河南省教育厅科学技术研究重点项目(12B180015)
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
- 相关作者：陈金峰李凤丽王慧琴胡斌杰王宫南更多>>
- 相关机构：开封大学郑州澍青医学高等专科学校更多>>
- 发文基金：河南省教育厅科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：农业科学环境科学与工程生物学更多>>
- 大豆过氧化氢酶同源基因在大肠杆菌中融合表达被引量：2
- 2013年
- 利用RT-PCR技术获得大豆的过氧化氢酶基因家族的GmCAT3、GmCAT4、GmCAT5的cDNA片段,进化树分析表明GmCAT3和GmCAT1/2,GmCAT5和豌豆PsCAT、豇豆VrCAT的亲缘关系较近;将3个目的基因克隆到pMD19-T载体上,再连接到pET28a表达载体上,获得重组载体pET28a-GmCAT3、pET28a-GmCAT4和pET28a-GmCAT5,并转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,经SDS-PAGE电泳分析,在20℃条件下,0.1mmol/L的IPTG诱导12h表达量最佳,诱导的目的蛋白在60kD处以包涵体的形式存在,获得重组蛋白分别占总蛋白的35.7%、44.2%和42.5%。
- 陈金峰胡斌杰王宫南
- 关键词：大豆过氧化氢酶大肠杆菌
- 脂肽强化污泥厌氧发酵生产短链挥发性脂肪酸的研究被引量：3
- 2016年
- 利用脂肽强化污泥厌氧发酵生产短链挥发性脂肪酸(SCFA),考察了脂肽投加量对污泥厌氧发酵过程中溶解、水解以及甲烷化过程的影响。实验结果表明,综合考虑经济因素及厌氧发酵效果,脂肽最佳投加量为0.04g/g(以污泥中单位质量总悬浮固体(TSS)的脂肽投加量计),此时SCFA的最大积累量为2 697mg/L。机制分析表明,脂肽能够促进溶解性蛋白质和多糖的溶出及挥发性悬浮固体(VSS)减量,并抑制甲烷产生,从而提高SCFA的积累量,脂肽自身分解对SCFA的贡献不大。
- 王慧琴李凤丽
- 关键词：污泥厌氧发酵脂肽
- 大豆GmCAT4基因在毕氏酵母中的表达和功能鉴定
- 2014年
- 利用生物信息学分析了大豆GmCAT4蛋白的结构,其目的蛋白编码492个氨基酸,分子量为56.7 kD,等电点约为6.80,同时预测了蛋白质的二级和高级结构。利用双酶切的方法从克隆载体pMD19-T-GmCAT4上双酶切下目的基因的cDNA,然后将其和表达载体pPIC9K进行连接,构建重组载体pPIC9K-GmCAT4,经电击转化入毕氏酵母,PCR证实了GmCAT4基因已整合进酵母基因组。目的蛋白经甲醇诱导后,在上清和细胞内均有表达,发酵液上清粗酶活性为124.3 kU·L-1,诱导后的酵母对NaCl和H2O2表现出一定的抗性。
- 陈金峰韩艳霞焦婵
- 关键词：大豆过氧化氢酶基因毕氏酵母
