国家科技支撑计划(2012BAD13B06)
- 作品数：92 被引量：603H指数：13
- 相关作者：王永钟金城柴志欣熊显荣汤承更多>>
- 相关机构：西南民族大学四川省草原科学研究院青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省重点实验室更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划中央高校基本科研业务费专项资金四川省科技创新产业链示范工程更多>>
- 相关领域：农业科学生物学理学经济管理更多>>
- 川西北牦牛新孢子虫感染血清流行病学调查被引量：3
- 2013年
- 目的了解川西北牦牛新孢子虫的感染情况。方法采用间接ELISA方法对川西北阿坝州8个县1070份待屠宰牦牛血清中新孢子虫抗体进行检测。结果被检1070份血清样品中65份血清新孢子虫抗体呈阳性,样品来源的8个县都检测到了新孢子虫抗体,被检牦牛的血清抗体平均阳性率为6.1%,其中理县(12.2%)的抗体阳性率显著高于平均水平(p<0.01),马尔康的最低为2.7%。结论川西北阿坝州各县广泛存在牦牛新孢子虫感染。
- 张焕容张焕容周子雄王远微
- 关键词：间接ELISA血清流行病学调查
- 牦牛β-防御素5基因的原核表达及表达产物的抑菌活性被引量：2
- 2014年
- 【目的】克隆与表达牦牛β-防御素5(BNBD5)基因,检测其重组蛋白的体外抗菌活性。【方法】采用RT-PCR方法从牦牛肺组织中扩增BNBD5基因成熟肽编码区,根据已发现的哺乳动物β-防御素5和部分禽β-防御素5的序列构建遗传进化树。将BNBD5基因亚克隆到原核表达载体pET-32a(+)的BamHⅠ和XhoⅠ双酶切位点上,构建重组表达质粒pET32a-BNBD5。将重组表达质粒转化大肠杆菌BL21,用IPTG于37℃进行诱导表达,SDSPAGE检测融合蛋白的表达情况,并对该重组蛋白进行纯化,测定其体外抑菌活性。【结果】克隆得到了BNBD5基因成熟肽编码片段,其长度为138bp,编码45个氨基酸残基,内含6个位置保守的半胱氨酸残基。经遗传进化分析发现,该基因序列与黄牛的mRNA同源性最高,可达到86.2%。经IPTG诱导,获得了分子质量为25ku的牦牛β防御素-5成熟肽融合蛋白。琼脂糖扩散结果表明,0.08mg/mL的纯化蛋白对大肠杆菌及金黄色葡萄球菌均有抗菌作用。【结论】牦牛BNBD5成熟肽在大肠杆菌中得到了成功表达,其产物对革兰氏阴性菌(大肠杆菌)和革兰氏阳性菌(金黄色葡萄球菌)均有抗性。
- 符梅熊显荣兰道亮李键
- 关键词：牦牛重组蛋白抑菌活性
- 六份川西北短芒披碱草种质萌发期抗旱性评价被引量：8
- 2017年
- 分别以5%、10%、15%浓度的PEG-6000溶液作渗透介质模拟干旱胁迫,评价六份川西北短芒披碱草种质材料萌发期的抗旱性差异。结果表明,5%浓度PEG-6000有利于促进六份种质的萌发,10%和15%的PEG-6000对抗旱性较弱的种质抑制作用显著大于抗旱性强的种质(P<0.05);六份种质的萌发抗旱指数、种子活力指数、相对发芽率和相对发芽势的抗旱能力评价均与隶属函数法综合评价所得结果一致,相对芽长和相对根长的抗旱性评价结果与隶属函数法综合评价有差异。根据隶属函数分析,萌发期抗旱性顺序为:红10-5>205176>205133>红6-5>204290>205104。
- 符开欣刘新张新全张建波苟文龙张成林孙铭马啸
- 关键词：PEG-6000隶属函数萌发期
- 一起牦牛巴氏杆菌病的诊断被引量：11
- 2015年
- 2014年11月,四川甘孜州某牦牛养殖场牦牛暴发疾病,据畜主描述,2d内共有10头牦牛发病,其中4头牦牛死亡,从发病死亡牦牛的心、肝、脾、肺、肾、淋巴结等组织器官中分离到单一的病原菌,通过细菌染色镜检、小鼠致病性试验及PCR鉴定,确诊该病原菌为多杀性巴氏杆菌,说明该场暴发的疾病是牦牛巴氏杆菌病。
- 王继练张焕容郝一妹
- 关键词：牦牛巴氏杆菌病
- 阿坝牧区草地不同利用方式与程度对植被碳含量的影响被引量：12
- 2014年
- 为探讨不同利用方式与程度对草地植被碳含量的影响，对阿坝牧区不同利用方式草地（封育天然割草地、人工栽培、放牧草地）和植物生长季不同利用程度草地植被的地上部分、地下根系和枯落物的碳含量进行调研。结果表明，1）草地地上植被碳含量在不同利用方式上表现为封育天然割草地、冬春放牧草地和人工栽培草地显著高于夏秋放牧草地（P〈0．05）；生长季不同利用程度上冬春和夏秋轻度放牧草地显著高于重度和中度放牧草地（P〈0．05）。2）草地枯落物碳含量在不同利用方式与程度上差异均不显著。3）从根系总碳含量来看，不同利用方式上夏秋放牧草地和封育天然割草地显著高于冬春放牧草地和人工栽培草地（P〈0．05）；生长季不同利用程度上夏秋中度和轻度放牧草地显著高于夏秋重度和冬春放牧草地（P〈0．05），且各种利用方式与程度草地地下根系总碳含量均从表层向下依次显著的递减（P〈0．05），o～10cm的根系碳含量占总量的65％以上，10～30cm各草地根系碳含量差异不显著（P〈0．05）。通过数量关系得出，草地植被碳含量在利用方式上表现为封育天然割草地（356．509g／m^2）〉冬春放牧草地（297．780g／m^2）〉人工栽培草地（164．953g／m^2）〉夏秋放牧草地（137．577g／m^2），地上植被碳含量分别为地下根系碳含量的15．334，17．130，9．167和5．146倍；在生长季不同利用程度上表现为冬春放牧草地（297．780g／m^2）〉夏秋轻度放牧草地（217．002g／m^2）〉夏秋重度放牧草地（113．849g／m^2）〉夏秋中度放牧草地（81．882g／m^2），地上植被碳含量分别为地下根系碳含量的17．130，8．636，4．412和2．430倍。利用方式和放牧强度是影响草地植被碳含量的重要因素。
- 杨树晶李涛干友民王永纪磊宋中齐刘焘
- 关键词：地上植被枯落物碳含量
- 犏牛精子发生阻滞的比较转录组研究被引量：9
- 2014年
- 犏牛是牦牛与普通牛的杂交后代,其雄性不育是牦牛杂交改良中的一大难题.运用高通量测序技术对健康成年犏牛和牦牛的睾丸组织进行转录组测序和比较研究,探讨了犏牛激素调节、精子发生及细胞凋亡等相关基因的表达情况.结果表明,犏牛、牦牛睾丸组织中分别有17784和18529个基因表达,在犏牛中表达显著上调和下调的基因分别有5000和4089个.犏牛睾丸组织中睾酮合成相关基因和抑制素基因表达均显著上调,认为前者的表达上调可能促进睾丸内睾酮分泌和后者的表达,而后者的表达上调可能分别抑制和几乎不影响脑垂体前叶合成、分泌促卵泡刺激素和黄体生成素.比较睾丸组织中细胞标记基因在两种牛间的表达差异,发现犏牛精原干细胞、支持细胞、间质细胞、肌样细胞(睾丸纤维化)和已分化精原细胞的标记基因分别呈显著表达上调和下调,而减数分裂后期或精子形成期呈极显著下调.精原干细胞自我更新与分化异常可能导致犏牛精子发生障碍,认为其与视黄酸信号通路障碍密切相关.Syce3,Fkbp6和Dmrt7等在犏牛睾丸组织中极显著表达下调与同源染色体间、尤其是性染色体间的联会复合体数量减少有关.Spo11和Dmc1分别参与双链断裂和同源修复过程,其在犏牛睾丸中表达下调分别可能使联会复合体减少和同源修复失常.参与高度浓缩细胞核的相关基因,尤其是Tnp2,Hmgb4和H1fnt等几乎不表达,其调控表达基因Crem,GRTH/DDX25等极显著表达下调,该现象与犏牛生精细胞最终只能分化至圆形精子细胞阶段的结果相符.促凋亡相关基因,如p53,TNF-α,Trail,Bmp8b,Bax,Caspase-3,Caspase-6和Caspase-7表达均显著上调,而抑凋亡基因,如survivin,Bcl-2等显著下调,这可能是导致犏牛睾丸组织中有更多的生精细胞发生凋亡的原因之一.通过对生殖相关基因的表达分析研究,为揭示犏牛雄性不育机理以及牦牛�
- 曾贤彬柴志欣王永马志杰杨琴宋乔乔钟金城
- 关键词：犏牛牦牛睾丸转录组精子发生
- 6份川西北短芒披碱草种质苗期的抗旱性综合评价被引量：15
- 2017年
- 为了探明来自川西北的6份短芒披碱草(Elymus breviaristatus)种质材料的苗期抗旱性差异,采用室内盆栽法对种质进行为期21d的干旱处理,分别于停止浇水第0、7、14和21天取植株叶片,研究了不同水分胁迫条件下各种质的相对含水量(RWC)、相对电导率(REC)、脯氨酸(Pro)含量、叶绿素(Chl)含量、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化物酶(POD)活性7个生理特征指标的变化,并采用隶属函数法对6份短芒披碱草种质材料的抗旱性进行综合评价。结果表明,干旱胁迫对不同抗旱短芒披碱草种质材料的各生理指标有显著的影响(P<0.05),其各表型值与对照差异显著(P<0.05),且各种质间差异显著(P<0.05)。随着干旱胁迫时间的延长,6份短芒披碱草材料的相对含水量和叶绿素含量呈显著下降趋势(P<0.05),而丙二醛含量、相对电导率、脯氨酸含量和POD活性表现出上升趋势,SOD活性呈现先上升后下降的趋势。由隶属函数分析7个生理指标得到供试材料苗期抗旱性强弱顺序依次为205176>205133>红10-5>204290>红6-5>205104。
- 刘新符开欣郭志慧张新全白史且李达旭张昌兵张成林孙铭马啸
- 关键词：苗期抗旱性生理特性隶属函数
- 乐至黑山羊肾溶菌酶基因克隆及原核表达被引量：2
- 2013年
- 本研究对乐至黑山羊肾溶菌酶(LZLyK)基因进行了克隆、表达,并对其活性进行了测定。采用比较基因组技术,成功克隆了LZLyK基因,其cDNA长444 bp,编码147个氨基酸。同源性分析结果表明,氨基酸同源性与绵羊溶菌酶2(M32498.1)最高,达96.9%。构建原核表达质粒pET-LZLyK,转化大肠杆菌BL21(DE3)并诱导表达。SDS-PAGE分析结果表明,重组蛋白LZLyK得到正确表达,分子质量约为16、30 ku。采用比浊法测定了LZLyK蛋白的活性,其活性为15 U/mL,表明LZLyK蛋白具有一定抗菌活性。运用实时荧光定量PCR发现在乐至黑山羊肝脏、肾脏、气管和皱胃中均有肾溶菌酶基因的表达,在胃中表达量较高。
- 胡宇飞江明锋张鹏罗樊朱莲莲王永
- 关键词：乐至黑山羊克隆原核表达
- 反刍动物溶菌酶研究进展被引量：3
- 2013年
- 目前,抗生素滥用带来的副作用日益凸显,寻找抗生素的有效替代品显得尤为迫切。溶菌酶能水解细菌细胞壁肽聚糖中的β-1,4糖苷键,具有消化分解细菌、抑制外源微生物生长、增强机体免疫力的作用,在动物尤其是反刍动物体内广泛存在。本文讨论了反刍动物溶菌酶的来源与分布、基因序列、蛋白结构和酶学性质、蛋白功能及活性,对其耐酸分子机理进行了归纳总结;同时阐述了反刍动物溶菌酶基因的进化研究,最后对反刍动物溶菌酶研究进行了展望。研究反刍动物溶菌酶对于基础科学,并应用其转变成现实生产力意义重大。
- 张鹏江明锋王永
- 关键词：反刍动物溶菌酶耐酸性酶学性质分子进化
- 麦洼牦牛MC4R基因多态性及与生长性状的相关分析被引量：2
- 2013年
- 为探究黑皮质素4受体基因(MC4R)在麦洼牦牛群体中的遗传多态性,开展其与生长性状间的关联分析,采用PCR-SSCP技术和DNA测序技术对100头麦洼牦牛MC4R基因外显子区域进行多态性分析,并运用最小二乘方差分析法,对各基因型间体高、体质量、体斜长、胸围、管围等生长性状指标进行差异显著性检验。结果表明:MC4R基因引物P6上存在EE和EF 2种基因型,其中,粉嘴群只有EF基因型,存在严重偏态,EF型在2个群体中占绝对优势,E等位基因为优势基因;2个群体均处于中度多态(0.25
- 柴志欣王永钟金城罗晓林
- 关键词：麦洼牦牛单核苷酸多态性
