国家教育部博士点基金(20121302120007)
- 作品数：6 被引量：34H指数：3
- 相关作者：邢继红董金皋王冠宇张靖董丽萍更多>>
- 相关机构：河北农业大学河北北方学院河北省农林科学院更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 拟南芥AtBT4基因在抗灰霉病过程中的功能
- 本研究将拟南芥抗灰霉病生态型Col-0接种灰葡萄孢后,利用DDRT-PCR等技术获得了拟南芥抗灰霉病相关基因AtBT4;从拟南芥SALK库中获得了AtBT4基因的T-DNA插入突变体SALK15577(bt4)和SALK...
- 樊锦涛蒋琛茜郝丛丛赵福鑫李培芬邢继红董金皋
- 关键词：拟南芥灰葡萄孢
- 拟南芥AtBT4基因在抗灰霉病过程中的功能
- 本研究将拟南芥抗灰霉病生态型Col-0接种灰葡萄孢后,利用DDRT-PCR等技术获得了拟南芥抗灰霉病相关基因AtBT4；从拟南芥SALK库中获得了AtBT4基因的T-DNA插入突变体SALK_ 015577(bt4)和S...
- 樊锦涛蒋琛茜郝丛丛赵福鑫李培芬邢继红董金皋
- 关键词：拟南芥灰葡萄孢
- 拟南芥AtBT4对灰葡萄孢的抗性机制分析被引量：3
- 2013年
- 【目的】揭示AtBT4在拟南芥抗灰葡萄孢中与SA、JA信号途经的相互关系。【方法】利用RT-PCR技术,检测用SA、SA类似物BTH、JA、ACC及灰葡萄孢处理拟南芥野生型Col-0后其AtBT4的表达情况;检测经SA和JA处理后拟南芥SA、JA途径相关突变体AtBT4的表达情况;并检测接种灰葡萄孢后拟南芥野生型Col-0、bt4突变体和回复突变体抗病相关基因的表达情况。【结果】JA处理和接种灰葡萄孢后,拟南芥野生型Col-0中AtBT4的表达明显增强。但经JA处理后,JA不敏感突变体jar1的AtBT4表达变化趋势与野生型明显不同,AtBT4的表达水平不受JA诱导。SA信号途径相关突变体eds5、sid2和npr1中AtBT4的表达明显低于野生型,但变化趋势与野生型基本一致。bt4突变体中抗病相关基因PR1、PR4、PDF1.2和BIK1的表达明显低于野生型和回复突变体。【结论】AtBT4的表达受JA和灰葡萄孢的诱导,AtBT4突变影响抗病相关基因PR1、PR4、PDF1.2和BIK1的表达,AtBT4可能通过SA、JA信号途径影响拟南芥对灰葡萄孢的抗性。
- 郝丛丛杨萍陈展贾娇赵斌司贺龙韩建民邢继红董金皋
- 关键词：拟南芥灰葡萄孢
- 拟南芥T1N622基因的亚细胞定位分析
- 拟南芥T1N62基因编码的蛋白为NAD(P)结合Rossmann-折叠蛋白家族的成员,具有葡萄糖脱氢酶活性,短链氧化还原酶活性,参与植物体内各种催化反应和新陈代谢过程。实验室前期获得了拟南芥抗病相关基因T1N62,明确了...
- 蒋琛茜樊锦涛王冠宇董丽萍邢继红董金皋
- 关键词：拟南芥GFP亚细胞定位
- 文献传递
- AP22.65基因调控拟南芥开花的机制分析
- 2014年
- 为揭示AP22.65基因在拟南芥开花过程中的调控机制,对AP22.65基因与拟南芥开花调控途径的关系进行了分析,发现拟南芥ap22.65突变体中赤霉素途径基因SPY,光周期途径基因GI、CO和FT,春化途径基因VNR2、VIN4和FLC,整合途径基因LFY、TFL1和EMF1的表达水平均明显下调,FVE、CCA1、VNR1和SOC1表达变化不明显。CO超表达突变体WT/CO和spy、gi、lhy突变体中AP22.65基因的表达水平均不同程度上调,而FLC超表达突变体WT/FLC中AP22.65基因的表达水平明显下调。春化处理后,ap22.65、回复及超表达突变体的花期和AP22.65基因的表达变化不明显;赤霉素处理后,ap22.65突变体的花期明显延迟,且AP22.65基因的表达明显增强,明确AP22.65基因主要参与光周期途径和赤霉素途径调控拟南芥开花。
- 张靖樊锦涛蒋琛茜王冠宇董丽萍邢继红
- 关键词：拟南芥开花
- 拟南芥抗病相关基因T1N6_22的原核表达分析被引量：4
- 2015年
- 为构建拟南芥抗病相关T1N6_22基因的原核表达载体并进行高效表达,获得纯化的T1N6_22蛋白,以拟南芥Col-0的c DNA为模板,扩增获得了T1N6_22基因CDS,对其进行克隆、测序后与含有GST标签蛋白的p GEX4T-1载体相连,构建T1N6_22的原核表达载体p GEX4T-1-T1N6_22-GST。经酶切和测序鉴定正确后,将构建好的载体及空载体转化大肠杆菌BL21。结果表明,在大肠杆菌BL21菌株中成功表达了与标签蛋白融合的T1N6_22蛋白,大小约57 k Da。SDS-PAGE分析表明,高效表达的诱导条件为0.1 mmol/L IPTG诱导培养3 h。研究结果为进一步T1N6_22互作蛋白的筛选及其调控拟南芥抗病分子机制的研究奠定了基础。
- 蒋琛茜瓮巧云樊锦涛王冠宇董丽萍邢继红董金皋
- 关键词：拟南芥原核表达纯化
- 拟南芥AtBT4在抵抗Pst DC3000侵染过程中的功能
- 2018年
- 为明确拟南芥AtBT4基因在抵抗Pst DC3000侵染过程中的功能,本研究检测AtBT4基因的T-DNA插入突变体bt4和bt4-1、回复突变体CE和超表达突变体OE对Pst DC3000的敏感性,结果发现,bt4、bt4-1突变体感病症状较为严重、病菌cfu值明显增强、胼胝质含量明显降低,表明AtBT4基因在拟南芥抵抗Pst DC3000侵染过程中发挥正调控的作用。利用Real-time PCR技术,检测野生型和突变体bt4、bt4-1、CE、OE接种Pst DC3000后SA、JA/ET信号途径关键基因ICS1、NPR1、JAR1、PDF1.2的表达情况,发现bt4和bt4-1突变体中各基因的表达水平显著低于野生型、回复突变体和超表达突变体,表明AtBT4基因正调控ICS1、NPR1、JAR1、PDF1.2的表达。由此推测,AtBT4基因通过调控SA、JA/ET信号途径影响拟南芥对Pst DC3000的抗性。研究结果为进一步阐明AtBT4基因调控拟南芥抵抗Pst DC3000侵染的分子机制奠定了良好基础。
- 郑旭黄聪聪庞茜藏金萍曹宏哲张康董金皋邢继红
- 关键词：拟南芥PST
- 拟南芥R2R3-MYB家族第22亚族的结构与功能被引量：23
- 2014年
- 拟南芥R2R3-MYB转录因子在拟南芥生长发育、代谢及响应生物和非生物胁迫的调控网络中具有重要作用。根据保守的氨基酸序列,R2R3-MYB转录因子被分为25个亚族,其中第22亚族包含AtMYB44、AtMYB77、AtMYB73和AtMYB70 4个基因,主要响应生物和非生物胁迫。文章从基因功能的相似性、基因表达的一致性和基因结构的保守性3方面综述了第22亚族的4个基因,并综合讨论了其在结构与功能上的冗余性和多样性。
- 樊锦涛蒋琛茜邢继红董金皋
- 关键词：拟南芥
- 拟南芥转录因子AtMYB73转录活性区域分析及互作蛋白的筛选被引量：4
- 2014年
- 【目的】确定拟南芥抗逆转录因子At MYB73的转录活性区域并筛选获得与其互作的蛋白,为进一步阐明At MYB73调控拟南芥抗逆的分子机制奠定基础。【方法】构建转录因子At MYB73的酵母诱饵表达载体p AS1-At MYB73,检测p AS1-At MYB73的自激活性及其对酵母Y190的细胞毒性。克隆At MYB73的N端区域(含有R2R3结构域)和C端区域(不含R2R3结构域),检测At MYB73的N端和C端的转录激活活性,分析At MYB73自激活结构域的位置。利用酵母双杂交技术,以At MYB73为诱饵筛选拟南芥的c DNA文库,将阳性克隆进行鉴定、测序;利用TAIR数据库对筛选获得的At MYB73的候选互作蛋白进行分析。构建At MYB73和F12F1.4的酵母双杂交载体p GBDT7-At MYB73和p GADT7-F12F1.4,通过酵母双杂交技术,对其互作关系进行分析。【结果】含p AS1-MYB73的酵母菌在不同浓度的3-AT的SD/-His/-Trp/、SD/-Ade/-Trp培养基上均能生长,表明At MYB73具有较高的自激活活性。含p AS1-At MYB73的酵母菌在SD/-Trp/Amp液体培养基中培养24 h的OD600值大于0.8,表明诱饵载体对酵母Y190没有细胞毒性。成功构建了p AS1-At MYB73-N和p AS1-At MYB73-C载体,获得了含有p AS1-At MYB73-N和p AS1-At MYB73-C的酵母;含p AS1-At MYB73-N的酵母在含X-a-gal的YPAD培养基上呈现无色,而含p AS1-At MYB73-C的酵母则呈现蓝色,表明At MYB73的C端有明显的自激活性,而N端没有自激活性。以At MYB73为诱饵,筛选拟南芥的c DNA文库,获得了与光合作用、防御反应途径、抗逆等相关的8个蛋白。利用酵母双杂交技术,确定了MYB73与F12F1.4之间存在一定的互作。【结论】拟南芥抗逆转录因子At MYB73具有较高的转录激活活性,其活性区域位于C端;以At MYB73为诱饵,筛选获得了与光合作用、防御反应途径、抗逆等相关的8个At MYB73的候选互作蛋白;利用酵母双杂交技术,确定了At MYB73与F12F1.4之间的互作关系。
- 樊锦涛贾娇蒋琛茜王冠宇张靖邢继红董金皋
- 关键词：拟南芥转录活性酵母双杂交
