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天津市科技发展战略研究计划项目(020127)
作品数:
1
被引量:7
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相关作者:
刘增辉
鄢丽敏
宋文静
孙保存
赵秀兰
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相关机构:
天津医科大学
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天津市科技发展战略研究计划项目
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刘增辉
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2011
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石蜡包埋组织DNA提取方法的比较及巢式PCR技术的应用
被引量:7
2011年
确定从福尔马林固定、石蜡包埋(FFPE)组织中提取DNA的最佳方法,增强长片段PCR产物的成功扩增率,便于分子生物学与临床医学的有机结合。本文选取正常甲状腺FFPE标本20份,分别应用"一步法"、酚/氯仿抽提法和试剂盒法三种不同的方法提取总DNA,并应用传统PCR法和巢式PCR法对线粒体DNA(mtDNA)的D环区进行扩增。结果酚/氯仿抽提法所得样本DNA的OD260/D280比值最高,为1.703±0.086。"一步法"、酚/氯仿抽提法和试剂盒法提取DNA的普通PCR长片段扩增成功率分别为0%、5%和10%,而巢式PCR长片段扩增成功率分别为0%、95%和85%。可见用蛋白酶K消化、酚/氯仿纯化法提取的FFPE组织标本DNA质量可靠,巢式PCR技术是从石蜡标本中扩增长片段DNA的有效方法。
鄢丽敏
孙保存
赵秀兰
刘增辉
宋文静
关键词:
石蜡包埋组织
DNA提取
巢式PCR
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