国家自然科学基金(30800389)
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
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- Par6A cDNA的克隆与表达
- 2009年
- 目的探讨Par6A基因的克隆表达及功能。方法用RT-PCR从大鼠L6骨骼肌细胞扩增出Par6A的cDNA,利用分子克隆的方法构建Par6A的克隆载体以及真核表达载体,在293细胞中进行表达,通过免疫共沉淀初步研究Par6A的功能。结果成功扩增出Par6AcDNA,片断大小约1 kb,并构建了真核重组表达质粒pDsRed-Express-N1-Par6A。在转染293ET细胞24 h后,荧光显微镜下可见红色荧光的表达。免疫共沉淀实验表明Par6A与PKCζ存在相互作用。结论成功扩增出大鼠骨骼肌的Par6AcDNA,为研究Par6A的相关功能奠定了基础。
- 刘晓军孔星星朱镠娈崔安芳纪少伟常永生方福德
- 关键词：CDNA免疫共沉淀
- 人SREBP-1c启动子报告基因的构建和功能验证
- 2009年
- 目的构建人SREBP-1c启动子的荧光素酶报告基因载体并进行功能的初步验证。方法提取人血基因组DNA,PCR扩增SREBP-1c的启动子,构建SREBP-1c启动子双荧光素酶的报告基因载体;用双荧光素酶活性检测其功能。Western blot检测FoxO1对SREBP-1c蛋白的抑制作用。结果成功构建了pGL3-Basic-SREBP-1c-promoter的报告基因载体,共转染FoxO1明显抑制了人SREBP-1c启动子的活性,同时过表达FoxO1抑制了SREBP-1c的蛋白表达。结论FoxO1通过抑制SREBP-1c的转录来抑制SREBP-1c的表达。
- 刘晓军孔星星王瑞邵迪乔爱军常永生方福德
- 关键词：FOXO1
