四川省卫生厅科研基金(110484)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 相关作者：曹亚玲陈陵李学成黄茂涛黄一更多>>
- 相关机构：成都军区峨眉疗养院解放军324医院解放军452医院更多>>
- 发文基金：重庆市医学科研计划项目四川省卫生厅科研基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- hTERT启动子特异驱动IL-24重组腺病毒的包装及鉴定
- 2014年
- 目的包装并鉴定人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子特异驱动白介素-24(IL-24)的重组复制缺陷型腺病毒。方法全基因合成优化后的hTERT启动子,插入质粒pGL3-basic的多克隆位点(pGL3-phTERT);从人外周血单核细胞扩增IL-24,插入pGL3-phTERT质粒的hTERT启动子下游获得pGL3-phTERT-IL24;随后将phTERT-IL24插入pShuttle中间质粒,使用AdEasyTMAdenoviral Vector System包装Ad-phTERT-IL24重组腺病毒;同时包装CMV启动子驱动IL-24的腺病毒载体为阴性对照(Ad-CMV-IL24),以空载腺病毒Ad作为空白对照。用20 MOI重组腺病毒感染SGC-7901、MKN-45、HF细胞,采用PCR及Western blot检测IL-24在RNA及蛋白水平的表达。结果成功包装Ad-hTERT-IL24重组腺病毒。感染Ad-hTERT-IL24后,hTERT阳性肿瘤细胞内IL-24表达显著上调,但hTERT阴性的HF细胞则无IL-24表达;感染阴性对照Ad-CMV-IL24后,hTERT阳性或阴性细胞内均有IL-24表达,感染空白对照Ad后,hTERT阳性或阴性细胞内均无IL-24表达。结论 AdhTERT-IL24腺病毒载体可有效介导IL-24特异表达于hTERT阳性肿瘤细胞内。
- 邹利全曹亚玲黄茂涛宋航黄一李学成游斌陈陵
- 关键词：人端粒酶逆转录酶启动子
- 靶向肿瘤腺病毒介导IL-24抑制人胃癌细胞增殖被引量：1
- 2014年
- 目的探讨人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子特异驱动IL-24的重组腺病毒(Ad-phTERT-IL-24)对人胃癌SGC-7901细胞增殖及侵袭能力的影响。方法将Ad-phTERT-IL-24感染人胃癌SGC-7901细胞,采用荧光实时定量PCR及Western blot检测IL-24表达;采用CCK-8方法检测细胞生长曲线;采用Transwell小室侵袭实验检测细胞侵袭能力。结果与以PBS代替病毒液处理的SGC-7901细胞相比,感染Ad-phTERT-IL-24的SGC-7901细胞内IL-24表达明显升高(P<0.01),于第5、6 d吸光度明显下降(P<0.05),细胞侵袭能力亦显著降低(P<0.05)。结论 Ad-phTERT-IL-24可有效上调人胃癌SGC-7901细胞IL-24表达,进而抑制细胞增殖及侵袭能力。
- 曹亚玲黄茂涛黄一季代金冯早明李学成陈陵
- 关键词：端粒酶逆转录酶白细胞介素-24胃癌
