国家自然科学基金(81030023)
- 作品数：3 被引量：12H指数：1
- 相关作者：朱东亚罗春霞陈晨盛涛徐金东更多>>
- 相关机构：南京医科大学东南大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 神经元型一氧化氮合酶的神经生物学研究进展(英文)被引量：12
- 2011年
- 神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,nNOS)主要表达于神经元,在星形胶质细胞和神经干细胞中也有一定水平的表达。不同的mRNA拼接形式产生了nNOS蛋白的5种亚型,包括nNOS- 、nNOS- 、nNOS- 、nNOS- 和nNOS-2。nNOS单体不具催化活性,二聚体是其活性形式。nNOS单体发生二聚化需要四氢生物蝶呤、血红素以及L-精氨酸的结合。nNOS的表达在很大程度上依赖于cAMP反应元件结合蛋白的活化,其催化活性的调节与热休克蛋白90/ 热休克蛋白70、钙调节蛋白、PIN 蛋白,以及自身Ser847和Ser1412位点的磷酸化和脱磷酸化相关。能与nNOS相互作用的蛋白主要有9种,包括突触后密度蛋白95(post-synaptic density protein 95, PSD95)、CALM、CAMKIIA、DLG4、DLG2、PFK-M、CAPON、syntrophin和dynein轻链。其中 PSD95、CAPON和PFK-M是神经元中最重要的 nNOS 调节蛋白。PSD95与nNOS 的相互作用能介导突触形成,并参与N-甲基-D-天冬氨酸诱导的神经元死亡。此外,nNOS来源的一氧化氮还与多种神经病理状态早期突触丢失导致的认知、运动功能缺陷相关,并对生理病理的成年神经发生起负调控作用。
- 罗春霞朱东亚
- 关键词：神经元型一氧化氮合酶CAMP反应元件结合蛋白神经发生
- 一种活性缺陷型小鼠端粒酶催化亚基过表达慢病毒载体的构建及功能初步测定
- 2014年
- 目的：构建含活性缺陷型小鼠端粒酶催化亚基（去除氨基酸702-712的mTERT,命名为mTERTΔ）基因的慢病毒载体,检测其表达和功能。方法：从先前构建的表达mTERT全长的pDC315-EGFP-mTERT质粒中,通过缺失突变PCR扩增小鼠mTERTΔ基因,构建真核表达载体GV287-EGFP/mTERTΔ。鉴定正确后将目的基因克隆入慢病毒载体pGC-LV,得重组载体pGC-LV/mTERTΔ-EGFP,采用Lipofectamine2000将其转染293T细胞,包装慢病毒颗粒LV-mTERTΔ-EGFP后感染神经干细胞和原代神经元,TRAP-PCR方法检测端粒酶活性,荧光显微镜观察目的片段表达和细胞增殖情况。结果：成功构建TERTΔ基因片段,测序证明重组慢病毒载体pGC-LV/mTERTΔ-EGFP构建成功。包装慢病毒颗粒LV-mTERTΔ-EGFP可以感染神经干细胞和神经元,端粒酶活性测试证明目的蛋白的端粒酶催化活性缺陷,抑制神经干细胞增殖,抑制内源性mTERT功能。结论：慢病毒载体LV-mTERT-EGFP构建成功,可以表达无活性mTERT片段。
- 刘梦颖韩舟吴海银陈晨沈芯如周海辉周其冈朱东亚
- 关键词：端粒酶慢病毒EGFP
- 氧糖剥夺引起MF-CA3通路突触传递LTD现象及其机制研究
- 2015年
- 目的 ：观察氧糖剥夺引起的MF-CA3通路突触传递的长时程抑制（long-term depression,LTD）现象,并探讨其分子机制。方法：选择出生后2~3周的Sprague Dawley（SD）乳大鼠,制备海马脑片,通过刺激苔藓纤维,采用膜片钳的方法记录突触后电流。氧糖剥夺15 min后,观察突触传递的变化情况。分别采用犬尿喹啉酸阻断α-氨基羟甲基恶唑丙酸（α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazole-propionic acid,AMPA）受体、LY341495阻断代谢型谷氨酸受体﹑BAPTA螯合细胞内钙离子,观察对LTD的可能影响。结果：1氧糖剥夺15 min能引起MF-CA3通路AMPA受体介导的突触电流减弱,产生LTD现象;2若氧糖剥夺过程中运用阻断剂阻断AMPA受体的激活,洗脱后并不影响LTD的产生,而阻断代谢型谷氨酸受体可以使AMPA受体电流的LTD现象消失;3除去外液中的钙离子或用BAPTA螯合细胞内的钙离子均能使LTD现象消失。结论：氧糖剥夺引起MF-CA3通路上AMPA受体介导的突触电流持续减弱,呈现LTD现象。这种LTD现象依赖于代谢型谷氨酸受体的激活及胞内外钙离子浓度升高,但不依赖氧糖剥夺过程中AMPA受体的激活。
- 徐金东夏明媚盛涛朱东亚
- 关键词：氧糖剥夺AMPA受体代谢型谷氨酸受体钙离子
