国家自然科学基金(21266029)
- 作品数：13 被引量：29H指数：4
- 相关作者：曹红李春郑兰兰牛玉静张馨更多>>
- 相关机构：嘉兴学院石河子大学北京理工大学更多>>
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- 相关领域：生物学理学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 复合诱变Penicillium purpurogenum Li-3选育高产红色素及其生物活性研究被引量：2
- 2017年
- 以产紫青霉菌(Penicillium purpurogenum)Li-3为出发菌株,采用紫外-氯化锂复合诱变方法选育高产红色素菌株;并对红色素进行生物活性研究,选取1,1-二苯基-2-苦肼基(DPPH)体系评价抗氧化活性;采用滤纸片扩散法研究产紫青霉菌突变株红色素对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和大肠杆菌(Escherichia coli)的抑制作用。结果表明,最佳紫外照射时间为120 s,最佳氯化锂质量分数为0.28%,筛选得到一株高产菌株P.purpurogenum Li-3-9,接种于液体发酵培养基中,32℃、150 r/min培养168 h后,测定其红色素色价最高值达到3.28 U/mL,比出发菌株提高了83%。且该菌株连续传代5次,其遗传稳定性较好。P.purpurogenum Li-3-9代谢产生的红色素具有较好的DPPH自由基清除能力和抑制金黄色葡萄球菌的能力。
- 牛玉静曹红黄晓林童军茂隋佳慧杨雨鑫
- 关键词：复合诱变红色素生物活性
- 离子液体[MBPy]Tf2N的光谱特征及荧光法检测被引量：1
- 2015年
- 为满足疏水性离子液体N-甲基-N-丁基吡咯烷双三氟甲烷磺酰亚胺盐（[MBPy]Tf2N）在甘草酸生物催化体系中分析检测的需要,研究了[MBPy]Tf2N的光谱特征,并考察了溶剂、醇-水混合溶剂和p H值对[MBPy]Tf2N荧光特性的影响,建立了生物催化体系中[MBPy]Tf2N的荧光光谱检测方法.研究结果表明,[MBPy]Tf2N在186 nm处有1个最大吸收峰,常规紫外检测法不适于对其进行检测;[MBPy]Tf2N荧光光谱最大激发波长为228 nm,发射波长为340 nm,且其耐光褪色性良好,在水溶液中荧光量子产率为0.067,在醇-水混合溶剂中其荧光强度有增大趋势,在碱性介质中其荧光强度受影响较大;荧光光谱法检测[MBPy]Tf2N的检出限（S/N=3）为1.00μg/m L,标准曲线在5.00-1.25×10^3μg/m L浓度范围内线性关系良好（R2=0.9999）,生物反应液中加标回收率为97.4%-107.4%（相对标准偏差RSD=4.6%）.
- 欧阳巧凤郑兰兰曹红张馨李春沈姣陈礼婷刘进
- 关键词：光谱特征荧光检测法
- 固芯液化技术对微囊化Penicillium purpurogenum Li-3细胞使用性能的影响被引量：1
- 2016年
- 以微囊化产紫青霉细胞(Penicillium purpurogenum Li-3)催化甘草酸(GL)定向合成具有更高生物利用度、甜度以及安全性的单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)为目的,研究固芯液化技术对微囊化细胞使用性能的影响。结果显示,液芯微囊化细胞的生长情况和传质性能明显优于固芯微囊化细胞,并在第1批次催化反应中,液芯微囊化细胞的相对活性达到98.7%,比固芯微囊化细胞(72.7%)要高。9批次重复利用实验表明,与固芯微囊化细胞相比,液芯微囊化细胞的相对活性较高,而机械强度和操作稳定性要稍显逊色。此外,固芯液化的技术与条件对微囊化细胞发挥最佳催化效果至关重要。
- 蔡静晓曹红叶海罗婷杨露王娜刘进刘瑞麟李春
- SA/PVA液芯微囊化细胞的制备工艺及其催化性能的考察
- 2020年
- 为了进一步提高产紫青霉菌(Penicillium purpurogenum Li-3)表达的β-葡萄糖醛酸苷酶(β-glucuronidase,β-GUS)定向催化甘草酸(Glycyrrhizic acid,GL)生成单葡萄糖醛酸基甘草次酸(Glycyrrhetinic acid monoglucuronide,GAMG)的能力,本文以海藻酸钠/聚乙烯醇为固定化材料,采用微胶囊固定化技术对产紫青霉细胞进行了研究。结果表明:当海藻酸钠浓度为1%,聚乙烯醇为6%,氯化钙浓度为2%,加菌量为5%,固化氯化钙浓度为2%,并置于-18℃冰箱内冷冻4 h时,SA/PVA液芯微囊化细胞的催化活性最高,且机械强度较好。通过测定GL在SA/PVA液芯微囊化细胞中的扩散性能,建立传质模型计算得到GL在SA/PVA液芯微囊化细胞中的传质系数k=0.0741。将SA/PVA液芯微囊化细胞采用摇床培养连续培养19次,仍能保持62.02%的活性。采用SA/PVA液芯微囊化技术制备生物微胶囊能明显提高β-GUS的稳定性和重复利用率,有利于应用于工业生产中。
- 谢睆金华飞曹红胡叶慧洪爱美常军民
- 关键词：海藻酸钠聚乙烯醇
- 微囊化Penicillium purpurogenum Li-3细胞的制备及其催化性能研究
- 2018年
- 采用海藻酸钠(SA)-羧甲基纤维素钠(CMC)液芯微胶囊技术制备微囊化产紫青霉细胞(Penicillium purpurogenum Li-3),研究其制备条件及其催化性能,考察不同因素对微囊化细胞直径、机械强度、破损率、催化活性的影响。结果表明,在羧甲基纤维素钠的浓度为1.4%、海藻酸钠的浓度为1.2%、Ca Cl2的浓度为1.0%、固化过程Ca Cl2浓度为0.5%及加菌量为3.0%的条件下,制得的微囊化细胞在重复利用9次后,相对活性仍达到56.9%,显示出较好的机械强度和操作稳定性。本文为高效生物转化甘草酸合成单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)提供了技术支持。
- 黄晓林曹红欧阳巧凤沈瑞麟李春吴廷华
- 关键词：微囊化甘草酸
- 双重包埋激活脂肪酶内花凝胶微球的制备与表征
- 2023年
- 首先利用聚乙二醇8000(PEG8000)将脂肪酶激活为开放构象(PEG-Lip),再将PEG-Lip与Ca_(3)(PO_(4))_(2)共结晶制得Ca_(3)(PO_(4))_(2)@PEG-Lip晶体花,然后将晶体花包覆于海藻酸钙(CA)凝胶(Gel)微球中,制得一种双重包埋激活脂肪酶的内花凝胶微球CA-Gel@Ca_(3)(PO_(4))_(2)@PEG-Lip.该微球呈白色椭圆状,直径约2 mm.利用扫描电子显微镜(SEM)、X射线光电子能谱(EDS)、共聚焦显微镜(CLSM)和傅里叶变换红外光谱(FTIR)表征了其微观形貌和组成,发现脂肪酶被包埋在Ca_(3)(PO_(4))_(2)晶体中,形成的Ca_(3)(PO_(4))_(2)@PEG-Lip晶体花被包覆于海藻酸钙凝胶微球内的网络中.CA-Gel@Ca_(3)(PO_(4))_(2)@PEG-Lip的酶学性质研究表明,在Ca_(3)(PO_(4))_(2)晶体和海藻酸钙凝胶的“双层铠甲”保护下,脂肪酶的热稳定性和pH稳定性均有所改善.利用孔径约0.5 mm的滤网即可实现对凝胶微球的快速回收;循环利用10次后,酶活保留率达83%,脂肪酶的操作稳定性和重复利用性明显提高.本文为脂肪酶在食品与医药工业中的开发利用提供了新的思路与方法.
- 张帆郑兰兰曹红程路峰李春
- 双三氟甲烷磺酰亚胺类离子液体对产紫青霉菌株全细胞催化特性的影响
- 2016年
- 研究了双三氟甲烷磺酰亚胺阴离子Tf_2N^-分别与5种不同阳离子组成的离子液体对产紫青霉菌(Penicillium purpurogenum Li-3)的生长、代谢、细胞膜透性及全细胞催化活性的影响.结果表明,[N_(1,4,4,4)]Tf_2N对产紫青霉菌的生长有促进作用,[Py_(14)]Tf_2N,[Bmim]Tf_2N,[BPy]Tf_2N和[P_(6,4,4,4)]Tf_2N 4种离子液体对产紫青霉菌的生长则均有不同程度的抑制.代谢活力保留值R的测定结果表明,[P_(6,4,4,4)]Tf_2N和[N_(1,4,4,4)]Tf_2N对产紫青霉菌体细胞表现出相对较高的生物相容性;5种离子液体对菌体细胞的细胞膜透性均有改善作用.全细胞催化反应数据显示,最优离子液体为[P_(y14)]Tf_2N,当其加入量为25%,反应84 h后,单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)产率高达95.38%.5种离子液体对产紫青霉菌的生长、代谢、细胞膜透性及全细胞催化活性的影响不仅与阴离子Tf_2N^-有关,阳离子的组成、结构和性质也发挥重要的作用.
- 张馨李扬曹红欧阳巧凤郑兰兰李春
- 关键词：离子液体
- 基于酶反应动力学理论优化脂肪酶活力测定体系被引量：3
- 2023年
- 为了提高棕榈酸对硝基苯酯(p-NPP)法测定脂肪酶活力的灵敏度和准确度,以来源于Rhizopus oryzae的脂肪酶Lipase F-AP 15为研究对象,首先对其最适反应pH和反应温度进行优化,然后将表面活性剂作为激活因子引入酶活力测定体系,探究影响机制,并依据酶反应动力学理论优化测定条件(底物浓度、酶质量浓度、反应时间),对优化的p-NPP法的重复性和准确性进行了检验,最后以另一个来源的脂肪酶Lipase-PPL为模型,以同样思路与方法改进与优化其酶活力测定体系,以考察优化方法和思路的适用性。结果表明:表面活性剂PEG 8000的引入使得覆盖在脂肪酶活性位点的α-螺旋结构被重排而打开,脂肪酶由封闭构象转为并保持在活化构象,脂肪酶活性增强;优化测定体系的最适条件为pH 8.0、反应温度30℃、酶质量浓度1.00 mg/mL、底物浓度6 mmol/L、反应时间5 min,在此条件下测得的酶活力是常用p-NPP法(pH 8.0、反应温度30℃、酶质量浓度2.50 mg/mL、底物浓度10 mmol/L、反应时间8 min)测得酶活力的1.4倍;重复性和准确性试验显示,优化p-NPP法重复测定结果的相对标准偏差为1.21%,加标回收率为95.60%,均优于常用p-NPP法;优化方法和思路适用于其他来源的脂肪酶活力测定体系的优化。综上,通过将表面活性剂引入p-NPP法的脂肪酶活力测定体系,以酶反应动力学理论为指导优化测定条件,明显提高了方法的灵敏度,并有效保证了测定结果的重复性和准确性,缩短了检测时间,节省了检测成本。
- 张帆程路峰曹红何德飞郑兰兰李春
- 关键词：脂肪酶表面活性剂
- 龙脑樟树叶内生真菌的分离及生物活性菌株的筛选鉴定被引量：5
- 2019年
- 旨在从龙脑樟树叶片中分离内生真菌并对其发酵产物的体外抑菌、抗肿瘤和抗氧化活性进行测定,筛选鉴定具有较强生物活性的菌株。对分离出的内生真菌,用K-b纸片法测定其抑菌活性,MTT法测定抗肿瘤活性,紫外分光光度法测定其抗氧化活性,ITS(Internal transcribed spacer)序列测序分析确定活性菌株的种属。结果显示,共从龙脑樟树叶片中分离得到内生真菌39株,其中具有对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌较强抑制活性的菌株7株。又从7株真菌中筛选出具有较强抗肿瘤活性和抗氧化活性的菌株ZS14,其对人乳腺癌细胞MCF-7抑制率达到73.00%,对DPPH清除率70.92%,对羟自由基清除率78.83%,过氧化氢清除率81.36%,据ITS测序结果将其命名为Diaporthales sp. ZS14。分离得到的菌株Diaporthales sp. ZS14具有较强的抑菌、抗肿瘤、抗氧化活性,可以作为药物开发的潜在来源进行进一步研究。
- 金宏杰曹红刘红郑爽姜超
- 关键词：内生真菌抗肿瘤抗氧化
- 产紫青霉菌的发酵条件及色素稳定性、安全性的研究被引量：8
- 2016年
- 研究一株新型Penicillium purpurogenum Li-3菌产红色素的发酵条件及红色素稳定性,同时检测色素组分中是否含有真菌毒素—桔霉素,对红色素安全性进行评价。最优发酵条件下,采用两阶段控温方法,红色素产量达最大值(2.89 UA_(500nm))。色素稳定性实验结果表明,该红色素在温度<50℃条件下较为稳定,pH(1-10)和氧化剂H_2O_2对色素稳定性影响较小,自然光照对色素稳定性有一定影响。pH>10、还原剂Na_2SO_3和金属离子Ca^(2+)、Al^(3+)、Fe^(3+)对色素有增色效应。高效液相色谱检测结果显示,在P.purpurogenum Li-3红色素中未发现桔霉素。
- 张馨曹红李春牛玉静杨露
- 关键词：红色素发酵稳定性安全性
