湖南省自然科学基金(07-JJ3056)
- 作品数：7 被引量：36H指数：4
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- 发文基金：湖南省自然科学基金国家教育部博士点基金教育部科学技术研究重点项目更多>>
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- 依那普利对大鼠肾间质纤维化中TGF-β1,p-Smad2/3及Smad7的作用被引量：5
- 2009年
- 目的:观察依那普利对肾间质纤维化大鼠肾组织中TGF-β1,p-Smad2/3及Smad7的影响,探讨依那普利抗肾间质纤维化的作用机制。方法:将30只雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和依那普利治疗组。对治疗组和模型组大鼠行左侧输尿管结扎术建立单侧输尿管梗阻的动物模型。术后14d处死大鼠,留取梗阻侧肾组织行HE和Masson染色以观察各组大鼠肾组织病理改变,用免疫组织化学方法检测ColⅠ,TGF-β1,p-Smad2/3和Smad7的蛋白水平表达,用RT-PCR方法检测TGF-β1和Smad7mRNA水平表达。结果:模型组肾间质损伤指数、胶原相对面积及间质内ColⅠ表达均较假手术组增高(P<0.01),依那普利治疗后好转。假手术组肾组织TGF-β1蛋白及mRNA表达、p-Smad2/3蛋白表达较低,模型组表达明显增强(P<0.01),依那普利治疗后明显减弱(P<0.01)。假手术组肾组织可见较多的Smad7蛋白及mRNA表达,模型组肾组织Smad7表达明显减弱(P<0.01),依那普利治疗后Smad7表达较模型组增强(P<0.01)。结论:依那普利可以通过影响单侧输尿管梗阻大鼠肾组织中TGF-β/Smads信号通路中的TGF-β1,p-Smad2/3和Smad7而起到抑制纤维化的作用。
- 宁旺斌陶立坚刘春燕孙剑肖云胡静陈继英郑旋王维
- 关键词：肾间质纤维化依那普利SMAD
- 氯沙坦对血管紧张素Ⅱ诱导大鼠肾小管上皮细胞氧化应激反应的作用被引量：2
- 2009年
- 目的探讨血管紧张素Ⅰ型受体阻断剂氯沙坦对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的大鼠肾小管上皮细胞氧化应激反应及转化生长因子B1（TGF-β1）产生的影响。方法以大鼠肾小管上皮细胞株（NRK-52E）为研究对象，分别给予氯沙坦（10^-5mol／L）和（或）NADPH氧化酶抑制剂联二亚苯碘锚（DPI，10^-5mol／L）预处理1h后再加入AngⅡ（10^-7mol／L）刺激24h，同时设立空白培养基作为对照组。实时定量PCR和Western印迹法分别检测4组细胞NADPH氧化酶p22phox、p47phox、Nox-4 mRNA和蛋白水平及TGF-β mRNA水平。用2，7-二氯荧光素双乙酸盐（H2DCF-DA）作为荧光探针，采用荧光分光光度仪检测细胞内活性氧（ROS）的水平。应用比色法测定细胞上清液中超氧化物歧化酶（SOD）水平。结果AngⅡ（10^-7mol／L）刺激细胞15min后开始产生大量的ROS，至60min达平台期。单纯AngⅡ刺激1h后，NRK-52E细胞上清液中SOD水平显著低于对照组（27．31μU／L比48．29μU／L，P〈0．01）；经氯沙坦预处理。1h后再加入AngⅡ刺激1h细胞上清液中SOD水平升高至36．37μU／L，与AngⅡ组差异有统计学意义（P〈0．01）。单纯AngⅡ刺激NRK-52E细胞24h可显著上调NADPH氧化酶p22phox、p47phox和Nox-4 mRNA和蛋白水平，其mRNA水平分别为对照组的5．57倍、5．55倍和9．41倍（均P〈0．01），蛋白水平分别为对照组的4．53倍、4．17倍和6．50倍（均P〈0．01）。经氯沙坦干预后，p22phox、p47phox和Nox-4 mRNA水平分别为对照组的2．71倍、2．18倍和5．23倍（均P〈0．01），蛋白水平分别为对照组的3．20倍、2．30倍和4．30倍（均P〈0．01）。AngⅡ刺激细胞24h后TGF-β1 mRNA表达也显著增多，为对照组的4．36倍（P〈0．01），氯沙坦处理细胞后TGF-β1 mRNA水平为对照组的1．57倍。结论氯沙坦通过抑制NADPH氧化酶的表达和增加SOD的表达减少ROS的产生，并能通过减少ROS产生，�
- 彭张哲陶立坚王菱宁旺斌谢艳云王纳遂李冰心唐怡庭
- 关键词：洛沙坦NADPH氧化酶转化生长因子Β1
- 氯沙坦通过ERK1/2 MAPK途径抑制高糖诱导小鼠系膜细胞CTGF表达被引量：7
- 2009年
- 目的:研究高糖环境下,氯沙坦对CTGF的影响以及其作用机制。方法:体外培养小鼠系膜细胞株(MMCs),用高糖(25mmol/L葡萄糖)刺激细胞分别作用24h、48h、72h,用Western blot方法检测磷酸化ERK1/2的表达。再将细胞分为低糖组(5.6mmol/L葡萄糖),山梨醇组(5.6mmol/L葡萄糖+19.4mmol/L山梨醇),高糖组(25mmol/L葡萄糖),氯沙坦组(25mmol/L葡萄糖+10-5mol/L氯沙坦)以及ERK抑制剂组(25mmol/L葡萄糖+25μmol/LPD98059),48h后采用Western blot方法检测磷酸化ERK1/2的表达,72h后采用Real-timePCR方法及Westernblot分别检测CTGFmRNA表达量以及蛋白的表达。结果:高糖刺激小鼠系膜细胞后,ERK1/2磷酸化的蛋白表达逐渐增高,呈现一定时间依赖性。与低糖组相比,高糖组磷酸化ERK1/2、CTGF的蛋白表达明显增加(P<0.01),而与高糖组相比,氯沙坦组以及ERK抑制剂组磷酸化ERK1/2的蛋白表达以及CTGF的蛋白均明显下降有统计学意义(P<0.05)。与低糖组相比,高糖组CTGF mRNA表达量明显增加(P<0.01),而与高糖组相比,氯沙坦组以及ERK抑制剂组CTGF mRNA表达量明显下降,且有统计学意义(P<0.01)。结论:氯沙坦可抑制高糖对CTGF的诱导作用,其机制可能与抑制ERK1/2MAPK途径有关。
- 王菱陶立坚彭张哲宁旺斌
- 关键词：氯沙坦CTGFERK1/2系膜细胞
- 动态观察依那普利对单侧输尿管梗阻大鼠TGF-β1,CTGF,Smad7和α-SMA的影响被引量：13
- 2009年
- 目的:动态观察血管紧张素转换酶抑制剂依那普利对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织转化生长因子(transforming growth factor-β,TGF-β1)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)、Smad7和平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)表达的影响,探讨依那普利对肾小管上皮细胞转分化的影响。方法:雄性SD大鼠64只,采用单侧输尿管梗阻模型,将实验大鼠分为假手术组(16只)、模型组(24只)和治疗组(24只),治疗组从造模前24h开始以依那普利10mg/(kg.d)灌胃。分别于造模后3,7,14,21d取梗阻侧肾组织进行HE染色,观察肾脏组织病理结构变化,并进行肾间质损伤指数评分;应用real-timePCR法检测肾组织TGF-β1和CTGFmRNA的表达,应用Western免疫印迹检测肾组织α-SMA,Smad7和CTGF蛋白的表达。结果:随着梗阻时间的延长,单侧输尿管梗阻模型鼠肾间质损伤指数评分逐渐增加。TGF-β1和CTGFmRNA以及α-SMA和CTGF蛋白表达逐渐增加,Smad7蛋白表达逐渐减少。依那普利治疗后,肾间质损伤指数下降,TGF-β1和CTGFmRNA以及α-SMA和CTGF蛋白表达较模型组降低,Smad7蛋白表达较模型组增加,依那普利对各时间点TGF-β1mRNA的表达均有明显的下调作用,对CTGFmRNA,α-SMA,CTGF和Smad7蛋白对以单侧输尿管梗阻术后3,7,14d作用最明显。结论:依那普利可减轻梗阻肾间质纤维化,以单侧输尿管梗阻后14d内效果最好,这一作用可能与抑制肾组织TGF-β1,CTGF和α-SMA的表达,增加肾组织Smad7的表达有关。
- 王琳娜宁旺斌陶立坚王菱彭张哲
- 关键词：单侧输尿管梗阻Α-平滑肌动蛋白SMAD7
- 氯沙坦通过ERK1／2丝裂原活化蛋白激酶途径抑制高糖诱导的小鼠系膜细胞结缔组织生长因子表达被引量：1
- 2009年
- 糖尿病肾病（DN）是糖尿病严重的慢性并发症之一，其主要病理特征是由细胞外基质（ECM）增多引起的肾小球硬化。血管紧张素（Ang）受体拮抗剂氯沙坦可有效地延缓肾小球硬化，被用于DN的治疗。高糖可诱导肾脏系膜细胞结缔组织生长因子fCTGF）的表达，从而促进ECM积聚和组织器官的纤维化。丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）作为真核细胞胞质内的信号转导终末通路，与DN的发病密切相关。本研究观察高糖是否通过ERK1／2MAPK途径调节小鼠系膜细胞CTGF的表达，以及氯沙坦对CTGF的作用是否也与ERK1／2MAPK通路相关。
- 王菱陶立坚彭张哲宁旺斌
- 关键词：丝裂原活化蛋白激酶ERK1/2肾脏系膜细胞高糖诱导氯沙坦小鼠
- 依那普利对大鼠早期肾间质纤维化的影响被引量：1
- 2009年
- 目的:观察依那普利对早期肾间质纤维化形成大鼠的疗效,并探讨其作用机制。方法:将60只雄性SD大鼠随机分为假手术组、单侧输尿管梗阻模型组和依那普利治疗组(每组20只),治疗组于手术后第4天开始以依那普利灌胃,术后第14天取各组大鼠肾组织分别行HE染色和Masson染色,免疫组织化学检测Ⅰ型胶原、III型胶原在肾组织的蛋白表达。应用Real-time PCR方法检测肾组织中Ⅰ型胶原、III型胶原、血小板源生长因子(platelet drived growth factor,PDGF)-B、转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1、结缔组织生长因子(cen-nective tissue growth factor,CTGF)mRNA的水平。应用Western免疫印迹方法检测PDGF-B蛋白的表达。结果:依那普利治疗组大鼠肾脏的肾间质损伤指数、肾间质胶原评分、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原,以及细胞因子PDGF-B,TGF-β1,CTGF的表达均比模型组明显下降(均P<0.05)。结论:依那普利可通过下调细胞因子PDGF-B,TGF-β1,CTGF的表达而起到治疗单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的作用。
- 李冰心王维陈继英郑旋彭张哲王菱袁琼靖张芳昉陶立坚
- 关键词：依那普利单侧输尿管梗阻纤维化血小板源生长因子-B
- 依那普利对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的防治作用被引量：9
- 2008年
- 目的:动态观察血管紧张素转换酶抑制剂依那普利对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响。方法:采用单侧输尿管梗阻模型,雄性SD大鼠64只随机分为假手术组(n=16)、模型组(n=24)和依那普利治疗组(n=24)。治疗组从造模前24 h开始以依那普利10 mg/(kg.d)灌胃,模型组和假手术组以等体积的生理盐水灌胃。分别于造模后第3,7,14,21天处死大鼠,取梗阻侧肾组织,行HE染色和Masson染色观察各组大鼠肾组织病理改变,采用real-time PCR方法检测肾组织Ⅰ型胶原mRNA的表达,应用Western免疫印迹检测结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)蛋白表达。结果:随着梗阻时间的延长,模型组大鼠肾间质损伤指数评分逐渐增加,肾间质胶原相对面积逐渐增大,Ⅰ型胶原mRNA和CTGF蛋白表达逐渐增加。依那普利治疗后,肾间质损伤指数和肾间质胶原相对面积下降,Ⅰ型胶原mRNA和CTGF蛋白表达均减少,与模型组比较,差异在第3,7,14天有统计学意义(P<0.05),而在第21天无统计学意义(P>0.05)。结论:依那普利可减轻梗阻肾间质纤维化,这一作用可能与其能抑制肾组织Ⅰ型胶原mRNA和CTGF蛋白表达有关。
- 王琳娜陶立坚宁旺斌
- 关键词：肾间质纤维化单侧输尿管梗阻结缔组织生长因子
