广东省社会发展科技计划项目(2004B30301015)
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 相关作者：郑永平陈慎仁吴林杨伟张锦堃更多>>
- 相关机构：汕头市中心医院汕头大学汕头大学医学院第二附属医院更多>>
- 发文基金：广东省高等学校自然科学研究重点项目广东省社会发展科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 负载HPV18E7基因脐带血树突状细胞的体外抗食管癌研究被引量：2
- 2010年
- 目的制备人脐带血CD34+造血干细胞来源的负载HPV18E7基因的树突状细胞(DC)疫苗,并观察其在体外对人食管癌细胞的杀伤活性。方法采用微磁珠分选系统(MiniMACS)从脐带血单个核细胞中分离CD34+干细胞,以重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rh-GM-CSF)和重组人肿瘤坏死因子-α(rhTNF-α)各200ng/ml和100U/ml诱导其向DC分化,采用阳离子脂质体DMRIE-C介导HPV18E7基因进入DC,制备DC疫苗。倒置相差显微镜下观察DC的生长情况和形态变化;流式细胞仪检测疫苗表面目的基因E7蛋白的表达情况;MTT法检测DC疫苗致敏的同种异体外周血T淋巴细胞在体外对表达HPV18E7的食管癌细胞EC-109的杀伤活性。结果脐带血CD34+干细胞在细胞因子诱导下,细胞体积增大,形状由圆形变得不规则形,细胞数量增多,形成细胞集落。经过14d的培养,大部分的细胞从集落上脱落下来成为成熟的DC,具有典型的树枝状突起。E7蛋白的阳性表达率为47.5%,说明基因转染成功。DC疫苗致敏的淋巴细胞在体外对EC-109细胞的杀伤活性明显强于未转基因DC致敏的淋巴细胞组、T淋巴细胞组和对照组(P<0.01),且随效靶比的增高而增强(P<0.05)。结论人脐带血干细胞在细胞因子的诱导下能扩增分化为DC,经肿瘤相关病毒抗原基因转染获得的DC疫苗,高表达目的基因蛋白,并能显著增强淋巴细胞对相应人食管癌细胞的体外杀伤效应。
- 吴林郑永平孔晓霞杨伟陈慎仁张锦堃
- 关键词：树突细胞胎血
