北京市自然科学基金(5102010)
- 作品数：3 被引量：20H指数：2
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- 远志皂苷元促进人神经干细胞体外增生和分化的研究被引量：11
- 2013年
- 目的研究远志皂苷元对体外培养的人神经干细胞增生和分化的影响及其可能的机制。方法对体外培养的人神经干细胞系进行细胞鉴定;在培养液中分别加入50μmol/L和5μmol/L的远志皂苷元,同时设置空白对照组,用CCK8试剂在酶标仪上进行细胞吸光度测试用以检测细胞活力;利用实时荧光定量RT-PCR方法分别检测50μmol/L和5μmol/L的远志皂苷元对神经干细胞负性分化调节基因Hes1和正性分化调节基因Mash1的mRNA表达影响;免疫荧光染色标记法标记分化后的神经元细胞和星形胶质细胞的比例。结果与空白对照组比较,50μmol/L远志皂苷元可显著性增加神经干细胞数目(P<0.05),上调Hes1基因表达(P<0.05);5μmol/L远志皂苷元也可增加神经干细胞数目,同时上调了Hes1和Mash1基因表达(P<0.05);5μmol/L远志皂苷元可以促进神经干细胞分化,提高神经元分化的比例(P<0.05)。结论远志皂苷元可以促进体外培养的神经干细胞增生和分化,这种促增生和分化的作用可能是通过上调Hes1和Mash1基因表达实现的。
- 师昉梁志刚梁志刚汪璇汪璇
- 关键词：远志皂苷元神经干细胞增生分化
- 人乳牙牙髓干细胞体外表达和分泌胶质细胞源性神经营养因子的研究被引量：8
- 2011年
- 目的研究人乳牙牙髓干细胞(SHED)表达和分泌胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)的能力及规律,为进一步探讨SHED治疗帕金森病的作用机制提供依据。方法通过酶消化法体外分离培养人乳牙牙髓中的干细胞,当传代至第3代时,加入神经干细胞的特殊培养基Neurobasal A和细胞因子进行神经球诱导培养,通过Real-Time PCR、免疫荧光和ELISA等方法,分别从mRNA和蛋白水平检测体外培养SHED和神经球中GDNF的表达。结果 Real-Time PCR检测结果显示,在mRNA水平,SHED和神经球中都有GDNF的表达。在蛋白水平,免疫荧光结果可见SHED和神经球中都有GDNF的表达;采用ELISA法在培养第3天的SHED培养液和神经球的培养上清中均可检测到GDNF,并随着时间的延长,培养液中GDNF浓度明显升高。结论 SHED具有表达和分泌GDNF的能力。
- 王劲松汪璇王松灵
- 关键词：神经球胶质细胞源性神经营养因子
- 抑制低氧诱导因子-1α对PC12细胞存活的影响被引量：1
- 2012年
- 目的通过抑制低氧诱导因子-1α转录活性,研究低氧诱导因子-1α在低氧诱导的细胞死亡中的作用。方法①将PC12细胞接种于12孔板,在20%常氧和3%低氧环境中培养24 h,在光镜下拍照并应用计数方法记录PC12细胞的生长情况。②将PC12细胞接种于96孔板,在常氧和低氧环境中培养24 h后,用细胞活力检测剂(a novel tetrazolium compound,3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium inner salt,MTS)检测PC12细胞的生长情况。③在常氧和低氧条件下分别用5 nmol/L、50 nmol/L、500 nmol/L的低氧诱导因子-1α抑制剂棘霉素处理PC12细胞24 h和48 h后,用MTS法检测细胞活力。结果①细胞计数和MTS法检测细胞活力的结果均显示3%的低氧条件可明显诱导PC12细胞死亡。②不同浓度的低氧诱导因子-1α抑制剂棘霉素处理PC12细胞24 h之后,低氧和常氧的细胞活力没有显著区别。③不同浓度的低氧诱导因子-1α抑制剂棘霉素处理PC12细胞48 h之后,低氧不再促进细胞死亡,相反,低氧条件处理的细胞活力明显好于常氧。结论低氧会促使PC12细胞死亡,棘霉素抑制HIF-1α的转录活性24 h后,低氧对PC12细胞的促死亡作用减弱;48 h后,低氧组的细胞活力还可超过常氧组。这表明,低氧下过量的HIF-1α转录激活对细胞是有害的。
- 李冉王勇宫晓丽范明王晓民朱玲玲汪璇
- 关键词：低氧低氧诱导因子1ΑPC12细胞
