山东省自然科学基金(Y2008C110)
- 作品数：5 被引量：16H指数：2
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- siRNA沉默Livin基因表达对肝癌细胞HepG2生物学行为的影响被引量：2
- 2012年
- 目的:研究应用siRNA沉默Livin基因表达后肝癌细胞HepG2的生物学功能变化。方法:用脂质体lipofectamineTM2000将携带Livin基因的siRNA载体转染至HepG2细胞内,RT-PCR、Westernblot检测转染前后Livin基因mRNA和蛋白质的表达改变;流式细胞技术(FCM)和TUNEL检测转染前后肝癌细胞凋亡变化。结果:RT-PCR及Western blot检测发现转染siRNA后Livin基因的mRNA和蛋白质表达均明显下降(P<0.05);FCM检测发现实验组、阴性对照组和空白组肝癌细胞HepG2在G1期所占比例分别是(58.99±1.173)%、(41.85±2.82)%、(41.25±1.24)%,实验组与其他两组比较差异均有统计学意义(P<0.05);TUNEL技术检测表明实验组肝癌细胞HepG2凋亡数目明显增加,细胞凋亡率为(67.56±2.56)%,凋亡率明显高于阴性对照组(27.21±12.58)%和空白组(14.09±5.16)%(P<0.05)。结论:在肝癌细胞HepG2中,Livin基因沉默具有诱导肝癌细胞凋亡、抑制肝癌细胞生长的作用。
- 翟允鹏徐威常宏李刚刘方峰秦成坤张振海
- 关键词：肝癌细胞HEPG2基因LIVIN
- 全胃多发类癌一例被引量：1
- 2014年
- 1 临床资料患者女，46岁。因进食后腹胀小适1年余，期间无腹痛、恶心、呕吐、反酸、暖气、呕血、黑便等症状，于当地乡镇卫生院就诊，行上消化道钡餐造影检查，诊断为慢性萎缩性胃炎，给予促胃肠动力、抑酸、保护胃黏膜等保守治疗后症状缓解。此后反复发作腹胀不适，为求进一步诊断与治疗患者于2012年8月28日来我院普通外科就诊。患者自述慢性萎缩性胃炎病史10余年、体格检查：胸部和腹部均无阳性体征。
- 徐威常宏翟允鹏
- 关键词：胃类癌全胃切除术
- 肝尾状叶肿瘤的手术治疗被引量：2
- 2013年
- 目前肝尾状叶切除术是治疗尾状叶肿瘤的主要方法。尾状叶因其解剖部位的特殊性,手术切除具有较大的风险。但随着肝脏解剖的深入、尾状叶手术切除方式和手术入路的不断探索,尾状叶切除已不再是肝脏外科手术的禁区。近几年来,国内外关于成功实施尾状叶切除治疗尾状叶肿瘤的报道逐渐增多,就肝尾状叶切除术作一综述。
- 李刚翟允鹏徐威常宏
- 关键词：肝肿瘤
- 联合转染Livin和Survivin shRNA表达载体对肝癌HepG2细胞生物学行为的影响被引量：11
- 2013年
- 目的:分别构建Livin、Survivin基因短发夹RNA(shRNA)真核表达载体,探究联合转染Livin和Survivin真核表达载体对肝癌HepG2细胞生物学行为的影响。方法:分别设计并构建针对Livin、Sur-vivin基因shRNA真核表达载体pSD11-Livin和pSD11-Survivin,脂质体法单独或联合转染肝癌HepG2细胞,分空白对照组、质粒对照组、Survivin组、Livin组和共转染组。荧光定量PCR、Western blot分别检测Livin、Survivin mRNA及蛋白的相对表达量,MTT法检测细胞增殖的变化,TUNEL法检测细胞凋亡率。结果:针对Livin、Survivin基因的shRNA真核表达载体构建成功。共转染组Livin、SurvivinmRNA相对表达量分别为0.120±0.022、0.325±0.125,与单独转染组相比显著降低(P<0.05);共转染组Livin、Survivin蛋白相对表达量分别为0.412±0.099、0.473±0.051,与单独转染组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。共转染组转染后48、60、72 h细胞生长抑制率均显著高于单独转染组(P<0.05),转染后48 h细胞凋亡率明显上升(P<0.05)。结论:针对Livin、Survivin基因的shRNA真核表达载体构建成功。联合转染pSD11-Livin和pSD11-Survivin更有效地降低了Livin和Survivin基因在HepG2细胞中的表达,更显著地抑制了肝癌细胞的增殖,促进了肝癌细胞的凋亡。
- 徐威常宏
- 关键词：LIVINSURVIVIN
- Livin shRNA真核表达载体构建及其对HepG2细胞化疗敏感性的影响
- 2013年
- 目的构建针对Livin基因的短发夹RNA(shRNA)真核表达载体,探讨其对肝肿瘤HepG2细胞化疗敏感性的影响。方法设计并构建针对Livin基因的shRNA真核表达载体pSD11-U6/Neo/GFP/Livin,脂质体法转染肝肿瘤HepG2细胞。荧光定量PCR、Western blotting检测细胞Livin mRNA和蛋白的相对表达水平。顺铂(2.0 mg/L)处理后,MTT法检测细胞生长抑制率。结果测序分析证实针对Livin基因的shRNA真核表达载体构建成功,转染肝肿瘤HepG2细胞后可降低Livin mRNA和蛋白的相对表达量(P<0.05),顺铂对转染Livin表达载体的HepG2细胞抑制率明显高于未转染细胞(P<0.05)。结论成功构建Livin shRNA真核表达载体,且有效抑制HepG2细胞中Livin基因的表达,增强肝肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。
- 徐威常宏翟云鹏
- 关键词：LIVIN基因
