国家自然科学基金(81071520)
- 作品数：5 被引量：19H指数：3
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- 小干扰RNA预防兔激素性股骨头坏死的组织病理学观察被引量：2
- 2016年
- 目的观察靶向过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）基因小干扰RNA预防兔激素性股骨头坏死（ONFH）的组织病理学变化。方法将48只兔随机分为4组。股骨头坏死模型组（M）：给予地塞米松20mg／kg，连续肌肉注射3d。干扰组（S）：同样给予地塞米松，并于实验1、3、6周给予siRNA腺病毒滴液25山注入一侧股骨头内。无关序列组（Con）：同样给予地塞米松，注入兔股骨头内无关序列siRNA病毒滴液。正常组（N）：无特殊处理。实验第4、8周末分批处死兔，观察兔股骨头组织病理学改变。结果实验8周时，干扰组、模型组、无关序列组、正常组中，最大脂肪细胞平均直径分别为（41．21±2．33）、（49．61±1．13）、（49．22±2．18）、（40．94±2．09）μm；骨小梁面积分数分别为（40．93±1．96）、（31．51±4．26）、（30．79±1．85）、（41．64±2．34）％；空骨陷窝计数分别为（12．07±1．38）、（21．54±1．38）、（21．76±1．46）、（11．67±1．28）％。模型组和无关序列组中发生明显的早期ONFH组织病理学变化，股骨头软骨下骨区造血组织大大减少、骨髓坏死、脂肪细胞增殖肥大、平均直径明显增大、骨小梁变细稀疏或断裂、骨小梁面积分数明显降低、空骨陷窝显著增多。而正常组中无这些病理学改变（P〈0．05）。干扰组股骨头病理学改变较少，接近于正常组（P〉0．05），与模型组和无关序列组之间的差异均有统计学意义（P〈0．05）。模型组、无关序列组中ONFH发生率为83％、83％，干扰组、正常组中为33％、0％（P〈0．05）。结论靶向PPARγ基因小干扰RNA能够有效阻止激素导致兔ONFH的组织病理学改变，预防激素性ONFH的发生。
- 马源张善锋刘鸣李劲峰王义生李月白赵国强
- 关键词：小干扰RNA激素股骨头坏死组织病理学
- 小干扰RNA阻断激素导致兔股骨头细胞内成脂基因表达的作用
- 2016年
- 目的观察靶向过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）基因小干扰RNA（siRNA）阻断激素导致活体兔股骨头细胞内成脂基因表达的作用。方法48只家兔随机分为4组，每组12只。正常组（N）：臀肌注射生理盐水2ml。模型组（M）：每次臀肌注射地塞米松20mg／kg，连续注射3d。干扰组（s）：同M组给予地塞米松，并于1、3、6周穿刺注入一侧股骨头内siRNA腺病毒滴液25μl。无关序列组（Con）：同M组给予地塞米松，注入家兔股骨头内无关序列siRNA病毒滴液。实验第4、8周末分批处死家兔，观察兔股骨头细胞内成脂基因与成骨基因的表达。结果实验4周和8周时，S、Con、M、N组中的PPARymRNA表达量分别为0．40±0．05、0．69±0．09、0．71±0．08、0．38±0．06和0．43±0．05、0．71±0．08、0．71±0．08、0．42±0．08；Runx2mRNA相对表达量分别为0．0035±0．0006、0．0019±0．0008、0．0019±0．0007、0．0036±0．0007和0．0034±0．0006、0．0017±0．0005、0．0020±0．0004、0．0035±0．0006；骨钙素（Osteocalcin）mRNA相对表达量分别为0．034±0．006、0．015±0．006、0．014±0．005、0．035±0．005和0．032±0．007、0．016±0．006、0．015±0．005、0．033±0．005。PPARγ蛋白表达量分别为0．18±0．02、0．85±0．14、0．87±0．18、0．24±0．02和0．17±0．02、0．90±0．15、0．90±0．18、0．22±0．02；核心结合蛋白因子2（Runx2）蛋白表达量分别为0．82±0．19、0．22±0．03、0．19±0．03、0．84±0．17和0．83±0．19、0．21±0．03、0．20±0．03、0．86±0．15；Osteocalcin蛋白表达量分别为0．83±0．17、0．19±0．02、0．20±0．02、0．83±0．15和0．82±0．17、0．18±0．02、0．20±0．03、0．80±0．14。S组中PPARymRNA与其蛋白表达量均明显低于M、Con组（P〈0．05），与N组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。S组中Runx2、OsteocalcinmRNA与其蛋白表达量均明显�
- 赵辉金国平刘鸣李劲峰赵国强王义生李月白
- 关键词：小干扰RNA激素股骨头
- Inhibition of peroxisome proliferator-activated receptor-γ in steroid-induced adipogenic differentiation of the bone marrow mesenchymal stem cells of rabbit using small interference RNA被引量：5
- 2014年
- Wang YishengLi JinfengLiu MingZhao GuoqiangHao LanyuLi Yuebai
- 关键词：过氧化物酶体增殖物激活受体成骨细胞分化小分子干扰RNA分化诱导新西兰兔碱性磷酸酶活性
- 腺病毒穿梭载体介导RNA干扰对激素诱导兔骨髓间充质干细胞成脂分化的作用被引量：7
- 2013年
- 目的观察腺病毒穿梭载体介导RNA干扰对激素诱导骨髓间充质干细胞（BMSCs）成脂分化的影响。方法选取新西兰兔制备BMSCs并随机分为6组，RNA干扰1组、2组和3组（s1、s2和s3）；无关序列组（Con）；模型组（M）；正常对照组（N）。加入激素终质量浓度为1×10-7mol／L地塞米松。将重组腺病毒穿梭载体转染细胞，采用TaqMan逆转录一聚合酶链反应（RT．PCR）和Westernblot方法分别检测各组BMSCs内过氧化物酶体增殖子活化受体γ（PPARγ）mRNA及其蛋白表达，测定细胞甘油三酯含量，用苏丹Ⅲ染色细胞并计数脂肪细胞。结果处理细胞7d时，s1、s2、s3、Con、M、N组中，PPARs,mRNA相对表达值分别为0．406±0．012、0．401±0．009、0．410±0．042、0．621±0．045、0．628±0．008、0．399±0．014，PPAR＇yWesternblot灰度扫描值分别为0．246±0．027、0．235±0．015、0．257±0．025、0．800±0．017、0．793±0．019、0．244±0．010。S1、S2、S3、N组中PPARγ mRNA及其蛋白表达均明显低于M、Con组，差异均有统计学意义（P〈0．05），S1、s2、s3组和N组之间差异无统计学意义（P〉0．05）。s1、s2、s3、N组中脂肪细胞计数、甘油三酯含量均明显低于M、Con组，差异均有统计学意义（P〈0．05），s1、s2、S3组和N组之间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论靶向PPARγ基因的腺病毒穿梭载体介导RNA干扰能够有效地抑制激素诱导的BMSCs成脂分化。
- 李月白刘鸣李劲峰李洁宋石赵国强王义生
- 关键词：RNA干扰激素成脂分化
- microRNA-34a在大鼠膝骨关节炎模型中的功能研究被引量：5
- 2016年
- 目的探讨微小RNA-34a(miR-34a)在碘乙酸钠所致大鼠膝骨关节炎模型中的表达变化,并初步明确其功能。方法选取30只雄性Wistar大鼠,左侧膝盖不注射碘乙酸钠作为对照组,右侧膝盖注射碘乙酸钠作为模型组;造模完成后检测两组大鼠关节液内miR-34a表达水平的变化;分离两组大鼠的膝关节软骨细胞并进行原代培养,敲低miR-34a后,使用流式细胞仪测定细胞凋亡情况。结果模型组Makin评分为(5.09±1.35)分,对照组为(1.27±0.64)分,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,模型组中miR-34a在关节液和关节软骨细胞内的表达均升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。将miR-34a用它的反义互补片段敲低后,模型组大鼠关节软骨细胞的凋亡受到明显抑制(P<0.05)。结论 miR-34a在碘乙酸钠所致大鼠膝骨关节炎的关节液中表达升高,并且抑制miR-34a的表达会降低关节炎大鼠的关节软骨细胞凋亡率。
- 张文强丁倩张娜李月白
- 关键词：膝骨关节炎关节液细胞凋亡
