云南省社会发展科技计划(2007CA007)
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 相关作者：李立刘静冉江华李铸李来邦更多>>
- 相关机构：昆明市第一人民医院更多>>
- 发文基金：云南省社会发展科技计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 原位肝脏移植术后远期胆道并发症的处理
- 2009年
- 目的探讨肝移植术后远期胆道并发症的防治措施。方法回顾性研究2006年5月～2008年9月我中心90例肝移植的临床资料。结果90例肝移植患者中12例发生远期胆道并发症（13．3％），其中胆漏1例，吻合口狭窄3例，非吻合口狭窄3例（其中ABO血型不合1例），活体肝移植术后胆肠吻合口狭窄1例，胆道结石4例。1例晚期胆漏患者充分引流后治愈。吻合口狭窄患者中，1例行PTCD球囊扩张术，2例行EB．CP球囊扩张术，共有2例放置了胆道内支架，介入治疗后恢复良好。非吻合口狭窄患者中，1例实施二次肝移植后治愈，另2例行PTCD联合胆道镜治疗，1例好转，1例死亡。活体肝移植术后胆肠吻合口狭窄者行经PTCD外引流后恢复良好。合并胆道结石患者中2例胆道结石经EST取出，1例泥沙样结石经ERCP胆道冲洗加溶石治疗后治愈，1例胆道铸型结石经EST治疗效果不佳。结论肝移植术后远期胆道并发症的处置，关键在于早期诊断，明确病因，及早采用ERCP、EST、PTCD及B超引导下穿刺置管引流等个性化治疗措施可取得积极效果。
- 李来邦李立冉江华李晓延曹海鹰张升宁李铸刘静陈刚罗春蓉董树强钟粤明
- 关键词：肝移植手术后并发症胆道外科手术
- 大鼠galectin-9基因重组腺病毒载体的构建和鉴定被引量：2
- 2011年
- 目的克隆大鼠galectin-9基因全长cDNA,构建含大鼠galectin-9基因的重组腺病毒载体,并予以鉴定。方法从大鼠的肝脏组织中用RT-PCR的方法克隆扩增大鼠galectin-9基因,再定向插入到带NotⅠ和HindⅢ酶切的pDC316-GFP穿梭质粒中,获得穿梭质粒pDC316-GFP-galectin-9。经PCR、NotⅠ和HindⅢ酶切及测序鉴定后,用脂质体将穿梭质粒pDC316-GFP-galectin-9与腺病毒骨架质粒pBHGlox△E1.3Cre共转染HEK-293细胞。经位点特异性重组获得含目的基因的重组腺病毒Ad5-galectin-9,行PCR鉴定,经HEK-293细胞扩增及纯化制备高滴度病毒液,用细胞培养方法测定病毒TCID50滴度。结果 PCR、酶切及测序证实穿梭质粒构建正确,PCR鉴定证实大鼠galectin-9基因重组腺病毒载体构建正确,病毒的感染滴度为1.4×109U/ml。结论成功构建了含大鼠galectin-9基因的重组腺病毒表达载体,为进一步研究大鼠galectin-9基因的功能奠定了基础。
- 李来邦李立冉江华赵永恒张升宁刘静李铸蒋益舟
- 关键词：GALECTIN-9基因克隆腺病毒载体RT-PCR
- 原位肝脏移植后胆道狭窄的病因分析与处理被引量：1
- 2009年
- 背景:肝脏移植后胆道狭窄是严重影响肝移植后患者生存和生活质量的重要因素。目的:探讨和分析肝移植后胆道狭窄的病因及处理。设计、时间及地点:回顾性病例分析,于2006-05/2008-09在昆明医学院附属昆明市第一人民医院及云南省器官移植研究所肝移植研究中心完成。对象:90例临床肝脏移植患者,男67例,女23例,年龄2～68岁。供肝选择:尸体供肝72例,活体供肝18例,供受者ABO血型不合2例。方法:经典式原位肝脏移植1例,其余均为改良背驮式原位肝脏移植。胆道重建术中6例采用胆总管或右/左肝管(活体肝移植)空肠吻合术,84例胆总管-胆总管端端吻合术,其中5例供受体胆管不匹配者放置T型管。吻合采用可吸收缝线或6-0Proline线,前、后壁连续缝合。术后应用他克莫司胶囊、霉酚酸酯及皮质激素组成的三联免疫抑制方案预防排斥反应,逐步转为他克莫司胶囊、皮质激素二联方案。主要观察指标:患者术后胆道狭窄发生情况及病情转归。结果:90例肝移植患者中有8例发生胆道狭窄并发症,其中吻合口狭窄5例,非吻合口狭窄3例。吻合口狭窄中有3例炎性水肿引起狭窄者经逆行经胰肝胆管造影球囊扩张或置入胆道支架治疗后痊愈。2例因吻合口胆漏瘢痕收缩导致狭窄者经逆行经胰肝胆管造影置入胆道塑料支架,1例狭窄消失,1例好转;3例非吻合口狭窄者均为弥漫性肝内胆管狭窄者,经逆行经胰肝胆管造影或经皮肝胆管造影采用球囊扩张和胆道支架置入治疗,效果不佳,2例行二次肝脏移植后获救,1例无效死亡。结论:吻合口狭窄和非吻合口狭窄两种病因在治疗方式及结果中存在差异,故肝移植术后胆道狭窄的的鉴别尤为重要。只要从术前、术中、术后多途径、多措施全方位进行联合预防,严密监护,及时发现和采取适当的治疗措施,将有效地预防和减少肝移植术后胆道狭窄的发�
- 李来邦李立冉江华李晓延曹海鹰张升宁赵永恒李铸刘静
- 关键词：肝脏移植术吻合口狭窄
- 大鼠半乳凝素9基因克隆及真核表达载体的构建
- 2009年
- 背景:研究提示,半乳凝素9在介导细胞分化、凋亡、黏附、细胞间聚集、炎症反应的调控方面发挥作用,但其作用机制尚不明确。目的:克隆大鼠半乳凝素9基因片段,构建pDC316-GFP-Galectin-9真核表达质粒,以进一步了解半乳凝素9各种功能和反应机制,设计、时间及地点:单一样本观察,于2008-11/2009-01在北京本元正阳基因技术有限公司完成。材料:SPF级雄性Lewis大鼠1只。方法:采用反转录聚合酶链反应技术,从大鼠肝脏组织中扩增出大鼠半乳凝素9基因片段,通过基因重组技术将该基因片段重组到pDC316-GFP真核表达载体上,构建pDC316-GFP-Galectin-9重组质粒,通过用PCR扩增、酶切电泳分析及DNA测序的方法对重组DNA进行鉴定。主要观察指标:重组质粒的鉴定结果。结果:总RNA经RT-PCR扩增后,经琼脂糖凝胶电泳,在1kb下方可见一条明显扩增的条带,与预计的半乳凝素9-cDNA长度相符。重组质粒经NotⅠ/HindⅢ双酶切和未作酶切的重组质粒pDC316-GFP-Galectin-9一起经琼脂糖凝胶电泳,前者出现了980bp和5.8kb2条带(980bp为Galectin-9-cDNA产物,5.8kb为pDC316-GFP线状质粒),后者出现6.7kb条带(重组质粒pDC316-GFP-Galectin-9),初步表明重组质粒构建成功。测序结果用NCBI上的BLAST进行比对分析,其核酸序列与GeneBank中的半乳凝素9的mRNA的编码序列(NM_012977)同源性完全相符,进一步证实所克隆的基因为大鼠半乳凝素9-cDNA。结论:成功克隆了半乳凝素9基因并构建成其真核表达质粒。
- 李来邦李立冉江华李晓延曹海鹰王谦张升宁赵永恒李铸刘静
- 关键词：基因克隆真核表达载体
