国家科技重大专项(2008ZX10004-001)
- 作品数：25 被引量：125H指数：8
- 相关作者：吴移谋梁国栋王景林辛文文高兴更多>>
- 相关机构：中国疾病预防控制中心南华大学中国疾病预防控制中心传染病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项中美新发和再发传染病合作项目中国疾病预防控制中心青年科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 新发感染性细菌诊断方法研究进展被引量：1
- 2011年
- 目的近半个世纪以来,多种新发感染性细菌的发现严重威胁人类健康。传统方法对其鉴定主要依赖于传统的分离培养以及血清学诊断。近年来,人们采用分子学的方法,不仅可发现和认识新发感染性细菌,而且对危险以及难分离培养细菌,尤其在不能用常规实验方法进行及时诊断时,分子生物学方法可作为疾病防治与快速诊断的有益补充。
- 伍海英游晓星吴移谋
- 关键词：新发感染病
- 一种新发机会性感染致病病原——蠊缨滴虫被引量：9
- 2010年
- 据国外文献报告，蠊缨滴虫是一种寄生于白蚁、蟑螂（包括森林树木中的蟑螂）肠道的单细胞原虫。20世纪末，国内陆续有从人呼吸道检出蠊缨滴虫的报道，近年来该类病例报道明显增多。部分免疫功能低下感染蠊缨滴虫的患者常需呼吸机辅助呼吸，常用抗生素治疗无效，及时应用甲硝唑类抗生素治疗可使肺部感染得以控制。根据现有的报道我们认为蠊缨滴虫所致呼吸道感染可能是一种新发的、人们尚未完全认识的机会性感染寄生虫病。
- 卢潍媛常正山曹建平
- 关键词：超鞭毛虫蠊缨滴虫
- 应用不依赖序列的单引物扩增技术获得人博卡病毒全基因序列被引量：2
- 2010年
- 目的 研究通过不依赖序列的单引物扩增（Sequence independent single primeramplification,SISPA）技术获得腹泻标本中人博卡病毒的全基因序列.方法 筛检仅含有人博卡病毒的标本,经过滤、超速离心富集和核酸酶处理后提取病毒核酸,采用SISPA-PCR技术扩增病毒序列,克隆后测序,经比对分析获得人博卡病毒基因序列,再用DNAstar拼接成全基因序列.结果 获得了人博卡病毒4834bp的序列,仅两端少部分序列未得到.结论 SISPA-PCR技术是一种可直接从样品中获得病毒全基因序列的方法.
- 李金松程卫霞尧栋萍兰蓓虞结梅刘艳李永清章青靳淼徐子乾李丹地段招军
- 关键词：聚合酶链反应
- 鹦鹉热嗜衣原体禽鸟株的分离鉴定及小鼠呼吸道感染模型的建立被引量：5
- 2010年
- 【目的】优化鹦鹉热嗜衣原体(Chlamydophila psittaci,C.psittaci,Cps)禽鸟株分离培养技术,建立Cps呼吸道感染的小鼠模型。【方法】从禽鸟肝组织中抽提总DNA,PCR法体外扩增Cps ompA基因,初步鉴定Cps阳性标本;同时将阳性标本的肝组织匀浆液接种到HeLa和Vero细胞中培养,Giemsa和免疫荧光染色法鉴定衣原体包涵体。将临床株扩大培养后,用2×104、2×105、2×106 IFU三个剂量鼻内接种小鼠,分别于感染后5 d和10 d处死小鼠,显微镜观察受染小鼠各脏器病理变化。【结果】采用PCR扩增Cps ompA基因,从100只禽鸟标本中检测到阳性Cps标本6例(6%),并成功地在HeLa及Vero细胞中培养出3例,且Vero细胞内的衣原体包涵体体积大,结构致密,对衣原体感染引起的宿主细胞溶解耐受性较HeLa细胞强,更适合用于Cps的分离培养及体外研究。成功建立Cps的鼠呼吸道感染模型,105 IFU是建立Cps呼吸道感染小鼠模型的适宜菌量。【结论】优化了Cps禽鸟株的分离培养技术,成功建立了Cps呼吸道感染小鼠模型,为Cps流行病学调查及研究衣原体的致病性和致病机制奠定基础。
- 唐国芳陈丽丽刘良专李忠玉王绍胜徐磊吴移谋
- 关键词：动物模型
- 中国新疆维吾尔自治区不明原因发热人群中Tahyna病毒感染状况调查被引量：9
- 2011年
- 本研究通过对新疆地区不明原因发热人群血清Tahyna病毒抗体进行检测,以了解Tahyna病毒在当地的感染状况及分布特征。通过间接免疫荧光方法对新疆维吾尔自治区南部喀什地区、北部伊犁地区742例不明原因发热患者急性期血清标本进行Tahyna病毒抗体检测,并对IgM抗体阳性标本平行进行Tahyna病毒、Snowshoe hare病毒和Inkoo病毒三种抗原性相似的布尼亚病毒的蚀斑减少中和试验。研究结果显示新疆南部喀什地区采集不明原因发热患者急性期血清中,IgM抗体阳性率5.3%,IgG抗体阳性率18.3%;新疆北部伊犁地区采集的急性期患者血清标本中并未发现TAHV IgM抗体阳性;蚀斑减少中和试验结果显示,TAHV IgM抗体阳性患者血清中Tahyna病毒中和抗体滴度较其它两种布尼亚病毒中和抗体滴度升高明显。本研究证实新疆南部地区不明原因发热人群存在Tahyna病毒的急性感染和既往感染,为相关疾病的进一步监测提供基础。
- 吕志付士红王凤田Kosoy Olga LNasci Roger S梁国栋
- 关键词：虫媒病毒不明原因发热血清流行病学
- 鼠疫耶尔森菌基因组核糖体结合部位识别
- 2012年
- 目的通过统计分析鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)CO92株中核糖体结合位点(RBS)与翻译起始位点的距离,探索最适合翻译起始的RBS与起始位点的距离。方法通过对鼠疫菌所有拷贝的16SrRNA3′端,及已经通过实验确定的177处RBS进行分析,确定鼠疫菌RBS的序列特征。统计鼠疫菌CO92株中存在的所有RBS序列的位置和数量,及RBS序列与翻译起始序列ATG(GTG,TTG,CTG)的距离。观察已经公布的CO92株的编码序列(CDS)片段前20个碱基序列的特征。结果在CO92的全基因组序列中搜索,共发现可能的RBS结构5081个,2909个后面一段距离内存在开放读码框架,其中1541与标注的CDS相符,535与标注的CDS终止位点相同,但起始位点不同。CO92序列中的3887CDS前面20个碱基中,57.7%含有RBS序列。结论 RBS序列与起始位点间隔7个碱基和8个碱基出现的次数最多;RBS可能作为基因识别的重要指征。
- 王宇萌俞东征
- 关键词：翻译起始鼠疫耶尔森菌
- 新发感染病毒诊断方法研究进展被引量：1
- 2011年
- 近年在全球范围内已先后发现70多种新发病原体,以病毒居多,主要包括呼吸道感染病毒、出血热病毒、胃肠道感染病毒、肝炎病毒、逆转录病毒等。这些病毒病原体严重威胁人类健康并影响社会的稳定和发展。因此,新发感染病病毒的快速检测对病毒性疾病治疗和公共卫生监督显得非常重要。逐年发展的分子生物学方法不仅可发现和认识新发病毒,同时对难分离培养病毒,尤其是不能用常规实验方法进行及时诊断的病毒,分子生物学检测显得非常重要。本文就新发感染病病毒的生物学特征和检测方法,尤其是分子生物学方法进行了简要综述。
- 伍海英游晓星吴移谋
- 关键词：新发感染病分子生物学
- 肺炎嗜衣原体临床株的分离鉴定与小鼠接种的初步观察
- 2010年
- 目的从临床标本中分离培养肺炎嗜衣原体,接种小鼠后对其进行初步观察。方法采用细胞培养法从临床标本中分离培养肺炎嗜衣原体;结合吉姆萨染色、间接免疫荧光、16SrDNA序列同源性和系统发育分析对其进行鉴定;建立动物模型对其毒力进行初步研究。结果从临床标本中分离的菌株NH001和NH002被鉴定为肺炎嗜衣原体,攻击小鼠后均产生明显肺部病理改变。结论成功分离培养出两株毒力较强的肺炎嗜衣原体菌株,为肺炎嗜衣原体相关研究提供了优质菌源。
- 徐磊吴移谋刘良专周洲陈超群唐国芳赵飞骏
- 关键词：肺炎嗜衣原体组织切片
- 首次实验室证实北京平谷地区恙虫病东方体暴发流行被引量：16
- 2011年
- 目的了解北京市平谷地区是否存在恙虫病东方体感染。方法采用巢式聚合酶链反应(nPCR),对平谷地区采集的30份临床标本进行恙虫病东方体热休克蛋白(groEL)基因和56×103蛋白扩增并测序分析。采用间接免疫荧光试验(IFA)对血清标本恙虫病东方体特异抗体检测。结果采用PCR共检测血液标本30份,均阳性(100%);用IFA检测28份患者血清抗体,25份阳性(89.3%);长片段PCR扩增,3份标本扩增阳性,阳性结果测序比对所有核苷酸序列相同,与Kawasaki的同源性为96%。结论首次从分子流行病学和血清流行病学的角度证实北京平谷地区存在恙虫病东方体。
- 付秀萍刘玉英张宝华王景泉张景山贺金荣张守印
- 关键词：恙虫病巢式聚合酶链反应间接免疫荧光试验
- 单克隆抗体2A10在蛋白芯片技术检测黄病毒属病毒中的应用被引量：1
- 2010年
- 目的 本研究拟探讨1株黄病毒属特异的单克隆抗体2A10作为检测抗体在同时检测5种黄病毒属病毒的蛋白芯片中的应用价值.方法 将病毒的特异性单抗作为捕获抗体进行点样,制备用于检测5种黄病毒属病毒的抗体芯片,然后分别加入拟检测的病毒灭活抗原,捕获病毒颗粒后,加入荧光染料CY3标记的2A10检测抗体进行孵育,通过扫描并分析芯片上不同抗体的荧光强度,确定2A10检测抗体的效价和可检测的病毒滴度,并对2A10的检测效果进行评价.结果 蛋白芯片检测结果表明,2A10可作为检测抗体用于对5种黄病毒属病毒的检测,CY3标记的2A10效价为1∶160,以脾传脑炎（TBE）病毒为例,可检测的病毒滴度为1250 PFU.结论 单克隆抗体2A10作为一株黄病毒属特异的单抗,可以用于蛋白芯片技术检测黄病毒属病毒.
- 孙婷婷李裕昌刘洪康晓平林方祝庆余杨银辉鲁承
- 关键词：蛋白芯片高通量黄病毒属单克隆抗体
