国家自然科学基金(31101555)
- 作品数：4 被引量：26H指数：3
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- Dissecting the function of ib-miR2111 and its targets in sweetpotato
- 【Introduction】Compared with white-fleshed sweetpotato(WFSP), purple-fleshed sweetpotato(PFSP) is a desirable r...
- 刘霞宇Ruimin TangShifang LiuJie ZhangLiheng HeRunzhi LiXiaoyun Jia
- 关键词：SWEETPOTATO
- 文献传递
- 拟南芥At-pri-miR828基因的克隆及其对番茄的遗传转化被引量：6
- 2013年
- MicroRNA828(miRNA828)是一种新近发现的生物学功能还未全面研究的miRNA。为从不同角度阐明miRNA828的生物学功能,从拟南芥中克隆到At-pri-miR828基因并构建了该基因过量表达的植物表达载体pC2300-pOT2-At-pri-miR828,通过农杆菌介导的叶盘法将pC2300-pOT2-At-pri-miR828导入异源植物番茄品种‘Ailsa Craig’中。PCR鉴定结果显示,外源基因At-pri-miR828已成功整合到转基因番茄基因组中,共获得9个转基因株系,67株转基因植株。定量PCR检测结果显示,与野生型番茄植株相比,转基因植株中miR828的表达量显著增加,而生物信息学所预测的miR828靶基因Sly-myb-like1的表达水平则相应降低。花青素含量测定结果显示,miR828过量表达的转基因番茄植株花青素含量明显低于野生型植株,表明miR828参与了番茄花青素的生物合成调控。
- 贾小云于治芹梁建萍唐贵良金雷皓张莉贺立恒李润植
- 关键词：番茄实时定量PCR
- Multiple miRNAs mediate the regulation of anthocyanin biosynthesis in tomato
- MicroRNAs(miRNAs)are endogenous 21-24 nucleotide single-stranded RNAs and play important roles in gene express...
- 贾小云Jianping LiangLi ZhangLiheng He李润植
- 关键词：ANTHOCYANINTOMATO
- 文献传递
- MicroRNA828负调控缺磷胁迫诱导的番茄花青素生物合成被引量：12
- 2015年
- 【目的】深入解析番茄mi R828的生物学功能,特别是参与番茄缺磷胁迫响应和花青素生物合成的调控作用。【方法】分别利用ps RNATarget和RLM-5′RACE预测和验证mi R828在番茄中的靶基因。用Meg Align和MEGA5对番茄Sl MYB7-like与部分R2R3 MYB转录因子氨基酸序列进行了多重比对和进化树分析。用q RT-PCR分析mi R828及其靶基因Sl Myb7-like在AC、Micro Tom和LA1996 3个不同番茄种质中的表达和mi R828在番茄(AC)中的组织特异性表达模式。以mi R828过表达转基因番茄和野生番茄为材料,设置正常供磷(+Pi,MS+KH2PO4 3.4 g·L-1)和缺磷(-Pi,MS+KCl 1.86 g·L-1)2个处理的培养试验。用q RT-PCR分析mi R828及其靶基因在缺磷胁迫下的表达模式。将野生型和mi R828过表达的转基因番茄植株缺磷培养15 d后,观察番茄植株地上部分和地下部分的表型差异,通过q RT-PCR分析mi R828、mi R828的靶基因Sl Myb7-like(SGN-U320618)和花青素合成相关酶基因(PAL、CHS、DFR、ANS、3GT和F3′H)的表达模式,应用分光光度计测量各样品的花青素含量。【结果】RLM-5′RACE剪切试验表明mi R828对靶基因Sl Myb7-like存在剪切调控作用,且剪切作用位点位于成熟mi R828的第10位和第11位核苷酸之间,从而验证了Sl Myb7-like是mi R828直接作用的靶基因。氨基酸序列多重比对及进化树分析显示番茄Sl MYB7-like与拟南芥At MYB7和金鱼草MYB330的序列相似性最高。Sl MYB7-like含有与花青素合成相关的保守氨基酸基序。mi R828在Micro Tom幼苗中的表达最高,在LA1996中的表达最低。相反,mi R828靶基因Sl Myb7-like在LA1996中的表达水平最高,在Micro Tom中的表达水平最低。q RT-PCR分析显示Sl Myb7-like的表达模式与mi R828相反,证明Sl Myb7-like被mi R828调控。正常供磷条件下,野生型番茄各组织中mi R828的表达量普遍较低,但在花芽、花和绿果中相对较高;mi R828过表达转基因番茄植株中各花青素合成相关基因�
- 贾小云刘慧沈洁李芳丁娜孙岩高昌勇李润植
- 关键词：番茄缺磷胁迫花青素
- 番茄遗传转化与筛选鉴定的改进研究被引量：1
- 2018年
- 将At-pri-miR828基因的过表达载体pC2300-pOT2-At-pri-miR828通过农杆菌侵染法转入番茄(Solanum lycopersicum L.)品种‘Ailsa Craig’为例,来对番茄的遗传转化过程中番茄种子消毒处理、无菌苗培养、转基因阳性植株的Kan筛选浓度、PCR检测等方法进行研究,旨在探索一套快速高效的番茄遗传转化及鉴定方法。研究发现:采用C_2H_5OH、Na_3PO_3及NaClO分别浸泡及无菌水反复冲洗的种子消毒方法,可使污染率减少到5%以下;种子震荡培养法可以提高发芽率并促进种苗的生长势一致;筛选转基因阳性植株的Kan最佳质量浓度为100mg·L^(-1);100mg·L^(-1)的Kan溶液浇灌蛭石和在MS培养基中添加Kan的方法都可以用来筛选转基因番茄。最终Kan筛选和PCR检测等鉴定方法显示番茄的遗传转化效率为32.5%。
- 祁春芳王婷刘霞宇石晓雯于治芹刘世芳梁建萍贾小云
- 关键词：番茄种子消毒
- 银杏MYB转录因子的鉴定及特征分析被引量：7
- 2017年
- [目的]MYB蛋白是真核生物中一类重要的转录因子,在植物形态建成、生长发育、初生和次级代谢产物合成等生命过程中起重要调控作用。银杏作为植物中的"活化石",其提取物中含有的活性成分次生代谢物类黄酮等对人体有益。在类黄酮的生物合成中,MYB转录因子扮演着重要角色。本研究从转录组水平详细鉴定和分析了银杏GbMYB转录因子,为今后GbMYB的功能研究奠定基础,也为其他物种MYB转录因子的分析提供方法。[方法]本文首先利用BlASTp和PlantTFbcat等生物信息学工具对银杏的MYB蛋白序列进行筛选和鉴定;其次运用MEME和MEGA 7.0软件分别对GbMYB蛋白进行基序和系统进化分析;最后使用MeV对GbMYB在银杏各组织中的表达水平进行聚类分析。[结果]从41151个银杏蛋白中共鉴定出60个MYB转录因子,根据MYB保守域的特点将其分为R1-MYB、R2R3-MYB和R1R2R3-MYB三大类。系统进化树分析发现60个GbMYB可分为16个亚家族且具有相似功能的蛋白序列通常聚在一个家族。在银杏GbMYB蛋白中共检测到21种不同的保守基序。表达谱数据分析表明,一些GbMYB基因的表达具有组织特异性。[结论]本研究利用生物信息学方法,在银杏转录组水平上共鉴定出参与调控银杏各个组织发育的60个GbMYB转录因子;结合拟南芥AtMYB家族分类法将GbMYB分为16个亚家族;保守基序分析显示GbMYB在功能上具有多样性。研究结果为全面解析银杏MYB基因结构与生物学功能提供了新信息,也为进一步研究银杏GbMYB转录因子在次生代谢产物中的调控功能奠定了基础。
- 石晓雯孙岩丁娜孙惠英王婷贾小云李润植
- 关键词：MYB转录因子银杏类黄酮转录组
