公共文化服务平台

共 6 条记录，以下是 1-6

全选清除导出

排序方式：

日本血吸虫p50亲免素基因的扩增及其免疫学特性: 2006年; 目的扩增日本血吸虫(Sj)p50亲免素(IP)基因全长cDNA和DNA序列,进行原核克隆和研究其免疫学特性。方法从Sj成虫RNA中RT-PCR扩增Sjp50亲免素基因完整的编码阅读框,从Sj成虫基因组中扩增其DNA序列,对其cDNA序列和DNA序列进行比较分析,寻找内含子。将其cDNA序列克隆入pET30a(+)体中,原核表达并纯化表达产物,Western-blot比较重组蛋白与Sj体内相应天然蛋白的免疫原性和免疫反应性,间接免疫荧光法对p50亲免素进行组织定位。结果Sjp50IP基因DNA序列与cDNA相比,有6个内含子;重组p50IP与Sj体内的天然蛋白具有相同的免疫学特性,该蛋白位于Sj成虫的被膜上。结论成功扩增得到了Sjp50IP基因的全长编码区的cDNA序列和DNA序列,其DNA序列中有6个内含子;重组Sjp50IP的免疫学特性支持将该基因作为疫苗进行进一步的研究。; 李孜余新炳吴忠道徐劲胡旭初; 关键词：日本血吸虫中国大陆株免疫学特性

恶性疟原虫FCC1/HN株EBA-175基因克隆及序列分析: 2001年; 目的　将恶性疟原虫 FCC1/ HN株 175 ku的红细胞结合抗原 (EBA- 175 )基因克隆入测序载体 ,测定其序列 ,为以后研究其结构与功能奠定基础。　方法　利用 PCR扩增技术 ,分两个片段从恶性疟原虫 FCC1/ HN株基因组 DNA中 ,特异扩增 EBA- 175全基因编码序列。扩增产物经纯化回收后 ,T- A克隆入测序载体 p MD18- T,转化大肠杆菌 (E.coli) DH5 α,筛选阳性克隆 ,并进行双酶切及 PCR扩增鉴定 ,获得含有编码 EBA- 175基因的重组质粒 p MD18- T- EBA。用Sanger双脱氧链终止法进行 DNA序列测定。　结果　FCC1/ HN株 EBA- 175基因序列与 Camp株基本一致 ,全长 430 8bp,编码 1435个氨基酸 ,含有与 Camp株相似的 C片段。利用计算机软件对其 RII区的 F2亚区以及 4肽进行抗原表位分析 ,结果显示这些区域可能含有抗原表位。　结论　EBA- 175全基因编码序列的测定。; 马长玲余新炳单志新李学荣吴忠道胡旭初; 关键词：疟原虫抗原分子克隆 DNA序列分析

日本血吸虫FKBP12基因的克隆及其免疫组织定位: 2006年; 目的克隆日本血吸虫(Sj)FKBP12基因全长cDNA,并进行免疫组织定位。方法从成虫RNA中RT-PCR扩增SjFKBP12基因完整的编码阅读框后,将其分别克隆入pGEX-4T-1和pEGFP-N1载体中;DNA免疫后制备抗血清,间接免疫荧光法对FKBP12进行组织定位。结果将SjFKBP12基因成功克隆入pGEX-4T-1和pEGFP-N1载体中;FKBP12定位于Sj成虫的被膜上。结论成功克隆了SjFKBP12基因,并对FKBP12蛋白在Sj成虫中进行组织定位,为将其进行疫苗等研究打下了基础。; 李孜余新炳吴忠道胡旭初; 关键词：日本血吸虫中国大陆株克隆免疫定位

日本血吸虫大陆株卵黄铁蛋白基因重组及其真核表达: 2001年; 目的　构建日本血吸虫卵黄铁蛋白基因 (Sj Yol Fer)的真核表达重组质粒 p L Yol Fer,转染 Hela细胞进行表达 ,并对表达产物进行鉴定。　方法　用 PCR法从日本血吸虫大陆株成虫 c DNA文库中扩增目的基因片段 ,经 RNA斑点杂交显示转录差异 ,然后定向克隆入表达载体 p L XSN。转染重组体到 Hela细胞中进行表达 ,并用 SDS- PAGE和 Westernblot分析表达产物。　结果　PCR扩增产物大小约 6 0 0 bp左右 ,与雌虫 RNA的杂交信号明显强于雄虫。获得重组质粒p L Yol Fer,特异性表达产物约为 2 1ku,能被日本血吸虫感染兔血清及小鼠血清识别。　结论　为进一步免疫原性实验奠定了基础。; 周俊梅余新炳吴忠道李焱郑亦男; 关键词：日本血吸虫基因克隆基因表达

日本血吸虫精氨酸酶新基因的鉴定及作为疫苗的保护性研究被引量：8: 2006年; 目的识别和鉴定日本血吸虫(Sj)精氨酸酶(ARG)新基因,并研究纯化的重组SjARG对Sj感染小鼠的保护性。方法通过巢式PCR,从日本血吸虫尾蚴cDNA文库特异扩增ARG基因cDNA序列的5′端,并用生物信息学进行鉴定;将ARG的完整编码序列(CDS)克隆到pET30a(+)载体,表达并纯化表达产物后,以鸟氨酸-茚三酮法鉴定酶活性;用蛋白质印迹法(Westernblotting)比较重组ARG蛋白与Sj天然ARG蛋白的免疫学特性,间接免疫荧光法对ARG在Sj成虫中的分布进行组织定位;用纯化重组ARG蛋白免疫小鼠(PBS和SjGST作对照),Sj尾蚴攻击感染后,检测SjARG作为疫苗的免疫保护力。结果扩增并鉴定SjARG基因的完整CDS长为1095bp;重组SjARG具有酶活性,并具有与Sj天然ARG蛋白相同的免疫学特性;ARG定位于Sj成虫的肠壁和生殖器官。重组SjARG蛋白免疫后的减虫率和减卵率分别为55.8%和48.8%。SjGST蛋白免疫后的减虫率和减卵率分别为28.6%和6.89%。结论获取并鉴定了SjARG新基因;SjARG比SjGST具有更高的疫苗保护性。; 李孜余新炳吴忠道胡旭初; 关键词：日本血吸虫精氨酸酶生物学活性疫苗

日本血吸虫p50亲免素基因克隆、表达及纯化被引量：1: 2005年; 目的扩增、原核克隆和表达日本血吸虫(Sj)p50亲免素基因全长cDNA,并进行表达产物的纯化。方法从成虫RNA中RT-PCR扩增Sjp50亲免素基因完整的编码阅读框后,将其克隆入pET 30 a(+)原核表达载体中,异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导高表达后用亲和层析柱对表达产物进行纯化。结果将Sjp50亲免素基因成功克隆入pET 30 a(+)表达载体中;诱导表达并成功纯化出重组Sjp50亲免素蛋白。结论成功克隆Sjp50亲免素基因,并表达和纯化得到了p50亲免素蛋白,为研究Sjp50亲免素的功能及其进行疫苗等研究奠定了基础。; 李孜余新炳吴忠道徐劲胡旭初; 关键词：日本血吸虫中国大陆株克隆表达纯化

全选清除导出

共1页<1>

国家教育部“211”工程(98169)