国家科技重大专项(2009ZX08004-004B)
- 作品数：12 被引量：76H指数：5
- 相关作者：李喜焕张彩英常文锁刘渊刘翠更多>>
- 相关机构：河北农业大学教育部河北科技师范学院更多>>
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- 磷胁迫下大豆酸性磷酸酶活性变化及磷效率基因型差异分析被引量：15
- 2012年
- 在3种磷水平处理后,对23个大豆品种的叶片和根尖酸性磷酸酶活性、根冠比、干物质量、全磷含量及磷效率进行测定、比较和分析。结果表明,叶片或根尖酸性磷酸酶活性、叶片或根尖酸性磷酸酶活性相对值、根冠比,磷效率、磷效率相对值之间具有极显著差异(P
- 刘渊李喜焕孙星张彩英
- 关键词：低磷酸性磷酸酶活性磷效率耐低磷
- 中国大豆磷素营养及磷高效品种筛选最新进展被引量：15
- 2011年
- 磷是影响植物新陈代谢和生长发育的重要元素,但由于其极易被土壤固定,因而有效性非常低。缺磷已成为限制当前农作物产量提高和品质改良主要因素之一,传统农业生产一般通过施肥和土壤改良来提高植物对磷素的利用率。近年来,有学者提出通过发掘和利用磷高效品种来解决植物需磷和土壤供磷矛盾的新途径。文章综述了中国土壤磷素营养及其遗传改良的必要性,并针对目前大豆磷素营养的现状,整理了中国开展磷高效育种以来获得的所有高效及低效大豆材料,为进一步克隆磷代谢相关基因、解析磷高效生理及分子机制、选育磷高效新品种提供依据。
- 李喜焕常文锁张彩英
- 关键词：大豆品种资源
- 大豆MYB转录因子GmPHR1转化及功能研究被引量：4
- 2013年
- 在克隆获得MYB转录因子GmPHR1基础上,构建基因超表达载体,采用农杆菌介导子叶节转化技术将其转入冀豆12,获得GmPHR1高效表达转基因新材料,并分析基因在耐低磷和低磷敏感品种中的表达差异。结果表明:成功构建了目的基因超表达载体pBI121-GmPHR1,获得了经PCR验证为阳性的T4转基因新材料;荧光实时定量PCR检测发现,其中4个株系的GmPHR1表达量达到野生型对照的2倍以上,说明GmPHR1能够在转基因新材料中高效表达;进一步分析低磷胁迫下不同耐低磷特性品种的基因表达量,发现GmPHR1在耐低磷品种中呈现快速诱导、持续表达与高表达量的模式,而在低磷敏感品种中则表现缓慢诱导、迅速下降和低表达量的模式。
- 吴冰李喜焕刘翠王运杰李文龙常文锁张彩英
- 关键词：大豆MYB转录因子农杆菌转化
- 提高植物磷营养效率(候选)基因研究进展被引量：14
- 2012年
- 低磷限制植物产量提高和品质改良是全球亟待解决的土壤养分问题之一,利用现代转基因技术结合常规育种手段培育磷高效新品种是解决这一问题的有效途径。目前,已有百余个磷营养效率候选基因被克隆,但真正用于植物转基因育种实践的却寥寥无几,且进展缓慢。究其原因可能是由于现有候选基因种类繁杂且未系统分类,有些基因的功能尚未明确,缺少克隆与育种交流平台等问题。鉴于此,本文将目前已克隆的植物磷营养效率候选基因按照其功能不同进行分析,对基因的生物学功能及其潜在应用价值进行归纳总结。这不仅为分子生物学家选择目标基因,解析植物磷高效分子机制提供参考,同时为育种学家进行基因转化,培育磷高效新品种搭建平台。
- 李喜焕常文锁张彩英
- 关键词：低磷胁迫候选基因转基因育种
- 植酸酶基因phyA转化大豆品种研究被引量：3
- 2011年
- 土壤磷多以有机态形式存在,而植酸磷占一半以上,分解利用植酸态磷是提高土壤磷利用效率、改善植物磷素营养的新途径。利用大豆农杆菌介导子叶节转化与花粉管通道转化技术,将含有根特异启动子pyk10、信号肽S和植酸酶phyA的嵌和基因(KSA)转入冀豆12、冀豆16、五星1号和吉林35中。经PCR检测,共获得T0阳性植株114个,T1阳性植株101个,T2阳性材料28个。通过将T4代转基因株系和野生型对照在仅含植酸磷的营养液中进行培养发现,转基因植株在植酸磷条件下生长状况优于对照,并且3个转基因株系根系分泌型植酸酶活性分别比野生型提高5%、13%和24%。
- 闫瑞叶李喜焕李桂兰常文锁张彩英
- 关键词：大豆植酸酶基因农杆菌介导
- 转录因子GmPTF1表达载体构建及转化大豆研究被引量：4
- 2011年
- 在克隆获得磷高效相关转录因子基因GmPTF1的基础上,构建基因的超表达载体pGN-GmPTF1和无标记(Marker-free)表达载体pX6-GmPTF1;利用农杆菌介导子叶节与花粉管通道转化技术,将表达载体pGN-GmPTF1和pX6-GmPTF1分别转入冀豆12、冀豆16和五星1号大豆品种。转化后的大豆植株经PCR检测,有11株转化植株可扩增出目的条带,其中5株转有pGN-GmPTF1载体和6株转有pX6-GmPTF1载体,表明GmPTF1转录因子基因已初步整合至大豆基因组中。
- 郑醒张彩英常文锁李喜焕
- 关键词：大豆转录因子
- 大豆紫色酸性磷酸酶GmPAP14克隆与生物信息学分析被引量：9
- 2012年
- 采用RT-PCR技术克隆大豆紫色酸性磷酸酶(Purple acid phosphatase,PAP)基因,并对基因及其编码蛋白进行生物信息学分析,为植物磷高效转基因育种及分子机制解析提供候选基因。结果表明:从低磷处理14d的‘中黄15’cDNA中克隆获得一条开放阅读框1 395bp的基因,经保守域分析发现该基因属于紫色酸性磷酸酶类,命名为GmPAP14(GenBank No.JN967626)。对基因编码蛋白进行生物信息学分析发现,GmPAP14编码1条含有464个氨基酸残基的多肽链,分子量约53.1kD,理论等电点6.14,且含有紫色酸性磷酸酶所特有的5个保守基序和7个金属离子结合位点。进一步分析发现GmPAP14具有跨膜结构与信号肽,定位于质膜或分泌到胞外。经系统发育树分析显示GmPAP14与苜蓿MtPAP1及大豆GmPAP1具有同源性,预测可能与植物磷素高效吸收利用有关。
- 孔佑宾宁英达刘渊李喜焕常文锁张彩英
- 关键词：低磷胁迫大豆生物信息学
- 杂交转育植酸酶phyA大豆阳性材料筛选研究被引量：2
- 2013年
- 植酸及其盐类占土壤非有效态磷30%～40%,利用转基因技术结合常规育种手段培育能够分解利用植酸磷的作物新品种是解决这一问题的最新途径。本研究以农杆菌转化子叶节所获得的JL35-phyA为试材,采用PCR与RT-PCR进行目的基因检测,获得转基因阳性材料;随后将这些阳性材料与38个常规大豆杂交,实现phyA向不同大豆品种的转育。结果表明,利用农杆菌转化技术已将phyA转入吉林35,且基因在大豆根系能够正常转录表达,转基因株系的单株荚数、粒数、粒重及百粒重显著高于野生型,蛋白质和脂肪含量与野生型差异不显著;利用这些转基因株系,通过杂交转育获得F1阳性单株427个,涉及上述38个不同组合,说明目标基因phyA已转移到杂交后代;将F1阳性单株自交后筛选得到部分组合的阳性F2植株及F3子粒,经农艺性状考察,这些后代材料中存在丰富的遗传变异,并在杂交后代中选育出一些转有目标基因的优良株系,为今后培育转phyA大豆新品种(系)提供了一批重要的遗传资源。
- 李喜焕刘渊闫瑞叶孔佑宾李桂兰常文锁张彩英
- 关键词：植酸酶基因农杆菌转化大豆杂交转育遗传资源
- MYB转录因子AtPHR1转化大豆研究被引量：1
- 2013年
- 以MYB转录因子AtPHR1表达载体为转化对象,采用农杆菌介导子叶节转化技术将其转入栽培大豆,研究不同萌发时间、预培养时间、菌液和侵染液浓度、大豆基因型以及筛选剂浓度对转化效率的影响。结果表明:以萌发5 d大豆幼苗制备子叶节外植体,预培养1 d,农杆菌菌液OD600为0.7,侵染液OD600为0.5或0.7进行转化,100 mg·L-1卡那霉素进行筛选的抗性芽诱导率最高;5个供试品种中,以五星2号的转化率最高,约为2.0%;经PCR检测转化后的大豆植株,获得了含有转录因子AtPHR1的5个大豆新材料。
- 赵莉莉李喜焕李文龙常文锁张彩英
- 关键词：MYB转录因子农杆菌介导大豆
- 大豆苹果酸脱氢酶基因的电子克隆与生物信息学分析被引量：4
- 2012年
- 利用电子克隆技术获得大豆中的苹果酸脱氢酶基因cDNA序列,并对基因及其编码蛋白进行生物信息学分析和预测,为进一步克隆该基因、解决植物磷高效基因数量缺乏等问题提供依据。结果表明,大豆中的苹果酸脱氢酶基因(GmMDH1)cDNA序列长度为1 574 bp,开放阅读框1 230 bp,编码409个氨基酸残基;编码蛋白含有NAD bindingsite,Dimerization interface,Substrate binding site,MDH_glyoxysomal_mitochondrial结合位点和保守域,属于LDH_MDH_like Superfamily家族;亚细胞定位分析显示,编码蛋白位于植物细胞的叶绿体中。
- 李文爽刘渊常文锁刘梦星李喜焕
- 关键词：大豆苹果酸脱氢酶电子克隆
