国家自然科学基金(30471981)
- 作品数：4 被引量：8H指数：2
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- 可溶性转化生长因子βⅡ型受体对LOVO细胞体外增殖和抗肿瘤免疫的影响
- 2008年
- 目的:构建人转化生长因子βⅡ型受体细胞外区(sTGF-βRⅡ)基因的真核表达载体,初步探讨sTGF-βRⅡ对大肠癌LOVO细胞增殖及抗肿瘤免疫的影响。方法:采用DNA重组技术构建sTGF-βRⅡ的表达载体,用脂质体转染技术转染人大肠癌LOVO细胞,以RT-PCR、Western blot法检测目的基因及其蛋白表达。四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和平板法集落形成实验检测sTGF-βRⅡ对LOVO细胞增殖的影响。用淋巴细胞提取液提取外周血淋巴细胞,并与转染了sTGF-βRⅡ的大肠癌LOVO细胞共同培养,用流式细胞仪检测各实验对照组T淋巴细胞亚群的表达。结果:sTGF-βRⅡ在LOVO细胞中获得表达,sTGF-βRⅡ可抑制TGF-β1作用下的LOVO细胞增殖(P<0.01),与淋巴细胞共同培养后的转染组T淋巴细胞亚群的CD4阳性T细胞、CD8阳性T细胞较其它实验组均显著增高(P<0.05)。结论:sTGF-βRⅡ可拮抗TGF-β1的信号传导,抑制TGF-β1作用下的LOVO细胞增殖,进而拮抗TGF-β1的抑制肿瘤免疫作用,使宿主T细胞的抗肿瘤免疫功能得到较大恢复,从而达到抗肿瘤的作用。
- 宋海滨熊斌周瑞刘诗权
- 关键词：大肠癌细胞增殖T淋巴细胞亚群抗肿瘤免疫
- 可溶性转化生长因子βⅡ型受体对LoVo细胞侵袭能力的影响
- 2007年
- 目的构建人转化生长因子βⅡ型受体细胞外区基因的真核表达载体，初步探讨可溶性转化生长因子βⅡ型受体（sTGFβRⅡ）对结直肠癌LoVo细胞侵袭能力的影响。方法采用DNA重组技术构建sTGFβRⅡ的表达载体pcDNA3．1（＋）／sTGFβRⅡ，用脂质体转染技术转染人结直肠癌LoVo细胞，以RT-PCR、Western印迹和细胞免疫荧光技术分别检测目的基因及蛋白表达；Matrigel^TM侵袭试剂盒检测sTGFβRⅡ对LoVo细胞侵袭能力和人脐静脉内皮细胞（HUVEC）血管生成能力的影响，RT-PCR检测sTGFβRⅡ对LoVo细胞基质金属蛋白酶-9（MMP-9）基因和血管内皮生长因子（VEGF）基因表达的影响。结果sTGFβRⅡ在LoVo细胞中获得表达，转染sTGFβRⅡ基因的LoVo细胞侵袭能力（穿膜细胞数为111．0±10．1）明显低于空载体转染组（171．3±3．2）和对照组（177．0±2．7，F=100．1，P〈0．01），HUVEC在人工膜上形成管腔的能力显著下降，转染组管腔数目（1．3±0．6）低于空载体转染组（4．7±1．5）和对照组（5．0±1．0，F=13．3，P〈0．01）。pcDNA3．1（＋）／sTGFβRⅡ转染的LoVo细胞MMP-9和VEGF基因表达明显下降（P〈0．01）。结论sTGFβRⅡ能拮抗TGFβⅡ1的生物活性，可能通过抑制MMP-9和VEGF表达，进而抑制LoVo细胞侵袭和诱导血管生成能力，达到抗肿瘤作用。
- 周瑞熊斌刘诗权王新波
- 关键词：受体转化生长因子Β结直肠肿瘤肿瘤浸润
- 转化生长因子β_1对大肠癌细胞增殖与侵袭能力的影响被引量：6
- 2005年
- 目的:观察 TGF β1 对大肠癌细胞增殖与侵袭能力的影响。方法:体外培养大肠癌细胞株 SW480 和LS174T,加入不同浓度的 TGF β1,应用 MTT法检测不同浓度的 TGF β1 对 SW480 和 LS174T细胞增殖的影响,MatrigelTM侵袭试剂盒检测不同浓度的TGF β1 对 SW480 和 LS174T细胞运动和侵袭能力的影响,免疫细胞化学(SP法)检测SW480和LS174T细胞TGF βRⅡ蛋白和Smad 4蛋白的表达。结果:不同浓度的TGF β1(0.1, 1.0,10.0μg·L-1)对SW480和LS174T细胞的增殖均无影响(P>0.05)。TGF β1 能显著促进 SW480 细胞的运动与侵袭能力, 3 种浓度的 TGF β1 (0. 1, 1. 0, 10. 0μg·L-1 )作用于 SW480 细胞 24 h 后,侵袭率分别为 30. 2%、41.1%和41.7%,与对照组的侵袭率18.6%相比明显升高,而在 LS174T细胞中却观察不到此种效应。免疫细胞化学显示 SW480 细胞表达 TGF βRⅡ蛋白,但不表达 Smad 4 蛋白;而 LS174T细胞表达 Smad 4 蛋白却不表达TGF βRⅡ蛋白。结论:TGF β1 能促进SW480细胞的侵袭能力,这种作用不依赖于Smad 4信号途径,TGF β1 发挥生长抑制和促进侵袭能力的作用可能是通过不同的信号路径实现的。
- 江本元袁宏银熊斌刘诗权
- 关键词：转化生长因子Β1大肠癌增殖
- 可溶性转化生长因子βⅡ型受体对大肠癌生物学行为的影响被引量：3
- 2007年
- 目的探讨可溶性转化生长因子βⅡ型受体(sTGF-βRⅡ)对大肠癌 LoVo 细胞生物学行为的影响。方法采用 DNA 重组技术构建 sTGF-βRⅡ的表达载体 pcDNA3.1(+)/sTGF-βRⅡ,转染人大肠癌 LoVo 细胞,以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot 和免疫荧光技术分别检测目的基因及其蛋白表达。噻唑蓝(MTT)比色法和平板法集落形成实验检测 sTGF-βRⅡ对LoVo 细胞增殖的影响,Annexin V-FITC 和 PI 双染流式细胞术检测 sTGF-βRⅡ对 LoVo 细胞凋亡的影响,Matrigel^(TM)侵袭试剂盒检测 sTGF-βRⅡ对 LoVo 细胞侵袭能力的影响。结果 sTGF-βRⅡ在LoVo 细胞中获得表达。sTGF-βRⅡ可抑制 TGF-β1作用下的 LoVo 细胞增殖、凋亡和体外侵袭能力。结论 sTGF-βRⅡ可拮抗 TGF-β1的信号传导,对大肠癌 LoVo 细胞的侵袭能力具有一定的抑制作用,在大肠癌的治疗中可能有一定的作用。
- 周瑞熊斌王新波
- 关键词：大肠癌增殖脱噬作用
