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B细胞恶性肿瘤患者血浆游离DNA中IgH基因重排检测及临床意义被引量：1: 2008年; 目的探讨检测B细胞肿瘤患者血浆DNA标本IgH基因重排对辅助诊断及判断预后的临床意义。方法采集83例B细胞急性淋巴细胞白血病（B-ALL）、B细胞非霍奇金淋巴瘤（B-NHL）及多发性骨髓瘤（MM）患者共110份血浆标本，提取血浆游离DNA，PCR检测IgH基因重排。结果63例初发B细胞肿瘤患者IgH基因重排检测阳性率为77．8％，而缓解病例的阳性率为27．6％，初发患者检测阳性率显著高于缓解病例（P〈0．01）。结缔组织病、感染性疾病及健康人均呈阴性结果。IgH基因重排检测阳性率与B-NHL和MM的分期、血清β2-微球蛋白（β2-Me）和乳酸脱氢酶（LDH）水平无关（P〉0．05）。追踪检测16例患者显示12例初发检测阳性者治疗缓解后转为阴性，其中3例缓解后6-9个月检测血浆IgH基因重排再次转为阳性，随后此3例患者均出现临床复发，检测转阳较临床复发提前1-4个月。1例在初诊和完全缓解期间检测均为阳性ALL患者，经异基因干细胞移植后转为阴性；3例检测始终阳性的患者疗效不佳，始终未获缓解。结论初治B细胞肿瘤患者血浆游离DNA中检测IgH基因重排阳性率高、特异性强、取材简便，有望用于B细胞肿瘤辅助诊断，追踪检测还有助于判断预后。; 李洁徐兵宋小燕陈国枢周淑芸; 关键词：B细胞血浆重链基因重排

改良国产试剂盒提取血浆DNA的方法被引量：5: 2008年; 目的建立一种高效、简便快速、成本低的提取血浆DNA的方法。方法对国产试剂盒提取血浆DNA的方法进行改良,并比较了4种方法提取的DNA的质量、所需时间及其费用。结果改良国产试剂盒提取血浆DNA的质量不仅能达到相关分子生物学实验的要求,而且与其他3种提取血浆DNA的方法相比,具有操作简单,耗时短,成本低等优点。结论改良国产试剂盒提取血浆DNA方法操作简单快捷、价格便宜,适合于大样本的血浆DNA提取。; 宋小燕徐兵李洁; 关键词：血浆 DNA提取

BIOMED-2引物系统检测急性淋巴细胞白血病患者免疫球蛋白基因重排被引量：2: 2009年; 目的探讨BIOMED-2引物系统检测成人急性淋巴细胞白血病（ALL）患者Ig基因重排的敏感性，分析Ig基因重排方式、各胚系基因的利用频率等。方法采用BIOMED-2引物系统扩增29例成人ALL患者Ig重链（IgH）和Ig轻链（IgL）重排基因。将PCR产物直接测序，使用IMGT／V-QUEST等生物信息资源分析B细胞-ALL（B—ALL）患者IgH和IgL基因重排类型、胚系基因片段利用及体细胞突变情况。结果24例B—ALL患者中IgH完全重排阳性率为70．8％，不完全重排为12．5％，IgK VH—JH重排为29．2％，IgK删失元件（IgK-Kde）重排为25．0％，未检测出IgL阳性重排。所有B—ALL患者Ig基因重排检出率可达100％。5例T细胞-ALL（T—ALL）患者1例检测到IgH不完全重排阳性，2例IgK VH—JH重排阳性，2例未检测出Ig基因重排。B—ALL中IgH重排优先利用的V、D、J家族分别为VH3和VH4、DH3和JH6。5例IgK重排中4例利用了VKI家族。重排基因中发生替代突变的基因占23．5％。替代突变零星散布于Ig基因全长，互补决定区中替代突变与静寂突变的比例〈1。结论BIOMED-2引物系统可以检测出绝大多数B—ALL患者的Ig基因重排，国内的临床检测资料亦然。这是一种有效的检测工具，为定量分析微小残留病（MRD）水平提供了基础资料。; 李洁徐兵宋小燕陈国枢周淑芸; 关键词：白血病免疫球蛋白基因重排

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广东省医学科学技术研究基金(A2005391)

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