018年; 原料羊乳中掺入牛乳会对其制品的食品安全造成损害.本研究的目的是建立一种免疫层析试纸条的检测方法检测羊乳原料乳的掺假.以牛乳αs1-CN及牛乳β-LG为检测对象,制备两者的特异性抗体,建立双联胶体金免疫层析试纸条.该实验制备的多克隆抗体α-CN IgG和β-LG IgG蛋白质浓度分别为4.86和5.99 mg/mL,两种抗体的效价为1∶25 600和1∶204 800,制备的胶体金溶液最适pH值为8.0,最佳蛋白标记量为10μL,且β-LG IgG中α-CN IgG的最适掺入量为20%.试纸条以玻璃纤维素膜VL68作为金标垫、硝酸纤维素膜SarteriesCN 95作为NC膜,分别用6μL,1 mg/mL的α-CN IgG,6μL,1 mg/mL的β-LG IgG包被NC膜T线、用6μL,1mg/mL二抗包被C线.该试纸条可特异性的检测出α-CN和β-LG,无明显的交叉反应,且可检出的牛乳最低掺入量为5%.; 薛海燕许淼白文卿张颖薛丽欢; 关键词：胶体金免疫层析

改性壳聚糖复合微球对花青素的吸附及解吸被引量：3: 2018年; 采用反相悬浮乳化法制备改性壳聚糖复合微球,通过扫描电镜、X-衍射仪对其进行检测,结果表明该吸附剂粒径均匀流动性能良好。研究改性壳聚糖复合微球对黑米花青素吸附性能并与大孔树脂D101作比较,探究了pH、吸附时间等影响因素对吸附率的影响,并设计响应面进行优化。实验结果表明,当pH为6、温度40℃、时间6 h、吸附剂用量0.1 g、振荡速率100r/min,用75%的乙醇其解吸率可达85%左右;响应面优化条件为:温度为41.73℃、时间为6.04h、pH为5.88,在此条件下吸附率可达95.60%,这说明复合微球对花青素的吸附是可行的。; 薛海燕仇旭东; 关键词：壳聚糖复合微球花青素吸附率

载5-氟尿嘧啶壳聚糖/明胶微粒的制备及药物释放性能被引量：5: 2016年; 壳聚糖及明胶是生物相容性良好的高分子药物载体,制备载5-氟尿嘧啶壳聚糖/明胶微粒,并进行体外释药研究。以石蜡油为外相,壳聚糖/明胶为内相,用乳化交联法制备微粒,以吸附药量为指标,采用正交设计实验优化获得最佳制备条件,用红外光谱、SEM对最佳条件下制备的微粒进行表征。结果表明壳聚糖/明胶微粒的最佳制备条件如下:水油比1∶7,壳聚糖/明胶浓度比1∶3,乳化剂100.7mmol/L,乳化5min,乳化温度60℃,交联剂戊二醛用量5.5mmol/L,交联时间1h。在此条件下,载药微粒的载药量为34.93%,包封率为38.36%。红外光谱图表明壳聚糖/明胶微粒已负载5-氟尿嘧啶,SEM表明微粒成球状,表面较光滑。模拟胃肠释放表明,微粒具有一定的缓释性能。采用乳化交联法制备载5-氟尿嘧啶壳聚糖/明胶微粒方法简单,重现性好,且其体外释放实验显示出明显的缓释作用。; 贺宝元张宝艳李珊薛海燕; 关键词：优化设计壳聚糖明胶 5-氟尿嘧啶体外释药

牛羊乳α-酪蛋白的B细胞抗原表位预测及免疫反应性分析被引量：4: 2017年; 牛羊乳的α-酪蛋白营养功能相似,但蛋白质亚类结构和含量不同,可能是造成其过敏性差异的原因.本文旨在利用生物信息学DNAStar Protean软件、SOPMA以及the Bepi Pred 1.0服务器对牛羊乳主要过敏蛋白αs1-酪蛋白(Casein,CN)的二级结构、亲水性、抗原指数、表面可及性和柔韧性进行预测,分析鉴定主要B细胞抗原表位.合成相应表位肽段序列,制备酪蛋白抗体,采用间接ELISA法分析验证合成多肽的免疫反应性.结果表明:牛羊乳αs1-CN的氨基酸序列同源性89%,但抗原表位存在差异,与牛乳αs1-CN相比,羊乳抗原表位数目相差不大,但两者抗原表位区域存在一定的包含重叠关系.且羊乳αs1-CN合成肽段P-1037(26~31,LSPEVP)、P-1040(140~142,EGN)和牛乳αs1-CN合成肽段P-1038(189~208,TDAPSFSDIPNPIGSENSEK)、P-1039(99~102,EDVP)都具有免疫反应性,该结果为过敏原表位的选择提供基础,为牛羊乳过敏原性比较及改性加工提供理论依据.; 薛海燕韩波李珊操歌; 关键词：抗原表位

M细胞及其功能的研究进展被引量：4: 2017年; M细胞是淋巴滤泡表面的一种特殊细胞,存在于肠上皮细胞之间,它能摄取、提呈抗原,启动黏膜免疫反应。M细胞的深入研究对了解黏膜免疫反应及疫苗研制有重要意义。为进一步研究M细胞的作用机制和在疫苗中的应用,类人M细胞体外模型的建立方法也在不断优化。本文主要介绍了M细胞的形态、功能及类人M细胞模型的体外建立方法。; 薛海燕李珊韩波王战勇; 关键词：M细胞抗原提呈免疫反应体外模型

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国家自然科学基金(31301405)

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