广东省海洋渔业科技推广专项项目(A201201E04) 作品数:12 被引量:56 H指数:4 相关作者: 赵会宏 陈奕彬 温为庚 林权卓 杨慧荣 更多>> 相关机构: 华南农业大学 中国水产科学研究院南海水产研究所 汕头大学 更多>> 发文基金: 广东省海洋渔业科技推广专项项目 广东省科技计划工业攻关项目 广东省教育部产学研结合项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 环境科学与工程 更多>>
双棘黄姑鱼IGF2基因克隆及其在卵巢发育中的作用研究 被引量:7 2015年 运用RT-PCR和RACE技术,首次克隆了双棘黄姑鱼(Protonibea diacanthus)的IGF2 cDNA。双棘黄姑鱼IGF2cDNA全长842bp,其中开放阅读框为648bp,5′非翻译区为125bp,3′非翻译区为69bp。IGF2前体mRNA编码215个氨基酸,成熟肽为71个氨基酸残基的多肽。多重氨基酸比对结果显示,双棘黄姑鱼与其他鱼类IGF2氨基酸序列高度保守。同源性分析表明,双棘黄姑鱼IGF2氨基酸序列与同属鲈形目的斜带石斑鱼、金头鲷、罗非鱼同源性分别为95.8%、95.3%和91.2%。系统进化树结果与同源性分析结果相似,双棘黄姑鱼IGF2基因首先与同属鲈形目的斜带石斑鱼、金头鲷、罗非鱼类聚,再与虹鳟、牙鲆、黄颡鱼的IGF2和斑马鱼IGF2b基因聚为一支,最后与斑马鱼IGF2a类聚为鱼类IGF2基因。组织分布结果表明,IGF2基因在双棘黄姑鱼各组织中表达广泛。RT-PCR结果显示,双棘黄姑鱼卵巢成熟期和退化期的IGF2表达量显著高于发育期,推测IGF2的表达可能促进了双棘黄姑鱼卵巢的成熟。 林权卓 沈卓坤 杨宪宽 王树启 赵会宏关键词:双棘黄姑鱼 基因克隆 饲料中添加生长激素基因重组蛋白对斜带石斑鱼生长、消化及抗氧化能力的影响 被引量:2 2014年 为了探究体外表达的斜带石斑鱼生长激素基因重组蛋白在海水鱼养殖中的应用前景,将其酵母表达基因重组蛋白上清液按照2,4,8 mg/kg的添加量喷涂饲料(分组记为G1、G2和G3),与空白对照(记为G0)共4组,每组设3个平行,进行斜带石斑鱼室内工厂化养殖试验。饲养期间,早中晚各投喂1次,每日测1次水质指标,经10周的饲养,结果如下:①生长性能方面,G2组斜带石斑鱼增质量率最高,为293.16%,显著高出G0组23.75%(p<0.05),饲料系数最低,为1.14,G2组斜带石斑鱼在体长增长率以及均摄食量方面显著高于G0组(p<0.05);②形态学及体成分方面,G2组全鱼粗蛋白含量最高,显著高于G0组(p<0.05),鱼体肌肉中粗脂肪的含量显著低于G0组(p<0.05);③血脂方面,G1、G2和G3组鱼的胆固醇、低密度脂蛋白和甘油三酯含量均低于G0组,且G1和G2组的低密度脂蛋白显著低于G0组(p<0.05);④消化酶活性方面,试验组斜带石斑鱼的淀粉酶活性均高于对照组,其中G2组最高,显著高于G0组(p<0.05);脂肪酶活性试验组均显著高于对照组(p<0.05);⑤抗氧化指标方面,试验组斜带石斑鱼肌肉总抗氧化能力显著高于G0组(p<0.05);⑥磷酸酶活性方面,G2组鱼的磷酸酶活性最高,在肝脏中G2组鱼的磷酸酶活性最高且显著高于对照组(p<0.05)。以上结果表明:在饲料中添加4 mg/kg的生长激素基因重组蛋白对于斜带石斑鱼的生长具有明显的促进作用且能提高饲料利用率;还可明显降低斜带石斑鱼的血脂水平,提高其消化能力和抗氧化能力。 潘忠超 石和荣 杨慧荣 王树启 赵会宏关键词:斜带石斑鱼 血脂 抗氧化酶 磷酸酶 酵素菌在水产养殖中的应用研究进展 被引量:2 2015年 介绍了酵素菌技术的原理以及在农业,尤其在水产养殖业的应用现状,包括酵素菌对于养殖水体水质(溶氧量、酸碱度、氨氮、亚硝酸氮、浮游生物组成等)的调节作用和对于水产动物的促生长作用。对酵素菌在国内的引进情况和在水产养殖上的研究和应用中存在的问题提出了一些建议,并进行了展望。 陈奕彬 杨宪宽 胡娟 刘丽杰 赵会宏关键词:酵素菌 水产养殖 双棘黄姑鱼IGF3基因克隆及表达模式分析 被引量:4 2016年 以双棘黄姑鱼(Protonibea diacanthus)为实验对象,通过RACE方法克隆得到IGFs家族成员IGF3。双棘黄姑鱼IGF3 c DNA全长1 184 bp。氨基酸一致性分析显示,双棘黄姑鱼IGF3与尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)一致性最高,仅为58.0%;与自身IGF1的2个亚型及IGF2相比,一致性分别低至26.2%、25.2%和21.9%。系统进化树显示鱼类IGF3基因先与IGF2聚类,再与IGF1汇聚构成IGF家族,最后IGFs与胰岛素聚类。组织表达模式显示IGF3在双棘黄姑鱼心脏、性腺、脑区均有表达,在性腺中表达最强。实时定量PCR结果表明,IGF3在精巢发育期表达量显著高于其他时期,呈显著下降趋势;在卵巢成熟期的表达量显著高于其他时期。此外,雌鱼在成熟期前、中、后脑IGF3的表达量显著高于其他时期,而雄鱼各脑区IGF3表达趋势呈多样性。上述结果表明,IGF3可能参与了双棘黄姑鱼精巢发育和卵巢成熟期生殖功能的调节,且前脑可能主要参与了IGF3在性腺表达的反馈调节。 林权卓 陈奕彬 胡娟 王树启 杨宪宽 沈卓坤 赵会宏关键词:双棘黄姑鱼 基因克隆 双棘黄姑鱼促性腺激素释放激素基因的克隆及系统进化分析 被引量:2 2015年 通过同源基因克隆方法得到双棘黄姑鱼促性腺激素释放激素(GnRH)的3个基因:cGnRH、sGnRH、sbGnRH,其开放阅读框为258、273bp和261bp,分别编码85个、90个和86个氨基酸,3个基因的信号肽为23个氨基酸,核心十肽分别是QHWSHGWYPG、QHWSYGWLPG和QHWSYGLSPG,这3种核心十肽经生物信息学分析均高度保守。氨基酸序列比对分析表明,双棘黄姑鱼与同科美国红鱼GnRHs基因亲缘性最近,它们的cGnRH和sGnRH的氨基酸同源性达100%,两种鱼sbGnRH的同源性也高达92.2%。用MEGA 4.0构建GnRHs Neighbour-joining系统进化树,结果显示双棘黄姑鱼cGnRH先于同科的美国红鱼聚类,再与星点东方鲀、斑马鱼和虹鳟等共同聚类;双棘黄姑鱼sGnRH则先后与其他鱼类sGnRH、cGnRH、sbGnRH聚类;而双棘黄姑鱼sbGnRH先后与其他鱼类的sbGnRH、cGnRH和sGnRH聚类。 杨宪宽 赵会宏 林权卓 陈奕彬 刘丽杰 刘燕 李治虎关键词:双棘黄姑鱼 促性腺激素释放激素 基因克隆 系统进化 利用CR和Cyt b基因序列组合评价珠江和长江水系赤眼鳟的遗传多样性 被引量:4 2013年 利用PCR技术扩增得到珠江和长江水系共24个赤眼鳟(Squaliobarbus curriculus)个体mtDNA CR和Cyt b基因片段,并测定其序列。对1 345 bp的组合序列进行分析,共检测到23个单倍型,22个单突变位点,102个简约信息位点。在139个突变位点中:转换位点100个,颠换位点30个,插入/缺失位点14个;A+T的含量(61.5%)明显高于C+G的含量(38.5%)。4个水域个体间的遗传变异率在0~7.43%之间,组合序列的单倍型多样性(H)、平均核苷酸差异数(K±SD)和核苷酸多样性(π)分别为0.977 8、17.271 0和0.029 7,均表现出较高的遗传多样性水平。对4个群体的组合序列进行FST分析,并构建分子系统树和单倍型进化网络关系图。结果表明:不同水系群体间存在显著遗传差异,而同一水系内的不同群体间差异不显著。AMOVA分析表明:梧州、新丰、武汉和宜昌4个群体间显著性的遗传分化主要由不同水系群体间的遗传差异所致,珠江或长江流域内群体间不存在遗传分化,进一步印证了FST的分析结果。珠江和长江水系间的遗传分化主要是因地理隔离导致的生殖隔离,分属"长江群体"或"珠江群体"。但在同一水系内,主要因为赤眼鳟的半洄游习性使得它们之间存在广泛的基因交流,没有出现遗传分化。 杨慧荣 刘丽 龚世园 赵会宏 孙际佳 陈彦珍关键词:线粒体DNA CR CYT 添加光合细菌对糙海参幼苗培育阶段的影响研究 被引量:11 2014年 以受精后24 h孵化出的糙海参(Holothuria scabra)耳状幼体为研究对象,探讨养殖水体不同量光合细菌对糙海参苗期生长、成活、消化道消化酶活性和养殖水体水质变化的影响。试验设4个处理,光合细菌(浓度为1×1011cfu·m L-1)添加量分别是0 m L(组1,对照组)、50 m L(组2)、100 m L(组3)和150 m L(组4),每个处理设3个重复,每个重复放养4×104尾幼体于室内水泥池(5 m×3 m×1.5 m)中,试验周期为41 d。结果表明,添加光合细菌组的糙海参出苗体质量和成活率均显著高于对照组(P<0.05),而组3和组4的体质量和成活率又明显优于组2(P<0.05),组3和组4之间的差异不显著(P>0.05)。添加光合细菌还能不同程度地影响糙海参苗体消化道蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶的活性,试验组3种酶的活性均显著高于对照组(P<0.05),而组3和组4的蛋白酶活性和纤维素酶活性显著高于组2(P<0.05),淀粉酶活性在3个试验组之间无显著差异(P>0.05)。在试验第10天后,各试验组氨氮(NH3-N)和亚硝酸盐含量显著低于对照组(P<0.05),在试验第20天后,各试验组化学需氧量(COD)的值显著低于对照组(P<0.05),而总磷(TP)的差异不大(P>0.05)。表明光合细菌可以促进糙海参幼体的生长,提高消化酶活性和成活率,并改良育苗水体水质。 姜松 王军红 范嗣刚 温为庚 黄桂菊 刘宝锁 张博 喻达辉关键词:光合细菌 体质量 成活率 消化酶活性 水质 番石榴叶水提取物抗对虾白斑综合征病毒有效成分初探 被引量:2 2014年 利用有机萃取技术对番石榴叶水提取物进行了初步分离,得到石油醚相(S)、乙酸乙酯相(Y)、正丁醇相(Z)和水相(W)4个组分。然后通过人工感染试验,确定了各组分抗对虾白斑综合征病毒(WSSV)的效果,并通过体外试验研究了番石榴叶水提取物及各组分对WSSV的影响。人工感染的结果显示:用乙酸乙酯相与正丁醇相这两种组分分别处理WSSV后,对虾在用WSSV人工感染后未出现死亡,而用石油醚组分处理WSSV后,对虾在用WSSV人工感染后第5 d开始出现死亡,第12 d全部死亡,表明番石榴叶中影响WSSV致病性的有效成分的极性较强,与乙酸乙酯和正丁醇相近。用番石榴叶水提取液及其各萃取组分体外处理WSSV不同时间后,试验组和对照组中的病毒拷贝数随时间推移略有降低,但在第120 h结束时,各组中的病毒拷贝数还维持在较高水平;之后,将WSSV核酸暴露,并在体外用番石榴叶水提取物及其各萃取组分处理,荧光定量PCR结果显示:随着孵育时间的延长,各组病毒基因拷贝数无显著性变化。 阴晓丽 李卓佳 管淑玉 温为庚 郭志勋关键词:番石榴 水提取物 WSSV 珠江流域黄颡鱼群体的形态度量学与遗传多样性分析 被引量:7 2015年 为了解珠江流域黄颡鱼不同群体的遗传分化,以黄颡鱼为材料,通过形态度量学和分子生物学的方法对其进行研究。形态度量学的主成分分析(PCA)的散点图显示都柳江群体与漓江群体聚集于一处,东江群体与都柳江、漓江群体分开,表明东江群体与其它两个群体形态上有分化,漓江群体与都柳江群体形态间分化较小。D-loop序列分析最终检测到176个变异位点,单倍型36个,3个群体的平均碱基组成差异很小,且A+T含量(59.6%)高于G+C含量(40.4%),3个群体平均Nm=3.234,表明群体间存在较大基因流,单倍型NJ树显示漓江群体与都柳江群体聚为一支,东江群体聚为一支。3个群体21个微卫星标记位点的分析结果显示:3个群体有15个位点属于高度多态位点(PIC>0.5),3个群体基于Nei's遗传距离构建的UAPGM聚类结果与mt DNA D-loop聚类结果一致,与地理分布呈一定相关性。综合形态度量学与分子生物学标记结果可以看出,黄颡鱼3个群体存在一定形态差异,3个黄颡鱼野生群体遗传多样性水平较高。 谢堂晖 赵会宏 杨慧荣 刘丽 韩兴鹏 杨宪宽 陈奕彬 刘丽杰关键词:黄颡鱼 珠江流域 MTDNA D-LOOP 微卫星 硝酸氮对不同生长阶段凡纳滨对虾的急性毒性研究 被引量:3 2015年 采用静态水生生物急性毒性试验法,在盐度为15‰条件下,研究硝酸氮(以氮计)对凡纳滨对虾4个不同生长阶段的急性毒性。结果表明,硝酸氮对凡纳滨对虾的半致死质量浓度与接触时间呈正相关,对不同生长阶段对虾的半致死质量浓度不同。仔虾期(体长1±0.15 cm)24、48、72、96h-LC50分别为1 534.64、957.64、538.77、189.32 mg/L,幼虾期(体长3.47±0.45 cm)分别为2 999.71、2 092.26、1 591.49、1 077.32 mg/L,中虾期(体长5.17±0.58 cm)分别为2 379.55、2 202.34、1 781.26、1 314.49 mg/L,成虾期(体长10.20±1.45 cm)分别为2 648.34、1 515.83、702.63、494.85 mg/L。凡纳滨对虾4个生长阶段硝酸氮的安全浓度分别为18.93、107.73、131.45、49.48 mg/L。 付腾 冯娟 宋沙沙 马红玲 陈新祥 郭志勋关键词:凡纳滨对虾 硝酸氮