国家杰出青年科学基金(39725027)
- 作品数：21 被引量：180H指数：8
- 相关作者：龚建平陶德定吴剑宏冯永东谢大兴更多>>
- 相关机构：华中科技大学福建省立医院武汉科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金卫生部临床学科重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 空、结肠黏膜细胞增殖过程中主要细胞周期蛋白表达规律的研究被引量：7
- 2005年
- 目的研究正常空、结肠黏膜细胞增殖过程中的人类主要细胞周期蛋白Cyclins表达特征和变化规律。方法应用细胞免疫组织化学流式细胞术检测30例正常空、结肠黏膜不同层面、不同增殖阶段细胞主要细胞周期蛋白CyclinD1、E、A、B1及Ki-67的表达,以共聚焦显微镜观察证实检测结果。结果不同增殖阶段肠黏膜细胞Cyclins表达阳性率及相对表达水平不同,从底部→中间层→表层肠黏膜细胞增殖活性(以Ki-67为增殖指标)呈下降趋势,Cyclins(CyclinE、B1为主)表达阳性率及水平呈高→低→无的变化,差异有统计学意义(P<0.01);Cyclins表达与肠黏膜细胞增殖活性呈正相关(P<0.05);CyclinD1、A仅表达于底层增殖细胞,表层完全分化细胞不表达Cy-clins。结论正常空、结肠黏膜细胞增殖分化过程中Cyclins(以CyclinE、B1为主)呈高→低→无的规律性变化,参与细胞增殖的调控,其表达呈衰减变化与肠黏膜细胞有限增殖和定向分化有关。
- 李伟华吴剑宏高纯钟以胜龚建平
- 关键词：细胞周期蛋白增殖过程CYCLINS细胞免疫组织化学结肠黏膜微镜观察
- 应用Sub-G1法和PA法分析HL-60细胞自发凋亡的周期特异性被引量：1
- 2002年
- 分别用Sub G1法和PA法对人类早幼粒细胞急性白血病细胞株 (HL 6 0 )的自发凋亡进行检测 ,发现HL 6 0细胞自发凋亡时 ,在DNA直方图上 ,G1峰前出现亚G1峰 (Sub G1峰 ) ,G1期细胞增加 ,S期和G2 /M期细胞减少。同时G1期细胞发生自发凋亡 ,而S期 ,G1期细胞少有凋亡发生。
- 王家顿谢大兴陈金明张天民龚建平
- 关键词：流式细胞术细胞周期HL-60细胞白血病肿瘤细胞
- 抗癌药物诱导Molt_4细胞凋亡的周期时相性分析被引量：16
- 2002年
- [目的]应用流式细胞术 (FCM)分析抗肿瘤药物诱导细胞凋亡的周期特异性。[方法]将喜树碱、紫外线和槐耳清膏诱导的Molt-4细胞分别用Sub_G1 法和PA法 (FITC_AnnexinⅤ和PI标记法 )检测细胞凋亡。[结果]Sub_G1法可简便地检测晚期凋亡细胞 ,PA法可检测早期凋亡细胞 ,并可较准确分析细胞凋亡的周期时相性。[结论]结合Sub_G1 法和PA法可简便、有效筛选出细胞周期特异性抗肿瘤药物 ,为抗癌新药的开发和研制提供技术平台。
- 王家顿谢大兴陈金明龚建平
- 关键词：抗癌药物MOLT-4流式细胞术
- 不同组织来源临床肿瘤主要细胞周期素表达类型的研究被引量：1
- 2007年
- 目的观察人类主要细胞周期素(Cyclin D1、E、A、B1)在临床肿瘤细胞中表达特征并进行分类,探讨其对临床肿瘤分类的可行性及潜在意义。方法用流式细胞术(FCM)双参数法半定量检测161例恶性肿瘤手术切除标本细胞中Cyclin D1、E、A、B1表达,根据不同Cyclin在细胞周期中的作用及其异常表达特征,将肿瘤细胞主要Cyclin表达分为不同类型。结果细胞周期外Cyclin(D1)及周期内Cyclins(E、A、B1)在临床肿瘤细胞中表达无组织差异性(P>0.05)。其异常表达大致可归为5种类型:Ⅰ型Cyclin(D1、E、A、B1)均高表达;Ⅱ型Cyclin D1低表达,Cyclin(E、A、B1)不同形式高表达;Ⅲ型Cyclin D1不表达,Cyclin(E、A、B1)不同形式高表达;Ⅳ型Cyclin D1不表达,Cyclin(E、A、B1)不同形式低表达;Ⅴ型Cydin(D1、E、A、B1)均不表达;再根据各型中不同周期内Cyclin的优势表达分为相应不同的亚型。a亚型:Cyclin(E、B1)表达为主;b亚型:Cyclin E表达为主;C亚型:Cyclin B1表达为主;d亚型:Cyclin(E、A、B1)表达为主。肿瘤细胞主要Cyclin表达类型及相应亚型分布无组织来源的差异性(P>0.05)。结论主要Cyclins表达类型可以作为不同组织来源肿瘤分类的依据,可能是体现不同肿瘤细胞周期破坏共同特征较为客观分类方法。
- 李伟华吴剑宏申曼里高纯钟以胜龚建平
- 关键词：肿瘤细胞周期细胞周期素流式细胞术
- 全反式维甲酸诱导HL60细胞分化的细胞周期时相性研究被引量：12
- 2004年
- 目的 探讨全反式维甲酸诱导分化的HL6 0细胞周期变化 ,进一步揭示细胞分化在细胞周期中的时相特异性。方法 以分化诱导剂全反式维甲酸 (终浓度为 10 μmol/L)影响下不同时间点的HL6 0细胞为检测对象 ,应用流式细胞术分析细胞的大小及细胞表面的分化标志 ;碘化丙啶 (PI)染色后用激光共聚焦显微镜观察细胞形态从而对已分化细胞进行确认 ;应用流式细胞术分析药物诱导的细胞周期变化 ,检测G1期的Ki6 7表达水平 ;再应用流式分选术结合激光共聚焦显微镜观察各期细胞形态。结果 ①随着药物诱导时间的延长 ,细胞的体积逐渐增大 ,被诱导的细胞出现髓系细胞表面的分化标志物CD11b。②全反式维甲酸导致HL6 0细胞周期的G0 /G1峰升高 ,S期水平下降。③随着药物诱导时间的延长 ,G1期的Ki6 7的表达水平逐渐下降。④只在G1期细胞中可见到已分化细胞。结论 全反式维甲酸可以诱导HL6 0细胞周期的G1早期→G1晚期阻滞 ,并诱导HL6 0沿着粒系方向分化 ,细胞分化完成于细胞周期中的G1早期。
- 许培权龚建平
- 关键词：全反式维甲酸HL60细胞细胞周期
- 膜联蛋白V与碘化丙啶用于细胞周期特异性凋亡的检测被引量：15
- 2002年
- 目的 建立一种新的细胞周期特异性凋亡检测方法。方法 将急性早幼粒细胞白血病细胞株 (HL 60 )分别经喜树碱 (CAM)、紫外线诱导 ,及喜树碱和N 甲苯磺酰基 L 苯基丙氨酸氯甲基酮(TPCK)共同诱导后 ,用异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白V(AnnexinV)进行标记 ,经 1 %不含甲醇的甲醛溶液冰浴固定 ,再用含洋地黄皂苷的碘化丙啶染色液染色后 ,流式细胞术分析凋亡细胞的周期特异性和细胞凋亡率 ,并与DNA链缺口标记法 (TdT)和常规AnnexinV法检测结果进行比较。结果 细胞凋亡的周期特异性分析 :膜联蛋白V/碘化丙啶法 (PA法 )和TdT法结果一致 ,CAM和紫外线诱导的细胞凋亡分别发生在S期和G1期 ;CAM和TPCK共同诱导试验显示 ,PA法对早期凋亡具有较高的检测灵敏度 ,TdT法则不能有效检测 ;而常规AnnexinV法无法进行凋亡细胞的周期特异性分析。细胞凋亡率的检测 :HL 60经CAM、紫外线、CAM与TPCK三种方法诱导后 ,PA法检测凋亡率的结果 (1 7 3 %、34 .7%、35 .9% )与常规AnnexinV法的检测结果 (1 8.1 %、35 .6 %、37.0 % )一致 (P >0 .0 5) ,而TdT法(1 0 .7%、1 9.5 %、- )则明显偏低 (P <0 .0 1 )。结论 PA法可以用于凋亡细胞周期特异性检测 ,其稳定、可靠。
- 陶德定冷彦覃吉超周晖申漫里余源龚建平
- 关键词：流式细胞术细胞周期膜联蛋白V碘化丙啶细胞凋亡
- 二甲基亚砜诱导HL-60细胞分化的评判
- 2007年
- 目的探讨一种可靠的肿瘤细胞分化模型,确立一套判定肿瘤细胞是否分化的简便、准确的方法。方法以分化诱导剂二甲基亚砜(dimethylsulphoxide,DMSO)影响下不同时间点的HL-60细胞为检测对象,应流式细胞术来分析细胞大小及细胞表面的分化标志物;经碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色后,用激光共聚焦显微镜观察对已分化细胞进行形态学确认。结果随着药物诱导时间的延长,被诱导的HL-60细胞体积逐渐增大;在48h后,被DMSO诱导细胞开始表达分化标志物CD11b并出现细胞核型的变化。结论DMSO能诱导HL-60细胞分化;应流式细胞术来分析细胞大小及细胞表面的分化标志物,再用激光共聚焦显微镜观察已分化细胞核的形态变化是判定肿瘤细胞分化的简便、准确的方法。
- 许培权龚建平
- 关键词：流式细胞仪分化激光共聚焦显微镜
- 人类非肿瘤性增殖中细胞周期蛋白的表达研究被引量：1
- 2003年
- 目的 研究具再生能力的非肿瘤组织中细胞周期蛋白 (cyclins)的表达 ,了解cyclins在两种不同性质的细胞增殖过程中的不同表现。方法 应用流式细胞术分别检测Molt 4细胞和分离自非肿瘤组织和肿瘤组织的混悬单细胞中cyclinD、E、A、B1的表达 ,并以Westernblotting证实检测结果。 结果 可再生的非肿瘤组织中无法检测到cy clins的表达 ,而在同种组织来源的肿瘤中 ,一种或多种cyclins呈阳性表达。 结论 在细胞由良性增生转变为恶性增生的过程中 。
- 申漫里何小军覃吉超龚建平
- 关键词：细胞周期蛋白细胞增殖流式细胞术
- 喜树碱、胺苯吖啶、长春花碱对淋巴细胞性和髓样白血病细胞周期的影响被引量：4
- 2002年
- 目的 比较 3种不同的抗肿瘤药物 (喜树碱、胺苯吖啶、长春花碱 )对培养的淋巴细胞性 (Molt 4)或髓样白血病细胞 (HL 60 )的细胞周期的影响。方法 在体外用喜树碱、胺苯吖啶或长春花碱处理诱导HL 60或Molt 4细胞 3、6、9h后收获 ,75 %的冷乙醇固定 2 4h以上。用溴化丙啶对细胞核DNA染色 ,FACSort流式细胞仪分析细胞周期并依据Sub G1法计算G1、S、G2 /M期细胞或凋亡细胞的百分率。结果 喜树碱能选择性地诱导HL 60细胞的S和G2 /M期细胞凋亡 ,总凋亡率可达 41.2 7% ;胺苯吖啶仅能使部分Molt 4细胞阻滞于G2 /M期 ,阻滞率为 9.2 4% ;长春花碱使Molt 4细胞阻滞于G2 /M期阻滞率为 11.3 0 %。结论 HL 60细胞对喜树碱的细胞毒作用异常的敏感 ,易于发生凋亡 ;胺苯吖啶诱导Molt 4细胞阻滞于G2 /M期 ;长春花碱诱导Molt 4细胞阻滞于有丝分裂前期。
- 陈义发龚建平吴在德裘法祖
- 关键词：喜树碱胺苯吖啶长春花碱细胞周期抗肿瘤药物
- 全反式维甲酸对HL-60细胞分化和凋亡的影响被引量：30
- 2004年
- 背景与目的:用全反式维甲酸(alltransretinoidacid,ATRA)治疗早幼粒细胞性白血病(premyeloidleukemia,M3)在肿瘤治疗史上是一个重要里程碑。已有研究表明,ATRA治疗白血病的机理是诱导白血病细胞向成熟细胞方向分化,然而人们对分化的肿瘤细胞最终去向还不完全清楚。本实验进一步探讨ATRA诱导HL-60细胞分化和凋亡的关系。方法:以分化诱导剂ATRA(终浓度为10μmol/L)作用不同时间的HL-60细胞为检测对象,应用流式细胞仪分析细胞表面的分化标志物及细胞周期;经碘化丙啶(propidiumiodide,PI)染色后,激光共聚焦显微镜下对已分化细胞进行形态学确认;应用流式细胞仪检测药物诱导后不同时间点的细胞凋亡。结果:(1)随着药物诱导时间的延长,被诱导的HL-60细胞体积逐渐增大,在72h后,被诱导细胞开始表达分化标志物CD11b并出现细胞核型的变化;(2)在药物诱导96h后,细胞开始出现了凋亡峰,而在药物诱导72h后脱药培养8h,则可以出现高于96h的凋亡峰。结论:ATRA并不能诱导HL-60细胞完成终端分化,但是该药可以诱导白血病细胞向成熟方向分化,而且已分化的肿瘤细胞于发生凋亡。
- 许培权龚建平
- 关键词：白血病HL-60细胞细胞分化全反式维甲酸
